Получение и характеристика гибридных соматических клеток | Obtaining and characterization of hybrid somatic cells

Russian. Метод гибридизации позволяет создавать новые клеточные системы, которые помогают решать фундаментальные проблемы биологии, медицины. Гибридные клетки образуются в результате слияния двух целых клеток в одну с общей цитоплазмой и единым ядром. Эти клетки используются для исследований действия генов и их регуляции, картирования хромосом, изучения взаимодействия вирусов и клеток хозяина. Гибридные клетки можно получить путем слияния клеток различных тканей как одного вида животного, так и разных видов. Данный метод является инструментом для решения актуальных проблем вирусологии, иммунологии, биотехнологии. В работе использовались клетки почки свиньи и фибробласты гуся (С х Г). Первые колонии клеток наблюдали на 24 сутки культивирования. Формирование монослоя отмечали на 44 сутки. В популяции полученных клеток отмечали клетки, содержащие 3 и более ядер. В процессе культивирования многоядерные клетки исчезали. Цитогенетические исследования 3 пассажа С х Г показали, что модальный класс представлен 3-мя пиками – 36, 38, 40 хромосомами. Интервал изменчивости колеблется от 17 до 69. На 11 и 21 пассажах модальный класс представлен 40 хромосомами. Интервал изменчивости для 11 пассажа был в пределах от 20 до 86 хромосом, для 21 пассажа до 43. В гибридной популяции клеток С х Г/2 1 колонии отмечаются на 21 сутки культивирования, формирование монослоя на 40 сутки. В данной популяции гибридных клеток также отмечается наличие многоядерных клеток (3–4 ядра). На уровне 11 пассажа многоядерные клетки отсутствуют. Цитогенетические исследования показали, что модальный класс 11 и 20 пассажей С х Г/2 составляет 40 хромосом. В клонах С х Г–2/5 и С х Г–2/6 монослой представлен однородными клетками. Модальный класс хромосом в этих клонах равен 40. Все полученные популяции гибридных клеток обладают высокой пролиферативной активностью.

English. The hybridization method allows creating new cellular systems that help solve fundamental problems of biology and medicine. Hybrid cells are formed by merging two whole cells into one with a common cytoplasm and a single nucleus. These cells are used to study the action of genes and their regulation, to map chromosomes, and to study the interaction of viruses and host cells. Hybrid cells may be obtained by merging cells of different tissues of both the same animal species and different species. This method is a tool for solving topical problems of virology, immunology, and biotechnology. In the work, there were used pig kidney cells and goose fibroblasts (Р x G). The first cell colonies were observed on the 24th day of cultivation. The formation of the monolayer was observed on the- 44-th day. In the population of the obtained cells, cells containing 3 or more nuclei were noted. In the process of cultivation, the multinucleated cells disappeared. Cytogenetic studies of 3 passages Р x G have shown that the modal class is represented by 3 peaks - 36, 38, 40 chromosomes. The range of variation ranges from 17 to 69 on passages 11 and 21, the modal class is represented by 40 chromosomes. The variation interval for 11 passages was between 20 and 86 chromosomes, and for 21 passages - to 43. In a hybrid population of cells Р x G/2 1 colonies are observed on the 21-th day of cultivation, the formation of a monolayer on the 40-th day. In this population of hybrid cells, the presence of multinucleated cells (3-4 nuclei) is also noted. At the level of passage 11, there are no multinucleated cells. Cytogenetic studies have shown that the modal class of 11 and 20 passages Р x G/2 is 40 chromosomes. In clones Р x G-2/5 and Px G-2/6, the monolayer is represented by homogeneous cells. The modal class of chromosomes in these clones is 40. All the resulting populations of hybrid cells have high proliferative activity.