Application of biochemical luminescence for immunodosing pesticides in fruit, vegetables and wine: development of a methodology and equipment | Application de la biochimiluminescence aux immunodosages de pesticides dans les fruits, légumes et vins : mise au point d'une méthodologie et d'une instrumentation

French. Les performances des tests ELISA utiles à l'analyse rapide et spécifique des pesticides dépendent de la spécificité de l'anticorps, de la nature des échantillons et des systèmes de détection des complexes anticorps-analytes. Ces trois facteurs ont été abordés dans cette étude qui s'articule autour de trois parties : la comparaison des performances d'une détection biochimiluminescente (système luminol/peroxydase/p-iodophénol/H²O²) par rapport à une détection colorimétrique dans le cas de l'immunoanalyse de la procymidone dans les vins et l'extension de l'application du test au raisin et à la salade ; la production d'anticorps polyclonaux spécifiques de la phosalone ; l'étude des contraintes instrumentales liées à la détection en luminométrie. Après une optimisation du dosage et de la détection BCL, la luminescence s'est avérée plus facile à mettre en oeuvre et offre une meilleure limite de détection que la colorimétrie, mais sa répétabilité est moins bonne. Les essais préliminaires de dosage de la phosalone ont conduit à une limite de détection dans l'eau de 0.1 mg/l. L'étude des paramètres instrumentaux influençant la qualité du dosage et réalisée sur un luminomètre portable monotube, révèle la nécessité d'une thermorégulation. L'emploi d'un guide de lumière pourrait permettre de minimiser les erreurs de répétabilité engendrées par des sources hétérogénes. Les pertes de lumière engendrées par ce système qui assure une flexibilité de l'appareil pour des mesures déportées n'altèrent pas la qualité de mesure.

English. The efficacy of ELISA tests for fast, specific analysis of pesticide residues depends on the specificity of the antibody, the nature of the samples and the systems for detecting the antibody / reagent complexes. This paper studied these three factors. It compared the efficacy of biochemical luminescent detection (luminol / peroxydase / p-iodophenol / H2O2) with colorimetric detection for immunoanalysis of procymidone in wine, and extended the test to grapes and lettuce. It considered the production of polyclonal antibodies specific to phosalone and studied instrumentation problems related to luminometry. After improving the dosing and optimising the biochemical luminescence detection, luminescence proved easier to use and was more sensitive than colorimetry, but repeatability was not as good. Preliminary ELISA tests applied to phosalone analysis showed a detection limit of 0.1 mg/l in water. A study of the influence of the instrumentation on the dosing accuracy using a portable monotube luminometer showed that temperature regulation was necessary. The use of a light guide might reduce repeatability errors caused by extraneous light sources. Light losses in the light guides, which would ensure that the remote measurements could be made would not affect the accuracy of the measurements.