Study of the Use of Chemicals to Reduce Microbial Contamination and Its Effect on the Growth of Sugarcane Tissue in an Open System | การศึกษาการใช้สารเคมีเพื่อยับยังจุลินทรีย์ปนเปื้อนและผลต่อการเจริญเติบโต ของเนื้อเยื่ออ้อยในระบบเปิด

English. This study aims to determine the type and concentration of disinfectants that inhibit microbial growth in laboratory conditions while being suitable for sugarcane tissue culture. In the initial step, microorganisms contaminating the Murashige and Skoog (MS) in an open laboratory system (November 2020) were screened. Eight fungal isolates were found, including Aspergillus sp., Trichoderma sp., Fusarium sp., Gliocladium sp., Curvularia sp. and a yeast, as well as two unknown species lacking identifiable fruiting structures. Five bacterial isolates were also identified, consisting of one gram-positive and four gram-negative bacteria. Subsequently, the type and concentration of disinfectants were tested to control each screened microbial contaminant in the MS medium. It was found that sodium hypochlorite at concentrations of 0.17, 0.25, and 0.33 ml/L effectively controlled microbial contamination. In the sugarcane tissue culture experiment using non-autoclaved MS medium supplemented with 1 mg/L kinetin, 150 mg/L citric acid, and sodium hypochlorite at concentrations of 0.20, 0.25, and 0.33 ml/L, good growth and development of sugarcane tissue were observed, with no significant differences compared to traditional tissue culture methods.

Thai. การศึกษานี้มีวัตถุประสงค์เพื่อหาชนิดและความเข้มข้นของสารฆ่าเชื้อต่อการยับยังเชื้อจุลินทรีย์ ในสภาพห้องปฏิบัติการ และเหมาะสมต่อการเจริญเติบโตของเนื้อเยื่ออ้อย โดยในขั้นตอนแรกทำการคัดกรองหาเชื้อจุลินทรีย์ที่พบปนเปื้อนในอาหารเพาะเลี้ยงเนื้อเยื่อสูตร MS ในสภาพห้องปฏิบัติการระบบเปิด (เดือนพฤศจิกายน 2563) พบเชื้อรา 8 ไอโซเลท ได้แก่ Aspergillus sp., Trichoderma sp., Fusarium sp., Gliocladium sp., Curvularia sp., ยีสต์และอีก 2  ไอโซเลทไม่ทราบชื่อ เนื่องจากไม่สร้างหน่วยขยายพันธุ์ และเชื้อแบคทีเรีย 5 ไอโซเลท ได้แก่ แบคทีเรียแกรมบวก 1 ไอโซเลท แบคทีเรียแกรมลบ 4 ไอโซเลท จากนั้นทดลองหาชนิดของสารฆ่าเชื้อที่ระดับความเข้มข้นต่าง ๆ เพื่อควบคุมจุลินทรีย์แต่ละชนิดที่คัดกรองได้จากการปนเปื้อน ในอาหารเพาะเลี้ยงเนื้อเยื่อสูตร MS พบว่า Sodium hypochlorite ความเข้มข้น 0.17, 0.25 และ 0.33 มิลลิลิตร/ลิตร สามารถควบคุมการปนเปื้อนเชื้อจุลินทรีย์ได้ดี ในการทดลองเพาะเลี้ยงเนื้อเยื่ออ้อยในอาหารสูตร MS ที่ไม่ได้นึ่งฆ่าเชื้อ เติมไคเนติน 1 มิลลิกรัม/ลิตร  กรดซิตริก 150 มิลลิกรัม/ลิตร ร่วมกับสารเคมี Sodium hypochlorite ความเข้มข้น 0.20, 0.25 และ 0.33 มิลลิลิตร/ลิตร พบการเจริญเติบโตและการพัฒนาของเนื้อเยื่ออ้อยที่ดี และไม่แตกต่างจากการเพาะเลี้ยงเนื้อเยื่อแบบดั้งเดิม