Utilização de ensaio imunoenzimático para detecção do vírus da diarreia bovina e da Brucella abortus em vacas de corte da raça Nelore.

Ministério da Educação e Universidade Federal Rural da Amazônia

O diagnóstico de enfermidades infectocontagiosas representa um valioso mecanismo que vem se tornando cada vez mais utilizado com a finalidade da descoberta, confirmação e levantamento das enfermidades nos rebanhos. Assim, objetivou-se com esse estudo, avaliar o desempenho de kits comerciais de ELISA indireto (ELISA-I) na detecção de anticorpos contra o vírus da diarréia viral bovina (BVDV) e contra a Brucella abortus, frente ao teste de virusneutralização (VN) para a diarréia viral bovina (BVD) e teste de fixação do complemento (FC) e antígeno acidificado tamponado (AAT) para a brucelose bovina, além de determinar a prevalência de animais soropositivos para os respectivos agentes etiológicos nos rebanhos estudados nos municípios das Mesorregiões Metropolitana de Belém e do Nordeste Paraense, e avaliar a eficácia dos métodos, mediante comparação entre os resultados obtidos. Para tanto, foram processadas 400 amostras de soro de fêmeas bovinas da raça Nelore com idade >24 meses, não vacinadas contra BVD e vacinadas contra a brucelose, provenientes de cinco propriedades, sendo duas da Mesorregião Metropolitana de Belém e três da Mesorregião do Nordeste Paraense. Os testes de ELISA-I e AAT foram realizados na Universidade Federal Rural da Amazônia de acordo com o preconizado pelo fabricante; a VN no Instituto Biológico de São Paulo e a FC na Universidade Estadual "Júlio de Mesquita Filho"- Campus Jaboticabal. Os resultados verificados foram classificados como diagnóstico positivo correto (a), diagnóstico positivo incorreto (b), diagnóstico negativo correto (c), diagnóstico negativo incorreto (d). A partir desses valores foram calculados, de cada método, a sensibilidade e especificidade. Para a BVD, as amostras que se apresentaram suspeitas frente ao ELISA-I não foram contabilizadas nos cálculos supramencionados. O teste Qui quadrado foi utilizado para comparar as sensibilidades e especificidades do ELISA-I e do AAT para a brucelose. Os resultados de prevalência para a BVD obtidos pela VN e ELISA-I foram iguais a 39,25% e 54,50%, respectivamente, e o ELISA-I apresentou 98,72% de sensibilidade e 74,07% de especificidade. Para a brucelose bovina, a prevalência obtida pelas técnicas de FC, AAT e ELISA-I foram iguais, respectivamente, a 5,0%, 4,5% e 23,75% (p<0,0001). Os valores de sensibilidade encontrados para o AAT e ELISA-I corresponderam a 45% e 75% e a especificidade 97,63% e 78,95%, respectivamente. Houve diferenças significativas entre a especificidade do AAT e ELISA-I (p<0,0001). Baseado nos resultados, concluiu-se que tanto a BVD quanto a brucelose bovina encontram-se presentes em animais criados nas Mesorregiões Metropolitana de Belém e do Nordeste Paraense. Ainda, o ELISA-I constitui-se uma alternativa a ser usada em testes de triagem para a detecção de anticorpos anti-BVDV e anti-B.abortus (nesta última, associada com outras provas sorológicas, como o AAT).

Diagnosis of infectious diseases is a valuable mechanism that is becoming increasingly used for the purpose of discovery , confirmation and lifting of the disease in herds . Thus, the aim of this study was to evaluate the performance of commercial indirect ELISA kits (ELISA-I) for the detection of antibodies against bovine viral diarrhea virus (BVDV) and against Brucella abortus, opposite the virus neutralization test (VN) for bovine viral diarrhea (BVD) and complement fixation (FC) and buffered acidified antigen (AAT) for bovine brucellosis, and to determine the prevalence of seropositive animais to their etiological agents in herds in the cities of Mesoregions Metropolitan of Belém and Northeast of Pará, and evaluate the effectiveness of the methods by comparing the results obtained. For this, we processed 400 serum samples from Nelore cows aged >24 months not vaccinated against BVD and vaccinated against brucellosis, from five properties, two of them from Mesoregion Metropolitan of Belém and tree from Mesoregion Northeast of Pará. The ELISA-I and AAT tests were performed at Federal Rural University of Amazônia in accordance with the recommendations by the manufacturer; the VN in the Biological Institute of São Paulo and the FC at State University "Júlio de Mesquita Filho" - Campus Jaboticabal. The outcomes were classified as correct positive diagnosis (a), incorrect positive diagnosis (b), correct negative diagnosis (c), incorrect negative diagnosis (d). From these values were calculated for each method, the sensitivity and specificity. The Chi square test was used to compare the sensitivities and specificities of ELISA-I and AAT for brucellosis. The results for the prevalence of BVD obtained by VN and ELISA-I were equal to 39.25% and 54.50%, respectively and ELISA-I showed 98.72% sensitivity and 74.07% specificity. For bovine brucellosis, the prevalence obtained by FC, AAT and ELISA-I were respectively 5.00%, 4.50% and 23.75% (p < 0.0001). The sensitivity found for the AAT and ELISA-I were 45,00% and 75,00% and specificity of 97.63% and 78.95%, respectively. There were significant differences between the specificity of AAT and ELISA-I (p <0.0001 ). Based on the results, it was concluded that both BVD as bovine brucellosis are present in animais raised in the Metropolitan Mesoregions Metropolitan of Belém and Northeast of Pará. . Further, the ELISA-I constitutes a surrogate to be used in screening tests for the detection of anti-BVBD and anti-B.abortus antibodies (the latter one associated with other serological tests, such as the AAT).