The functional state of bovine granulosa cells when exposed to albumin and cholesterol in vitro | Функциональное состояние клеток гранулёзы коров при воздействии альбумина и холестерина in vitro

English. In cattle during early lactation, disturbances in liver function may occur, which lead to changes in the content of various metabolites in the blood and follicular fluid, including albumin and cholesterol, as well as to inhibition of the growth and development of ovarian follicles. The research aim was to study the proliferative and steroidogenic activity of bovine granulosa cells and their apoptotic changes in vitro when exposed to bovine serum albumin (BSA) and cholesterol in various concentrations. Cells isolated from follicles of 1-8 mm in diameter were cultured for 48 h in a serum-free medium containing BSA, 0.5-20.0 mg/mL, or cholesterol, 1-100 mcg/mL. After culturing, the concentration of estradiol-17beta and progesterone in the medium was determined, and the proliferative activity and apoptotic changes in the cells were assessed. Elevating the BSA content in the medium to 1-20 mg/mL led to an increase in the proportion of PCNA-positive granulosa cells 1.3-1.7 times compared to control (Р less than 0.05-0.001), and cholesterol had no effect on PCNA expression in these cells. At a concentration of 1-20 mg/mL, BSA reduced the proportion of Bax-positive cells in culture 1.5-2.3 times (Р less than 0.001), and cholesterol at a concentration of 5-100 mcg/ml reduced the level of these cells 1.3-1.5 times (Р less than 0.05-0.001) compared to control. In addition, BSA (10-20 mg/mL) decreased the concentration of estradiol-17beta in the culture medium 2.3-2.4 times (Р less than 0.05-0.001), while cholesterol (2-10 mcg/mL) increased this concentration 1.4 times (Р less than 0.05) compared to control. The results obtained indicate the possible participation of BSA and cholesterol in the regulation of folliculogenesis in cows by modulating the functional activity of granulosa cells.

Russian. У крупного рогатого скота в период ранней лактации могут происходить нарушения в работе печени, которые приводят к изменению содержания в крови и фолликулярной жидкости различных метаболитов, в том числе альбумина и холестерина, а также к торможению роста и развития овариальных фолликулов. Цель исследования - изучение пролиферативной и стероидогенной активности клеток гранулёзы коров и апоптотические изменения их in vitro при воздействии бычьего сывороточного альбумина (БСА) и холестерина в различных концентрациях. Клетки, выделенные из фолликулов диаметром 1-8 мм, культивировали в течение 48 ч в среде без сыворотки, содержащей БСА (0,5-20,0 мг/мл) или холестерин (1-100 мкг/мл). После культивирования определяли концентрацию эстрадиола-17бета и прогестерона в среде и оценивали пролиферативную активность и апоптотические изменения в клетках. Повышение содержания БСА в среде до 1-20 мг/мл приводило к росту доли PCNA-позитивных клеток гранулёзы в 1,3-1,7 раза относительно, по сравнению с контролем (Р меньше 0,05-0,001), а холестерин не влиял на экспрессию PCNAв этих клетках. При концентрации 1-20 мг/мл БСА уменьшал в 1,5-2,3 раза (Р меньше 0,001) долю Bax-позитивных клеток в культуре, а холестерин при концентрации 5-100 мкг/мл снижал уровень этих клеток в 1,3-1,5 раза (Р меньше 0,05-0,001) по сравнению с контролем. Кроме того, БСА (10-20 мг/мл) уменьшал в 2,3-2,4 раза (Р меньше 0,05-0,001) концентрацию эстрадиола-17бета в среде культивирования, тогда как холестерин (2-10 мкг/мл) повышал эту концентрацию в 1,4 раза (p меньше 0,05) по сравнению с контролем. Полученные результаты свидетельствуют о возможном участии БСА и холестерина в регуляции фолликулогенеза у коров путём модуляции функциональной активности клеток гранулёзы.