ELISA reagents for potato virus Y strains with significantly low non-specific reactions | Luotettavasti toimivia vasta-ainereagensseja perunan Y-viruksen määrittämiseen ELlSA-menetelmän avulla

English. High titered and highly virus-specific antisera to selected PVYo and PVYn antigens and their mixture were produced in rabbits. Immunoglobulins purified from the antisera with the protein A method and their enzyme conjugates had very strong virus-specific but no non-specific reactions in the ELISA test. Their homologous reactions to the antigens were stronger than heterologous but any PVY isolate could be identified in a potato leaf sample with the dilutions between 10-2 and 10-3 and in a sample from sprouted tubers with secondary infection diluted between 10-1 and 10-2.

Finnish. Helsingin yliopiston kasvipatologian laitoksen ja Labsystems Oy:n yhteistutkimuksena valmistettiin perunan Y-viruksen vasta-aineita ELISA-menetelmän (enzymelinked immunosorbent assay) avulla tehtäviä rutiinimäärityksiä varten. Vasta-aineiden avulla voitiin osoittaa luotettavasti erittäin alhaisia viruskonsentraatioita erilaisista kasvinäytteistä, koska ne eivät reagoineet vastaaviin terveisiin näytteisiin. Vasta-aineet valmistettiin maassamme eristetyille perusteellisesti tutkituille Y-viruksen rotujen Y° ja Yn isolaateille, joiden oli todettu reagoivan keskimääräistä voimakkaammin vieraan rodun vasta-aineisiin. Myös virusrotuseokselle valmistettiin vasta-aine. Adjuvanttiin sekoitettu virusantigeeni injektoitiin kanien selkänähän alle. Menettely todettiin helpoksi ja koe-eläinten terveydentilan kannalta erittäin hyväksi. Vasta-aineseerumien tiitterit kohosivat korkeiksi (1/4096—1/8192) pienistä 200 µg:n injektointiannoksista huolimatta. ELISA-menetelmän määritysreagenssien valmistamiseen käytettiin ϒ-globuliinifraktion sijasta kokonaisimmunoglobuliinifraktiota, joka erotettiin raakaseerumista proteiini-A-menetelmää käyttäen. Reagensseilla voitiin täysin luotettavasti määrittää perunan Y-virus 10-2 tai 10-3 laimennetusta perunan lehtimehusta ja 10-1 tai 10-2 laimennetusta hieman idätetyn mukulan mehusta. Perunalajike ei vaikuttanut määritystulosten luotettavuuteen. Tutkimuksessa valmistetut testireagenssit toimivat luotettavammin kuin maassamme aikaisemmin valmistetut tai ulkomaiset myytävänä olevat vastaavat reagenssit. Valmistetut uudet määritysvasta-aineet sopivat erityisesti Suomen oloihin.