The use of monoclonal antibodies to assess the B-cell immunity of cattle, sheep and goats | Использование моноклональных антител для оценки В-клеточного звена иммунитета крупного и мелкого рогатого скота

English. Monoclonal antibodies were obtained by standard methods using a 2-fold intra-splenic injection of Ig with an interval of 14 days. As a result, an oligoclonal system of monoclonal antibodies to conformational epitopes of cattle IgM was created, specifically interacting with the antigenic determinants of the original, membrane-bound form of IgM, which is the basis of the antigenic B-cell receptor (BCR). B cells are an important structural component of the immune system. The process of antibody formation depends on the number and functional state of B cells. Early detection of target cells, which may be lymphocytes or their subpopulations, is important in infectious diseases. Monomeric IgM pentamer molecules are anchored in the B cell membrane and serve as the basis of the antigenic receptor. In the experiment, the method of immunoperoxidase staining was used, which is based on the detection and determination of the degree of intensity of membrane (sIgM) and cytoplasmic IgM (cIgM) staining. The number of B-lymphocytes in the blood of cattle (25.3±2.6%), sheep (32.0± 2.2%) and goats (20.0±1.5%) was determined. In the blood of calves aged 1 month, the number of B-lymphocytes is 19.2 ± 0.8%. Also, cells with the cytoplasmic form (cIgM) of class M immunoglobulin were found in the blood of calves. cIgM cells can be pre-B cells with cytoplasmic m-chains or plasma cells synthesizing a soluble form of IgM. It has been found that the main form of localization of surface IgM-receptors on B cells of cattle and sheep is an uneven distribution of sIgM along the perimeter of the cell, namely in the form of "patch-endocytosis", which is 68.9±3.9% and 84.0±4.2%, respectively; expression of sIgM-receptors on B lymphocytes of cattle is 8.0(high) ±1.0% and 10.5(low) ± 1.5%, and sheep - 6.3(high) ± 0.9% and 13.3(low) ± 0.6%. Thus, in healthy animals, the sIgM-receptors of B lymphocytes are distributed unevenly and with low density in the membrane.

Russian. Моноклональные антитела получали стандартными методами, используя 2-кратную внутри-селезёночную инъекцию Ig с интервалом 14 дней. В результате создана олигоклональная система моноклональных антител к конформационным эпитопам IgM рогатого скота специфически взаимодействующая с антигенными детерминантами первоначальной, мембраносвязанной формы IgM, которая является основой антигенного рецептора В-клетки (BCR). В-клетки являются важным структурным компонентом иммунной системы. От количества и функционального состояния В-клеток зависит процесс антителообразования. Важное значение при инфекционных заболеваниях имеет раннее обнаружение клеток-мишеней, которыми могут являться лимфоциты или их субпопуляции. Мономерные молекулы пентамера IgM заякорены в мембране В-клетки и служат основой антигенного рецептора. В эксперименте использован метод иммунопероксидазного окрашивания, который основан на обнаружении и определении степени интенсивности окрашивания мембранного (sIgM) и цитоплазматического IgM (cIgM). Определено количество В-лимфоцитов в крови крупного рогатого скота (25,3±2,6%), овец (32,0±2,2%) и коз (20,0±1,5%). В крови телят в возрасте 1 мес. число В-лимфоцитов составляет 19,2±0,8%. Также в крови телят обнаружены клетки с цитоплазматической формой (сIgM) иммуноглобулина класса М. сIgM-клетки могут быть пре-В-клетками с цитоплазматическими m-цепями или плазматическими клетками, синтезирующие растворимую форму IgM. Установлено, что основной формой локализации поверхностных IgM- рецепторов на В-клетках крупного рогатого скота и овец является неравномерное распределение sIgM по периметру клетки, а именно в форме "пэтч-эндоцитоз", которое составляет 68,9±3,9% и 84,0±4,2% соответственно; экспрессия sIgM-рецепторов на В-лимфоцитах крупного рогатого скота составляет 8,0(high)±1,0% и 10,5(low)±1,5%, а у овец – 6,3(high)±0,9% и 13,3(low)±0,6%. Таким образом, у здоровых животных sIgM-рецепторы В-лимфоцитов распределены в мембране неравномерно и с низкой плотностью.