The modeling of extracorporal maturation systems of cattle oocytes using the structural components of ovarian follicules | Моделирование систем экстракорпорального созревания ооцитов крупного рогатого скота с использованием структурных компонентов овариальных фолликулов

English. The creation of an effective unified maturation system of donor oocytes provides an increase in the efficiency of innovative cellular reproductive technologies. The comparative analysis of the meiotic maturation indicators of bovine oocytes, which were matured in different cultural systems modified by follicular structural components (FSC – follicular walls, granulosa cells, proteins) and follicular fluid, as well as the potential for pre-implantation embryonic development were evaluated in this study. Oocytes matured in following cultural systems: medium TC-199 supplemented with 10% fetal bovine serum and 50 mug/ml of estradiol, 10 mug/ml of luteinizing hormone (LH), 10 mug/ml of follicle-stimulating hormone (FSH); medium TC-199 with 10% estrous cow serum; medium TC-199 with 50% liquid from follicles with a diameter of 9 mm; medium TC-199 supplemented with the follicular fluid proteins with molecular weight = 65 kDa; medium TC-199 with 10% fetal bovine serum and 1x10E6 granulosa cells; medium TC-199 with the addition of 10% fetal bovine serum and follicle tissues were analyzed. Antibiotics were added to cultural media of all experimental groups of oocytes. The usage of FSC ensured the decrease in the proportion of oocytes with degenerated chromatin, which contribute the rise of the level of pre-implantation embryos at the blastocyst stage. The proportion of blastocysts developed from oocytes matured in medium supplemented with follicular walls was 43.5%. In the same experimental group, the number of degenerated embryos was 6.45%. The obtained data are supposed to be used for modeling the cultural systems of cow oocytes in order to improve the egg quality.

Russian. Создание эффективной унифицированной системы дозревания донорских ооцитов обеспечит повышение результативности инновационных клеточных репродуктивных технологий. В исследовании проведен сравнительный мониторинг показателей мейотического созревания ооцитов коров, созревших в различных системах, дополненных структурными компонентами фолликулов (СКФ - стенки фолликулов, клетки гранулезы, белки) и фолликулярной жидкостью, а также потенций к развитию из них доимплантационных эмбрионов. Анализу подверглись ооциты, прокультивированные в следующих системах: среда ТС-199 с добавлением 10% фетальной бычьей сыворотки (ФБС), 50 мкг/мл эстрадиола, 10 мкг/мл лютеинизирующего гормона (ЛГ), 10 мкг/мл фолликулостимулирующего гормона (ФСГ); среда ТС-199 с 10% эстральной сывороткой коров; среда ТС-199 с 50% жидкости из фолликулов диаметром 9 мм; среда ТС-199 с добавлением белков фолликулярной жидкости молекулярной массой 65 кДа; среда ТС-199 с 10% ФБС и 1x10E6 клеток гранулезы; среда ТС-199 с 10% ФБС и тканью фолликула. В культуральные среды ко всем исследованным группам ооцитов добавляли антибиотики. Использование CКФ обеспечило значительное снижение доли ооцитов с дегенерированным хроматином, что способствовало увеличению уровня доимпланационных эмбрионов на стадии бластоцисты. Доля бластоцист, развившихся из ооцитов, созревших в среде со стенками фолликулов, составила 43,5%. В этой же группе выявлен минимальный уровень дегенерированных зародышей (6,45%). Полученные данные предлагается использовать при моделировании систем дозревания ооцитов коров с целью повышения качества яйцеклеток.