Comparison of the immunomagnetic separation method (IMS) with an automated immunoconcentration (VIDAS-ICE) system for detecting Escherichia coli O157:H7 in bovine raw milk and unpasteurized cream

English. In order to compare two commercially available immunoseparation/immunoconcentration methods for the isolation of Escherichia coli O157:H7 from food enrichments, a total of 80 dairy samples (40 bovine raw milk samples and 40 unpasteurized cream samples) were tested. The samples were collected in the Parmesan cheese production area, Parma province (Northern Italy), from 9 cheese factories. The IMS requires a 24 h enrichment in m-TSB+acriflavin and after immunoseparation the Dynabeads-bacteria complexes are plated onto CT-SMAC. TheVIDAS-ICE method needs a double enrichment, 6 h in m-TSB+acriflavin followed by 18 h in CT-MacConkey broth, and after automated immunoconcentration the samples are streaked onto O157:H7 ID chromogen medium. Even if no colonies of E. coli OI57:H7 were isolated from the dairy samples, the IMS technique was laborious compared to the VIDAS ICE method. Moreover, confirmation of suspect colonies grown on CT-SMAC was time-consuming, due to the higher number of sorbitol-negative colonies to be tested, compared to the lower number of green colonies grown on O157:H7 ID (433 vs. 153)

Italian. Scopo del presente lavoro e' la comparazione di due metodiche di immunoseparazione/immunoconcentrazione per la ricerca di Escherichia coli O157:H7. Allo scopo sono stati analizzati 80 campioni di prodotti lattiero-caseari (40 campioni di latte bovino crudo e 40 di panna non pastorizzata) prelevati in 9 caseifici addetti alla produzione del formaggio Parmigiano-Reggiano nella provincia di Parma. La metodica IMS (immunoseparazione magnetica) richiede un arricchimento di 24 ore in m-TSB+acriflavina, seguito dall'immunoseparazione e dalla piastratura dei complessi Dynabeads-microrganismi su piastre di CT-SMAC. La metodica VIDAS-ICE (sistema automatizzato di immunoconcentrazione) richiede un doppio arricchimento (6 ore in m-TSB+acriflavina e 18 ore in brodo CT-MacConkey), seguito da una fase di immunoconcentrazione automatizzata e successiva piastratura su terreno cromogeno O157:H7 ID. Sebbene non sia stato isolato nessun ceppo di E. coli O157:H7, la metodica IMS si e' rivelata piu' laboriosa, soprattutto per il maggior numero di colonie sospette cresciute su CT-SMAC che hanno richiesto la conferma biochimica ed antigenica (433 colonie da IMS, contro 153 colonie da VIDAS-ICE)