Micropropagación y organogénesis de Dioscorea alata (Ñame)

Spanish; Castilian. Para establecer una metodología eficiente para la propagación in vitro del ñame (Dioscorea alata) se obtuvieron plantas a partir de tubérculos en condiciones de vivero. Para micropropagación se extrajeron segmentos de tallo de 1cm de largo con un nudo y 1-2 yemas laterales; para organogénesis se utilizaron las plantas obtenidas por micropropagación, de las cuales se escindieron segmentos de microesquejes. Los explantes fueron cultivados en medio Murashige y Skoog (MS, 1962) suplementado con diferentes combinaciones hormonales. Para la micropropagación se utilizaron medios constituidos solo con las sales MS completas o reducidas a 1/5, y tres medios suplementados con hormonas vegetales, obteniéndose un promedio de 4,90 brotes por explante en el medio suplementado con 0,5mg·l-1 BA. En la multiplicación masiva, el medio de cultivo fue suplementado con 2mg·l-1 BA y se obtuvo un promedio de 5,75 plantas por explante, a los 90 días de cultivo. Para la inducción de organogénesis directa se utilizó MS suplementado con 1mg·l-1 BA + 0,5mg·l-1 ANA. Tras 105 días de cultivo se observó un promedio de 25,15 brotes por explante. El 10% de los microesquejes cultivados presentaban formación de callo y la regeneración de 5,3 brotes por fragmento de callo de ~1cm². La regeneración de D. alata por micropropagación se obtiene después de 4,5 meses de cultivo, mientras que por organogenésis se obtiene a los 6 meses, pero con mayor número promedio de brotes por explante. En ambos sistemas, el enraizamiento se logró en el mismo medio usado para el establecimiento del proceso. Las plantas regeneradas a partir de estos sistemas se aclimataron en sustratos de tierra negra abonada y arena lavada (1:1) con eficiencia de 70,7% de plantas aclimatadas.

English. To establish an efficient in vitro regeneration system for D. alata plants, yam tubers were potted in a mixture of soil and organic humus in greenhouse conditions. For micropropagation 1cm long stem sections with 1-2 lateral buds were obtained from these plants. For organogenesis, micropropagated plants were used as sources of explants (microcuttings). Explants were cultured on Murashige and Skoog (1962) media (MS) supplemented with different hormonal combinations. For micropropagation, MS and 1/5 MS were used as control media. Three more media with hormones were also used for micropropagation. After 45 days, 4.9 buds per explant were obtained on MS supplemented with 0.5mg·l-1 BA. Mass multiplication was achieved in MS supplemented with 2mg·l-1 BA. After 90 days an average of 5.75 plants per explant was obtained. MS supplemented with 1mg.l-1 BA + 0.5mg·l-1 ANA was used for the establishment of organogenesis. After 105 days, an average of 25.15 buds per explant was obtained (direct organogenesis). Callus tissue production was observed on 10% of microcutting explants cultured on the same medium with an average of 5.3 buds per 1cm² callus fragment (indirect organogenesis). Micropropagated D. alata plants were obtained after 4.5 months of culture; while plants originated through direct organogenesis took 6 months to reach maturity; however, they produce a higher number of buds per explant. D. alata plants regenerated through micropropagation and organogenesis processes were potted with soil and river sand (1:1) and 70.7% plant acclimatization was obtained.

Portuguese. Para estabelecer uma metodologia eficiente para a propagação in vitro do inhame (Dioscorea alata) se obtiveram plantas a partir de tubérculos em condições de viveiro. Para micropropagação se extraíram segmentos do caule de 1cm de comprimento com um nó e 1-2 gemas laterais; para organogênese se utilizaram as plantas obtidas por micropropagação, das quais se dividiram segmentos de microesquejes. Os explantes foram cultivados em meio Murashige e Skoog (MS, 1962) suplementado com diferentes combinações hormonais. Para a micropropagação se utilizaram meios constituídos somente com os sais MS completos ou reduzidos a 1/5, e três meios suplementados com hormônios vegetais, obtendo-se uma média de 4,90 brotes por explante no meio suplementado com 0,5mg·l-1 BA. Na multiplicação massiva, o meio de cultivo foi suplementado com 2mg·l-1 BA e se obteve uma média de 5,75 plantas por explante, aos 90 dias de cultivo. Para a indução de organogênese direta se utilizou MS suplementado com 1mg·l-1 BA + 0,5mg·l-1 ANA. Depois de 105 dias de cultivo se observou uma média de 25,15 brotes por explante. O 10% dos microesquejes cultivados apresentavam formação de calo e a regeneração de 5,3 brotes por fragmento de calo de ~1cm². A regeneração de D. alata por micropropagação se obtém depois de 4,5 meses de cultivo, enquanto que por organogênese se obtém aos 6 meses, mas com maior número médio de brotes por explante. Em ambos os sistemas, o enraizamento se logrou no mesmo meio usado para o estabelecimento do processo. As plantas regeneradas a partir destes sistemas se aclimataram em substratos de terra negra adubada e areia lavada (1:1) com eficiência de 70,7% de plantas aclimatadas.