Detecção de Pantoea ananatis em sementes de milho

English. ABSTRACT The corn (Zea mays L.) crop is subject to the occurrence of several diseases, including white spot, caused by Pantoea ananatis. Recently, this bacterium has been detected in corn seeds. Thus, the objectives of this study were: to evaluate culture media for P. ananatis detection, to detect this bacterium in eight corn seed genotypes, and to identify and biochemically and molecularly characterize the obtained bacterial isolates. To evaluate the culture media, the isolate of P. ananatis was cultivated in five culture media (523, NA, TSA, PA10 and PA20) with absence and presence of the fungicides cycloheximide and thiophanate-methyl, and three replicates each. The efficiency of each culture medium was determined based on the diameter of colonies and on the counting of colonies as CFU mL-1. To detect the bacterium in seeds, eight corn genotypes were evaluated. Seed extracts underwent serial dilution (10-1 to 10-2) and were grown in three culture media (523, NA and TSA) with three replicates for each dilution. The obtained isolates were biochemically, physiologically and molecularly characterized. The culture media TSA and 523 with addition of cycloheximide were effective in detecting P. ananatis. This bacterium was detected in five corn seed genotypes. TSA with addition of cycloheximide can be recommended for P. ananatis detection in corn seeds.

Portuguese. RESUMO A cultura milho (Zea mays L.) está sujeita a ocorrência de várias doenças, entre elas a mancha branca, causada pela bactéria Pantoea ananatis. Recentemente a bactéria foi detectada em sementes de milho. Diante disso, este trabalho teve como objetivos: avaliar meios de cultura para detecção de P. ananatis, detectar a presença da bactéria em oito genótipos de sementes milho, identificar e caracterizar bioquímica e molecularmente os isolados bacterianos obtidos. Para avaliação dos meios de cultura, o isolado de P. ananatis foi cultivado em cinco meios de cultura (523, NA, TSA, PA10 e PA20) com ausência e presença dos fungicidas ciclohexamida e tiofanato metílico, com três repetições cada. A eficiência de cada meio de cultura foi determinada a partir do diâmetro das colônias e contagem do número de colônias em UFC mL-1. Para detecção da bactéria em sementes, oito genótipos de milho foram avaliados. Os extratos das sementes foram diluídos em série (10-1 a 10-2) e cultivados em três meios de cultura (523, NA e TSA) com três repetições para cada diluição. Os isolados obtidos foram caracterizados bioquímica, fisiologicamente e molecularmente. Os meios de cultura TSA e 523 com adição de ciclohexamida foram eficientes para a detecção de P. ananatis. A bactéria foi detectada em cinco genótipos de sementes de milho. O meio de cultura TSA com adição de ciclohexamida pode ser recomendado para a detecção de P. ananatis em sementes de milho.