The spectrum of lactate dehydrogenase isozymes in ovarian tissue of cows under different physiological states and pathologies | Спектр ізозимів лактатдегідрогенази в тканині яєчників корів за різних фізіологічних станів та патологій

English. The article presents the results of studies on the lactate dehydrogenase (LDH) activity and content of its isozymes in ovarian tissue under various physiological and pathological states of cow gonads. Cow ovaries of the Ukrainian dairy black-spotted breed (age 5–8 years, live weight 450–500 kg) of different physiological states were used for research: with “early yellow body”, diameter 10–20 mm, red or brown color (EYB; n = 41); with “late yellow body”, diameter 5–15 mm, color yellow (LYB; n = 32); “follicular growth”, without corpus luteum (FG; n = 84) and with hypofunction (n = 21). The activity and content of lactate dehydrogenase (LDH) isozymes were determined in the supernatant after centrifugation of gonadal tissue homogenates prepared according to standard methods. The content of LDH isozymes (%) was determined after vertical protein electrophoresis of tissue samples in plates of 7.5 % polyacrylamide gel (PAAG) and specific staining according to J. Garbus in our modification and calculated with TotalLab TL120 software. LDH activity was determined by the rate of NADH oxidation and was calculated in µcatal/mg of protein. In all samples, 5 catalytically active enzyme bands were detected: LDH1 – LDH5. It was established that the activity and content of LDH isozymes depends on the physiological state of the gonad. Thus, in the ovarian tissue of cows, LDH activity was the same (2.8–3.0 µcatal/mg protein) under the physiological state of “follicular growth” and pathology – “hypofunction” and is lower by 0.6 and 1.0 µcatal/mg protein under conditions of “early” and “late” corpus luteum (2.0 and 2.2 µcatal/mg protein). The biggest content of LDH1 was (49.3 ± 1.64 %) in the tissue in the physiological state of “late yellow body”. The greatest amount of LDH3, LDH4 and LDH5 (16.4 ± 1.70, 11.2 ± 2.42 and 13.2 ± 3.06 %) – at state “early yellow body”. The content of LDH2 was high (27.5 ± 4.26 %) in the case of ovarian "hypofunction", and in the other physiological states, the value was lower and almost had no difference (19.8 and 22.1 %). The analysis of correlations shows the moderate dependence of LDH activity and the content of isozymes on the physiological state and hypofunction of the gonad (LDH total activity – η = 0.387, LDH 1 – η = 0.465; LDH3 – η = 0.551; LDH4 – η = 0.336; LDH5 – η = 0.347).

Ukrainian. У статті наведено результати досліджень активності та вмісту ізозимів лактатдегідрогенази (ЛДГ) в тканині яєчника за різних фізіологічних і патологічного станів статевої залози корів. Для досліджень використані яєчники корів української молочної чорно-рябої породи (вік 5–8 років, жива маса 450–500 кг) різного фізіологічного стану: з “раннім жовтим тілом”, діаметр 10-20 мм, колір червоний або брунатний (РЖТ; n = 41); з “пізнім жовтим тілом”, діаметр 5–15 мм, колір жовтий (ПЖТ; n = 32); “фолікулярного росту”, без жовтого тіла (ФР; n = 84) та за гіпофункції (n = 21). Активність та вміст ізозимів лактатдегідрогенази (ЛДГ) визначали в супернатанті після центрифугування гомогенатів тканини статевої залози, приготовлених за стандартною методикою. Вміст ізозимів ЛДГ (%) визначали після вертикального електрофорезу протеїнів зразків тканин у пластинах 7,5 % поліакриламідного гелю (ПААГ) та специфічного фарбування за J. Garbus в нашій модифікації і вираховували програмним забезпеченням TotalLab TL120. Активність ЛДГ визначали за швидкістю окиснення НАДН та розраховували в мккатал/ мг протеїну. В усіх зразках виявлено 5 каталітично активних смуг ензиму: ЛДГ1 – ЛДГ5. Встановлено, що активність та вміст ізозимів ЛДГ залежить від фізіологічного стану статевої залози. Так, в тканині яєчника корів активність ЛДГ однакова (2,8–3,0 мккатал/ мг протеїну) за фізіологічного стану “фолікулярного росту” і патології – “гіпофункції” і нижча на 0,6 та 1,0 мккатал/ мг протеїну за “раннього” і “пізнього” жовтого тіла (2,0 та 2,2 мккатал/ мг протеїну). Однак найбільше ЛДГ1 (49,3 ± 1,64 %) у тканині за фізіологічного стану статевої залози “пізнього жовтого тіла”, а ЛДГ3, ЛДГ4 і ЛДГ5 (16,4 ± 1,70, 11,2 ± 2,42 і 13,2 ± 3,06 %) – за "раннього жовтого тіла". Вміст ЛДГ2 високий (27,5 ± 4,26 %) за порушення функції яєчника – “гіпофункції”, а за фізіологічних станів органу величина значення нижча і майже не відрізняється (19,8 та 22,1 %). Аналіз кореляцій свідчить про середньої сили залежність активності ЛДГ та вмісту ізозимів ензиму від фізіологічного стану та гіпофункції статевої залози (ЛДГ – η = 0,387, ЛДГ 1 – η = 0,465; ЛДГ3 – η = 0,551; ЛДГ4 – η = 0,336; ЛДГ5 – η = 0,347).