Reposicionamiento de fármacos en la enfermedad de Alzheimer

Introducción. La enfermedad de Alzheimer (EA) es la forma más común de demencia y su La prevalencia y la incidencia han aumentado considerablemente en los últimos años en todo el mundo. el principal Los agentes causales a nivel molecular son las formas patógenas del péptido β-amiloide y Proteína Tau hiperfosforilada. Aunque se han logrado avances significativos en la caracterización de esta enfermedad, existe la necesidad clínica de establecer nuevas terapias debido a el gran aumento del número de pacientes en todo el mundo. En este trabajo se propone el reposicionamiento de fármacos como una posible estrategia para predecir fármacos potenciales. capaz de revertir las huellas ómicas características de la EA. El estudio utiliza el NeuroPro base de datos, que recopila cambios de proteínas en el tejido cerebral humano con EA y significativamente Proteínas alteradas. Métodos. Análisis bioinformático de la base de datos NeuroPro utilizando Connectivity Map para el Predicción de fármacos con potencial para revertir las huellas ómicas características de la EA. célula MTT Los ensayos de viabilidad se realizaron en células SH-SY5Y; Controlar con DMSO y tratar con el medicamentos AT-9283, SB-216763 y P11 en diferentes concentraciones por triplicado (n = 3) para establecer las concentraciones óptimas de cada fármaco. Validación de los posibles efectos terapéuticos del fármacos propuestos mediante ensayo MTT con células SH-SY5Y para estudiar el efecto de cada fármaco sobre la estímulos dañinos H2O2 (20 μM), Aβ25-35 oligomerizado a 37°C (1μM) y Tau en fibrillas (1 μg/ μL) alquitranes 24 horas de tratamiento (Control = DMSO y estímulo dañino, Tratamiento = drogas y estímulos dañinos). Cada condición se estableció por triplicado. Resultados. Utilizando el enfoque de reutilización de medicamentos basado en Connectivity Map, AT-9283, SB-216763 y P11 fueron seleccionados como fármacos capaces de revertir las huellas ómicas asociadas a la EA. Después de los experimentos de validación, el inhibidor P11 para su objetivo PAFAH1b3 mostró una efecto antioxidante y además, protegido del daño inducido por Aβ25-35 oligomerizado en 37°C (1μM) en un rango de concentraciones de 900 nM a 2000 nM. La droga AT-9283 protegido del daño oxidativo resultante del tratamiento con H2O2 (20 μM) a 5 nM y 20 nM. SB-216763 en ciertas concentraciones (180, 250 y 300 nM) reduce el daño causado por Proteína tau en fibrillas. Conclusiones. La reutilización de fármacos es una alternativa eficaz para el desarrollo de la EA terapias El inhibidor AT-9283 tiene actividad antioxidante en las células de neuroblastoma SH-SY5Y cultura. El inhibidor SB-216763 ha demostrado capacidad neuroprotectora frente a la proteína Tau en fibrillas. El inhibidor P11 en su objetivo PAFAH1b3, protege contra los derivados del peróxido de hidrógeno. daño oxidativo y muestra capacidad anti-Aβ25-35 que mejora el cultivo de células SH-SY5Y proliferación.

Background. Alzheimer's disease (AD) is the most common form of dementia, and its prevalence and incidence have increased considerably in recent years worldwide. The main causative agents at molecular level are the pathogenic forms of β-amyloid peptide and hyperphosphorylated Tau protein. Although significant advances have been made in the characterization of this disease, there is a clinical need to establish new therapies because of the large increase in the number of patients worldwide. In this work, drug repositioning is proposed as a potential strategy to predict potential drugs capable of reversing the characteristic omic footprints of AD. The study uses the NeuroPro database, which compiles protein changes in human brain tissue with AD and significantly altered proteins. Methods. Bioinformatic analysis of the NeuroPro database using Connectivity Map for the prediction of drugs with potential to reverse characteristic omic footprints of AD. MTT cell viability assays were performed on SH-SY5Y cells; Control with DMSO and treated with the drugs AT-9283, SB-216763 and P11 at different concentrations in triplicate (n=3) to establish the optimal concentrations of each drug. Validation of the potential therapeutic effects of the proposed drugs by MTT assay with SH-SY5Y cells to study the effect of each drug on the damaging stimuli H2O2 (20 μM), Aβ25-35 oligomerized at 37°C (1μM) and Tau in fibrils (1 μg/ μL) tars 24 hours of treatment (Control = DMSO and damaging stimulus, Treatment = drug and damaging stimulus). Each condition was established in triplicate . Results. Using the Connectivity Map-based drug repurposing approach, AT-9283, SB-216763 and P11 were selected as drugs able to reverse AD-associated omics footprints. After validation experiments, the inhibitor P11 for its target PAFAH1b3, showed an antioxidant effect and in addition, protected from damage induced by Aβ25-35 oligomerized at 37°C (1μM) in a range of concentrations from 900 nM to 2000 nM. The drug AT-9283 protected from oxidative damage resulting from H2O2 (20 μM) treatment at 5 nM and 20 nM. SB-216763 at certain concentrations (180, 250 and 300 nM) reduces the damage caused by Tau protein in fibrils. Conclusions. Drug repurposing is an effective alternative for the development of AD therapies The inhibitor AT-9283 has antioxidant activity in SH-SY5Y neuroblastoma cell culture. The inhibitor SB-216763 has shown neuroprotective capacity against Tau protein in fibrils. The P11 inhibitor on its target PAFAH1b3, protects against hydrogen peroxide-derived oxidative damage and shows anti-Aβ25-35 capacity enhancing SH-SY5Y cell culture proliferation.

Graduado o Graduada en Biotecnología por la Universidad Pública de Navarra

Bioteknologiako Graduatua Nafarroako Unibertsitate Publikoan