Species-specific features of culturing and vitrification of bovine and rabbit embryos | Видоспецифические особенности культивирования и витрификации эмбрионов крупного рогатого скота и кроликов

English. Vitrification and embryo culturing are essential to apply reproductive biotechnologies in animal breeding. To find species-specific characteristics of embryo culturing and vitrification, cattle and rabbits embryos were studied. Rabbit embryos were cultured in a CO₂ incubator at 38.5 °C, 7% CO₂ using TCM 199 and DMEM F12 media, and bovine IVP embryos in mSOF medium with freshly prepared base and on the basis of mother liquor free of sodium bicarbonate stored for 1 year at 4 °C. Studies were carried out on vitrification of pellucid zone-free IVP-embryos of cattle in triacetate-cellulose hollow fibre and on vitrification of rabbit embryos. Two protocols differing in exposure modes and composition of base solutions: (1) TL-HEPES + 20% of blood serum (TH20) and 2) DPBS + 0.2% of BSA were used here. When rabbit embryos were cultured for 120 hours in DMEM F12 medium, 68% of the embryos continued to develop, while only 44.4% of the cultured embryos developed in TSM 199 medium during this period. When 93 cow embryos were cultured in mSOF medium with a base stored for 1 year, 25 embryos emerged from the shiny shell, 172 embryos were put into cultivation in mSOF medium with a freshly prepared base, and 60 of them came out of the pellucid zone. The survival rate of rabbit embryos after vitrification and warming procedures was, for protocol No.1, morulae in vitro, 53%, and morulae in vivo, 47.8%; for protocol No.2, morulae in vitro, 84.6%, and morulae in vivo, 68.0%. Reducing the sucrose concentration in the warming solution to 0.5M and in the dilution solution to 0.25M resulted in a 93.8% improvement in the survival rate of bovine embryos. Thus, studying the species-specific features when using reproductive biotechnologies improves their use efficiency in animal husbandry.

Russian. Культивирование и витрификация эмбрионов играют ключевую роль при применении репродуктивных биотехнологий в животноводстве. Для выявления видоспецифичных особенностей культивирования и витрификации эмбрионов проведены исследования на эмбрионах крупного рогатого скота и кроликов. Культивирование эмбрионов кроликов проводили в CO₂ инкубаторе при температуре 38,5 °С, 7% CO₂ с использованием сред ТСМ 199 и DMEM F12, и IVP-эмбрионов крупного рогатого скота в среде mSOF со свежеприготовленной основой и на основе маточного раствора без бикарбоната натрия, хранившегося в течение 1 года при 4°С. Выполнены исследования по витрификации IVP-эмбрионов крупного рогатого скота без блестящей оболочки в триацетатцеллюлозном полом волокне, а также по витрификации эмбрионов кроликов по двум протоколам, отличающимся режимами экспозиции и составом базовых растворов: 1) TLP-HEPES + 20% сыворотки крови (TH20) и 2) DPBS + 0,2% БСА. При культивировании эмбрионов кроликов в течение 120 часов в среде DMEM F12 развитие продолжали 68% эмбрионов, а в среде ТСМ 199 за этот период развились лишь 44,4% поставленных на культивирование эмбрионов. При культивировании 93 эмбрионов коров в среде mSOF с основой, хранившейся в течение 1 года, из блестящей оболочки вышло 25 эмбрионов, в среде mSOF со свежеприготовленной основой на культивирование было поставлено 172 эмбриона, 60 из них вышли из блестящей оболочки. Определена выживаемость эмбрионов кроликов после процедуры витрификации и отогревания: для протокола № 1 – морулы in vitro – 53%, морулы in vivo – 47,8%; для протокола № 2 – морулы in vitro – 84,6%, морулы in vivo – 68,0%. К повышению уровня выживания эмбрионов крупного рогатого скота до 93,8% приводило снижение концентрации сахарозы в растворе отогревания до 0,5М, в растворе разбавления – до 0,25М. Таким образом, изучение видоспецифичных особенностей при использовании репродуктивных биотехнологий повышает эффективность их применения в животноводстве.