Optimization of the explant disinfection method and in vitro multiplication of saffron (Crocus sativus L.). | Optimisation de la méthode de désinfection des explants et multiplication in vitro du safran (Crocus sativus L.).

English. Saffron (Crocus sativus L.), renowned as the world’s most expensive spice extracted from its stigmas, is an autumn-flowering, sterile triploid geophyte species (2n=3x=24) belonging to the Iridaceae family. It is propagated vegetatively through the development of daughter corms from the mother corm. Low multiplication rates of daughter corms under natural conditions and many biotic and abiotic stresses reduce productivity, thereby restraining the availability of planting material. Thus, the main objective of this work is to improve the vegetative propagation of saffron through tissue culture. The results show that soaking of explants in 0.1% (w/v) mercury chloride (HgCl2) for 10 min is more effective for explant disinfection (95%), with a survival rate of over 85%. Whereas, for the initiation phase, the in vitro culture of whole corms on Murashige and Skoog (MS) medium supplemented with 0.5 mg /L of 1-naphthalene acetic acid (NAA) in combination with 3 mg/L of 6-benzylaminopurine (BAP) was more effective, resulting in a sprouting rate of 90% with a maximum of 5 sprouted buds per explant. As for the multiplication phase, the highest number of shoots (4 shoots/single shoot explant) was observed on MS medium supplemented with 8 mg/L of BAP in combination with 0.5 mg/L of NAA. The results of this study can serve as a starting point for establishing an efficient and reproducible in vitro regeneration system in order to increase the number of shoots per explant for proliferation and micro-corms formation phases by exploring other culture media with different PGR combinations.

French. Le safran (Crocus sativus L.), reconnu comme l'épice la plus chère au monde obtenu à partir des stigmates, est une espèce géophyte triploïde stérile (2n=3x=24) à floraison automnale et qui appartient à la famille des Iridacées. Il se propage végétativement grâce à la formation de cormes filles à partir du corme mère. Le faible taux de multiplication des cormes filles dans les conditions naturelles conjugué à l’effet de nombreux stress biotiques et abiotiques réduisent la productivité, limitant ainsi la disponibilité du matériel végétal de plantation. Ainsi, l'objectif principal de ce travail est d'améliorer la propagation végétative du safran par la culture des tissues in vitro. Les résultats montrent que le trempage des explants dans 0,1 % (p/v) de chlorure de mercure (HgCl2) pendant 10 min est plus efficace pour la désinfection des explants (95 %) avec un taux de survie de plus de 85 %. Alors que pour la phase d'initiation, la culture des cormes entiers sur milieu de Murashige et Skoog (MS) additionné de 0,5 mg/L d’acide 1-naphtalène acétique (ANA) en combinaison avec 3,0 mg/L de 6-benzylaminopurine (BAP) a été plus efficace puisqu'elle permet d’obtenir un taux de germination de 90% accompagné d’un maximum nombre de bourgeons germés (5 bourgeons/explant). Comme pour la phase de multiplication, le plus grand nombre de pousses (4 pousses/pousse initial) a été observé sur le milieu MS additionné de 8,0 mg/L de BAP en combinaison avec 0,5 mg/L d’ANA. Les résultats de cette étude peuvent servir de point de départ pour établir un système de régénération in vitro efficace et reproductible afin d'augmenter le nombre de pousses par explant pour les phases de prolifération et la formation de micro-cormes en explorant d'autres milieux de culture avec différentes combinaisons de PGR.