Sperm quality indicators of breeding goats before and after cryopreservation | Качественные показатели спермы козлов-производителей до и после криоконсервации

English. Artificial insemination is widely used in dairy and beef cattle breeding, but this assisted reproductive technology is not widespread enough in goat breeding. One of the constraining factors is the negative effect of low temperatures on the morphofunctional characteristics of sperm from breeding goats. The research purpose is to test a protocol of sperm cryopreservation of stud goats with modification of pre-preparation and subsequent assessment of the quality indicators of sperm before and after its deep freezing. A comprehensive assessment of sperm quality indices - volume, concentration, morphology, motility - in male goats (n=10) was carried out using the conventional methods and protocols. The assessment of sperm quality indicators included 5 time points: after sperm collection, two hours after cooling, after thawing: 0 h, 1 and 2 h. In view of the findings, the spermatozoids of breeding goats have low cryoresistance. After cryopreservation (0, 1 and 2 h after thawing), there is an increase in the number of spermatozoids with tail damage of 7.5% (p not more than 0.05), 15.5% and 21.8% (p not more than 0.01), and also a decrease in the number of progressively moving spermatozoids 1.4; 1.6 and 2.5 times (p not more than 0.01) compared with the results of the assessment of 0 h after collection. The use of a deep two-phase sperm freezing protocol allows maintaining the viability of sperm with a progression of movements equal to 54.2±5.1% and a number of morphologically normal spermatozoids equal to 64.1±1.9%. The pre-preparation of sperm for the cryopreservation process (current protocol) comprises centrifuging sperm (mode: 7000 rpm for 15 min), removing seminal plasma, diluting 1:4 (OptiXcell diluent), cooling (4 h at 4 deg. C). The developed protocol of sperm cryopreservation provides for immersing goblets with straws of 4 cm above liquid nitrogen for 7 min; then completely immersing in liquid nitrogen.

Russian. Искусственное осеменение масштабно используется в молочном и мясном скотоводстве, однако эта вспомогательная репродуктивная технология недостаточно распространена в козоводстве. Одним из сдерживающих факторов является негативное влияние низких температур на морфофункциональные характеристики сперматозоидов козлов-производителей. Цель исследований - апробация протокола криоконсервации спермы козлов-производителей с модификацией предподготовки и последующей оценкой качественных показателей спермы до и после ее глубокой заморозки. Была проведена комплексная оценка качества спермы (объем, концентрация, морфология, подвижность) козлов (n=10) по общепринятым методикам и протоколам. Оценка качественных показателей спермы включала в себя пять этапов: после взятия спермы, два часа после охлаждения, после оттаивания: 0 ч, 1 и 2 ч. Исходя из полученных результатов, сперматозоиды козлов-производителей имеют низкую криорезистентность. После криоконсервации (0, 1 и 2 ч после оттаивания) происходит увеличение количества сперматозоидов с повреждением хвоста на 7,5% (p не более 0,05), 15,5% и 21,8% (p не более 0,01), а также снижение количества прогрессивно двигающихся сперматозоидов в 1,4; 1,6 и 2,5 раз (p не более 0,01) по сравнению с результатами оценки 0 ч после взятия. Использование протокола глубокой двухфазовой заморозки спермы позволяет сохранить жизнеспособность сперматозоидов с прогрессивностью движений, равной 54,2±5,1%, и количеством морфологически нормальных сперматозоидов, равным 64,1±1,9%. Предподготовка спермы к процессу криоконсервации (текущий протокол) включает в себя центрифугирование (режим:7000 об/мин в течение 15 мин), удаление семенной плазмы, разбавление 1:4 (разбавитель OptiXcell), охлаждение (4 ч при температуре 4 град. С). Разработанный протокол криоконсервации спермы предусматривает погружение гоблетов с пайетами 4 см над жидким азотом на 7 мин; затем полное погружение в жидкий азот.