Micobiota cutânea de coelho (Oryctolagus cuniculus) e cobaio (Cavia porcellus) de companhia

Dissertação de Mestrado Integrado em Medicina Veterinária

O coelho e o cobaio são cada vez mais frequentes como animais de companhia. Entre as infeções zoonóticas que podem existir nestas espécies destaca-se a dermatofitose, e o coelho e cobaio já foram referenciados como possíveis portadores assintomáticos de dermatófitos. Os objetivos deste estudo incluíram a caracterização da micobiota cutânea destas espécies; determinação da frequência de fungos dermatófitos em coelhos e cobaios com e sem lesões cutâneas, nas áreas de Barcelona e Lisboa; avaliação da relação entre os resultados das culturas micológicas e diversas variáveis relacionadas com a caracterização e maneio dos animais; comparação entre dois meios de cultura utilizados para diagnóstico micológico, o meio Sabouraud Chloramphenicol Agar (SCA) e o meio Dermatophyte Test Medium (DTM); por último, comparação entre dois métodos de colheita de amostra para análise micológica – arrancamento de pelos e escovagem do animal (método de Mackenzie). Foram recolhidas 118 amostras de pelo e pele de coelhos e cobaios através de arrancamento de pelos e recolha de escamas em lesões (quando existentes) ou ao longo do corpo do animal e 51 amostras através de escovagem. As amostras foram semeadas nos meios referidos, incubadas e observadas diariamente. Por fim, as espécies fúngicas foram identificadas por observação da morfologia macro e microscópica das colónias. Foi realizado um questionário aos tutores em Lisboa para recolher informação relativa ao maneio dos animais. Não foram identificados fungos dermatófitos a partir das amostras; no entanto, foram isolados maioritariamente fungos saprófitas, semelhantes aos encontrados na pele e pelo de outros animais, nomeadamente Aspergillus, Penicillium e Scopulariopsis, muito frequentes no ambiente, tendo sido já reportados como responsáveis por infeções micóticas em humanos e animais. A análise estatística permitiu evidenciar que as variáveis “espécie”, “idade” e “medicação” são significativas em relação à variação da variável “positividade na cultura micológica”, enquanto a “idade”, “acesso ao exterior” e “medicação” são significativas em relação à variação da variável “número de espécies fúngicas isoladas” a partir das amostras. Concluiu-se que existe maior probabilidade de obtenção de uma cultura positiva e de um maior número de espécies fúngicas por amostra se estas forem semeadas em meio SCA do que em DTM; no entanto, apesar de o DTM ser um meio desenvolvido com o objetivo de permitir um diagnóstico fácil de dermatófitos pela ocorrência de alteração da cor do meio, neste estudo houve outras espécies fúngicas que também promoveram esta alteração. Por fim, concluiu-se que com a aplicação do método de Mackenzie há maior probabilidade de se isolar mais espécies fúngicas do que através do método de arrancamento, mas não foi possível concluir se havia animais portadores de dermatófitos apenas diagnosticados após sementeira das amostras obtidas pelo método de Mackenzie pois não se obtiveram resultados positivos. Assim, propõe-se a realização de um estudo comparativo entre estes métodos de colheita baseado num maior número de amostras, incluindo resultados positivos a dermatófitos.

ABSTRACT - Nowadays, rabbits and guinea pigs are frequently adopted as companion animals. Among the zoonotic infections that can affect these species dermatophytosis is the most frequent, and rabbits and guinea pigs have already been referred as possible asymptomatic carriers of dermatophytes. The goals of this study included the characterization of the cutaneous mycobiota of these species; determination of the frequency of dermatophytes in rabbits and guinea pigs from Barcelona and Lisbon, including animals with and without cutaneous lesions; evaluation of the relationship between the results from mycological cultures and several variables related to the characterization and management of these animals; comparison between two culture media used for mycological diagnosis, Sabouraud Chloramphenicol Agar (SCA) and Dermatophyte Test Medium (DTM); finally, comparison between two methods for sample collection for mycological analysis – hair pulling and animal brushing (Mackenzie’s technique). Samples included 118 hair and skin samples, collected from rabbits and guinea pigs by pulling hairs surounding lesions and collecting scales (if present) or along the body of the animal and also 51 hair samples collected using the Mackenzie’s technique. Samples were inoculated in the referred culture media, incubated and observed daily. Finally, fungal species were identified by observing the macro and microscopic morphology of the colonies. A questionnaire was provided to the tutors of animals in Lisbon, to collect information on animal husbandry. No dermatophyte fungi were identified from any of the samples under study; however, saprophytic fungi, similar to those found on the skin and hair of other animals, such as Aspergillus, Penicillium and Scopulariopsis, were mainly isolated; these fungi have already been reported as responsible for mycotic infections in humans and animals. The statistical analysis showed that the variables "species", "age" and "medication" are significant in the explanation of the variation of the "positivity in the mycological culture", while "age", "outdoor access" and "medication" are significant in the explanation of the variation of the "number of isolated fungal species" from the samples. It was also concluded that there was a higher probability of obtaining a positive culture and a larger number of fungal species per sample if they were inoculated in SCA medium than in DTM; however, although DTM is a medium developed with the goal of allowing an early diagnosis of dermatophytes by observing the changes in the color of the medium, in this study there were other fungal species that also promoted this change. Finally, it was possible to conclude that Mackenzie’s technique allows the isolation of a higher number of fungal species than the pulling method; however, it was not possible to conclude if this technique is associated with a more frequent dermatophytosis diagnostic since no positive results were obtained. Thus, a comparative study between these collection methods based on a larger number of samples is proposed, in order to include positive results for dermatophytes.

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