Влияние наночастиц высокодисперсного кремнезема на показатели фертильности ооцитов Bos taurus, завершивших фазу роста in vivo или in vitro | Effect of highly dispersed silica nanoparticles on the fertility of Bos taurus oocytes that have finished the growth phase in vivo or in vitro

Russian. Модернизированы система созревания и режим культивирования донорских ооцитов Bos taurus, оцененных на момент их извлечения из антральных фолликулов как растущие [ВСВ(-)] или завершившие фазу роста [ВСВ(+)]. Эксперименты выполнены на ооцитах из овариальных фолликулов (диаметром 2-6 мм) яичников коров и половозрелых телок. До культивирования гаметы подвергались ВСВ-тестированию для определения функционального статуса ооцита. Среды для культивирования в опытных группах дополняли наночастицами высокодисперсного кремнезема (нВДК) в концентрации 0,001%, что обеспечило высокий выход ооцитов (65-92%), реинициировавших мейоз через 30 ч культивирования, во всех группах эксперимента. Использование нВДК в качестве добавки в среду созревания ооцитов, не завершивших фазу роста in vivo, и пролонгирование времени культивирования до 30 ч позволило значительно увеличить долю созревших ооцитов и уровень раздробившихся клеток (от 42 до 69% и от 16 до 37%, соответственно). Представленный в исследовании модернизированный протокол созревания ВСВ(-)-ооцитов коров in vitro (внесение в среду культивирования нВДК в концентрации 0.001% и пролонгация времени культивирования до 30 ч) позволяет увеличить выход яйцеклеток, компетентных к созреванию и получению из них эмбрионов на стадии бластоцисты (от 5% до 22%), а также, априори, число высококачественных гамет с перспективой их использования в клеточной и генетической инженерии.

English. The maturation system and the cultural regime of donated Bos taurus oocytes have been modernized. The oocytes were recognized at the moment of extraction from antral follicles as growing [VSV(-)] or completed the growth phase [VSV(+)]. The experiments were performed on oocytes from ovarian follicles (2-6 mm in diameter) of the ovaries of cows and mature heifers. Before culture, the gametes were estimated with BCB-test to determinate the functional status. Culture media in the experimental groups were supplemented with 0.001% highly dispersed silica nanoparticles (HDSns), which ensured a high yield of oocytes (65-92%) reinitiated meiosis after 30 h of cultivation in all experimental groups. The use of HDSns as an addition to the medium for the maturation of oocytes that have not completed the growth phase in vivo and the prolongation of the cultivation time to 30 h provided significantly increase the proportion of matured oocytes and the level of fragmented cells (42% to 69% and 16% to 37%, respectively).The modernized protocol of in vitro maturation of VSV (-) bovine oocytes presented in the study (addition of HDSns in a concentration of 0.001% to the culture medium and prolongation of cultivation time up to 30 h) allows increasing the yield of oocytes competent for maturation and obtaining embryos at the blastocyst stage (5% to 22%), as well as, a priori, the number of high-quality gametes with the prospect of their using in cell and genetic engineering.