Localization of mitochondria in donor oocytes obtained from cow ovaries post mortem | Локализация митохондрий в донорских ооцитах коров, выделенных из яичников post mortem

English. A comparative morphofunctional monitoring of the population of donor oocytes isolated from cow ovaries at different stages of the ovarian cycle was carried out; the chromatin status and the intracytoplasmic localization of mitochondria of oocyte-cumulus complexes were evaluated. Oocytes obtained from antral follicles (2-6 mm) were analyzed. Gametes were cultured at a temperature of 38.5 deg C, in an atmosphere with 5% CO2, 90% humidity for 24 hours in T-199 medium supplemented with 10% fetal bovine serum, 10000000 granulosa cells/ml, 50 ng/ml bovine prolactin. Mitochondria were visualized with using of vital dye rhodamine 123, the chromatin status was assessed by Tarkowski`s cytogenetic method. It was demonstrated that 45% and 50% of oocytes isolated from the ovaries in the stage of follicular growth and developed corpus luteum had a peripheral localization of mitochondria in ooplasm. The proportion of mature oocytes with the peripheral and uniform localizations of mitochondria during aspiration were 88% and 85%, respectively, while the maturation rate of oocytes with the mitochondrial clusters reached only 66%. Among oocytes with cluster localization of mitochondria a high percent of cells with signs of chromatin degeneration after 24 h culture was noted (90%) compared with groups of oocytes with peripheral and uniform distribution (2% and 41%, respectively, P is less than 0.001). Oocytes with the peripheral localization of mitochondria were characterized by homogeneous ooplasm (58%). Gametes with the cluster distribution of mitochondria mostly had a heterogeneous ooplasm (52%) and cells with the uniform distribution – homo- and heterogeneous ooplasm (29% and 36%, respectively).

Russian. Проведен сравнительный морфофункциональный мониторинг популяции донорских ооцитов, выделенных из яичников коров postmortem на разных стадиях овариального цикла, с учетом статуса хроматина и интрацитоплазматической локализации митохондрий ооцит-кумулюсных комплексов. Анализу подвергались ооциты, полученные из антральных фолликулов (2-6 мм), окруженные не менее, чем 5-6 слоями клеток кумулюса. Показано, что 45% и 50% ооцитов, выделенных из яичников на стадии фолликулярного роста и развитого желтого тела, соответственно, имеют периферическую локализацию митохондрий в ооплазме. Доля созревших ооцитов с периферической и равномерной локализацией митохондрий на момент аспирации их из яичников составила 88 и 85% соответственно, а уровень созревших ооцитов в группе с кластерным типом локализации достиг лишь 66%. В группе ооцитов с кластерной локализацией митохондрий отмечен высокий уровень ооцитов с дегенерированным хроматином после 24 ч культивирования (90%) по сравнению с группами с периферической и равномерной локализацией митохондрий (2 и 41% соответственно, P менее 0,001). Ооциты с периферической локализацией митохондрий характеризовались гомогенной ооплазмой (58%). Гаметы с кластерным распределением митохондрий в основном имели гетерогенную ооплазму (52%), а клетки с равномерным распределением - гомо- и гетерогенную ооплазму (29 и 36% соответственно).