Effects of serum addition to culture medium on efficiency of producing in vitro embryos in cattle | Влияние сыворотки в среде культивирования на эффективность получения in vitro эмбрионов у крупного рогатого скота

English. Biotechnology of in vitro embryo production (IVP) and their transfer to recipient animals can increase the rate of genetic progress in the breeding of industrial cattle breeds and ensure the conservation of small breeds. Efficiency of IVP technology can be increased by optimizing the in vitro embryo culture conditions (IVC). There was studied of supplementation of fetal bovine serum (FBS) in BO-IVC medium from 5th day of bovine IVP embryos cultivation on their development and viability in vitro. The post mortem isolated bovine oocytes (n=250) were cultured in the maturation medium, in vitro fertilized with the frozen-thawed sperm and transferred to the culture medium for embryo development. On day 7 after oocytes fertilization the number of embryos developed to the blastocyst stage (blastocyst rate) and their quality (the rate of blastocyst of Grade 1) were evaluated, and at the end of cultivation (day 10), the number of blastocysts that reached the hatching stage (viability check) was determined. For developing embryos, there was used either commercial BO-IVC medium alone (System 1) or the same medium added with 5% FBS starting from the fifth day of culturing (System 2). In systems 1 and 2, the yield of blastocysts on the 7th day of culturing was the same and amounted to 34.5±2.8 and 30.4± 1.0%, and their number belonging to category 1 was 57.7±3.5 and 65.6± 5.3%, respectively. At the same time, the presence of FCS increased the portion of blastocysts that hatched on day 10 of culturing from 42.7±4.7 to 70.9±3.2% (p less than 0.01). It is concluded, that the BO-IVC medium is highly effective for obtaining IVP embryos in cattle. Also, it is obvious that the addition of FBS to this medium from the 5th day of culturing does not affect the development of embryos to the blastocyst stage, but increases their viability in vitro conditions.

Russian. Биотехнология, направленная на получение эмбрионов in vitro (in vitro embryo production, IVP) и их трансплантацию животным-реципиентам, позволяет увеличить темпы генетического прогресса в селекции индустриальных пород крупного рогатого скота и обеспечить сохранение малочисленных пород. Повысить эффективность данной технологии можно за счет моделирования условий культивирования эмбрионов in vitro (in vitro embryo culture, IVC). Было изучено влияние введения фетальной бычьей сыворотки (ФБС) в среду BO-IVC с 5-го дня культивирования IVP-эмбрионов на их развитие и жизнеспособность в условиях in vitro. Выделенные post mortem ооциты коров (n=250) инкубировали в среде созревания, оплодотворяли in vitro замороженно-оттаянной спермой и переносили в среду для развития эмбрионов. На 7-е сутки после оплодотворения ооцитов проводили подсчет числа эмбрионов, развившихся до стадии бластоцисты, и оценку их качества, а в конце культивирования (10-й день) определяли количество бластоцист, достигших стадии вылупления (тест на жизнеспособность). Для эмбрионального развития использовали либо только коммерческую среду BO-IVC (система 1), либо эту же среду, но с добавлением в нее с 5-го дня культивирования 5% ФБС (система 2). В системах 1 и 2 выход бластоцист на 7-е сут культивирования был одинаковым и составлял 34,5±2,8 и 30,4±1,0%, а их количество, относящееся к 1 категории, - 57,7±3,5 и 65,6±5,3% соответственно. В то же время, присутствие ФБС повышало долю вылупившихся бластоцист на 10-й день культивирования с 42,7±4,7 до 70,9±3,2% (P меньше 0,01). Сделан вывод о высокой эффективности среды BO-IVC для получения IVP-эмбрионов у крупного рогатого скота. Также очевидно, что добавление ФБС в данную среду c 5-го дня культивирования не влияет на развитие эмбрионов до стадии бластоцисты, но повышает их жизнеспособность в условиях in vitro.