ASSESSMENT OF THE DESTRUCTIVE PROCESSES IN CHROMATIN OF GRANULOSA CELLS AND FUNCTIONAL STATUS OF OOCYTE IN BOVINE OVARIAN FOLLICLES | Оценка деструктивных процессов хроматина гранулезных клеток овариальных фолликулов коров и функциональный статус ооцита

English. Currently, there is the possibility of more detailed studies to the study of oocytes and somatic cells (granulosa cells). The possibility to develop successful models of maturation of female gametes defines the possibility to improve existing methods for the selection of donor eggs and the search for new donor eggs. Oocyte maturation in vivo occurs with the participation of structural follicle elements and follicular fluid. Granulosa cells are widely used in bovine oocyte maturation systems and used in cloning and transgenesis technologies. Purpose of this study: to perform destructive changes granulosa cells in ovarian follicles of bovines (diameter of 3-5 mm), which contain growing(ВСВ-) or completed the growth phase of oocytes (ВСВ-). Method of the research is functional testing of oocytes using the vital dye BCB (brillant cresyl blue - diamond crystal blue). Viability indices in granulosa cells isolated from follicles that contain oocyte s that grow or complete the growth phase were determined by flow cytometry. The result. It was found, that cellsof granulosa from cow follicles are characterized by different indicators of apoptosis levels depending on the status of oocytes (completed growth and growing) isolated from these follicles. The proportion of apoptotic granulosa cells in bovine follicles of containing oocytes that completed the growth phase, exceeded that in follicles containing growing oocytes by 11% (29% vs. 18%, c:d P less 0.05). The data obtained using flow cytometry, allow us to evaluate the level of apoptosis in granulosa cells of bovine ovarian follicle as indicator of functional status of developing oocytes (growing or completed growth phases). This indicator can be used in prognosis of competencies for maturation of bovine oocytes.

Russian. В связи с совершенствованием клеточных репродуктивных технологий в современном животноводстве появилась возможность для более подробных исследований по изучению ооцита и соматических клеток (клетки гранулезы) фолликула. Необходимость разработки успешных моделей дозревания женских гамет определяет потребность совершенствования существующих методик отбора донорских яйцеклеток). Созревание ооцита in vivo происходит при непосредственном участии структурных элементов фолликула, содержащихся в фолликулярной жидкости. Клетки гранулезы широко используются в системах дозревания ооцитов коров, а также в технологиях клонирования и трансгенеза. Цель исследования - проанализировать деструктивные изменения клеток гранулезы в овариальных фолликулах коров (диаметр 3-5 мм), содержащих растущие (ВСВ-) или завершившие фазу роста ооциты (ВСВ+). Тестирование ооцитов по функциональному признаку проводилось с помощью витального красителя ВСВ (brillant cresyl blue - бриллиантовый кристаллический голубой). Показатели жизнеспособности в клетках гранулезы, выделенных из фолликулов, содержащих растущие или завершившие фазу роста ооциты, определяли методом проточной цитометрии. Установлено, что гранулезные клетки из фолликулов коров характеризуются различными показателями уровней апоптоза в зависимости от статуса ооцитов (завершившие рост и растущие), выделенных из этих фолликулов. Доля апоптотических клеток гранулезы в фолликулах коров, содержащих завершившие фазу роста ооциты, значительно превышала таковую в фолликулах, содержащих растущие ооциты (29 % против 18 %, c:d Р меньше 0,05). Данные, полученные при помощи проточной цитометрии, позволяют рассматривать уровень апоптозов в клетках гранулезы овариальных фолликулов коров как индикатор функционального статуса развивающегося в нем ооцита (растущий или завершивший фазу роста). Данный показатель возможно использовать при прогнозировании компетенций ооцитов коров к созреванию in vitro.