Twelve adult Santa Inês crossbred rams with similar weight and age employed in a randomized design for 60 days period to evaluate three treatments: A. 100% of degradable protein requirement (control); B. 100% of degradable protein requirement + 3% urea + inorganic sulphur (99%S) and C. 100% of degradable protein requirement +3% urea + organic sulphur (21,5% S). Every week seminal collections were made through artificial vagina; blood collections were made to analyze plasma N-ureic levels and measured live weight and scrotal circumference. In semen samples were studied volume, microscopic waves, vigor, motility, concentration, total sperm per ejaculate, total feasible sperm per ejaculate, membrane sperm integrity, acrosomal integrity, percent of abnormal spermatozoa and N-ureic level in seminal plasma. Treatments experimental animals receiving presented blood and seminal plasma N-ureic levels higher than the ones of control treatment (p < 0,05). There was significant difference between organic and inorganic sources of sulphur in the following semen characteristics (p < 0,05): treatment C presented microscopic waves (4,57), motility (85,69%), vigor (4,66) and total sperm per ejaculate (9,02 x 10(9)) higher than treatment B; and the percentage of secondary sperm abnormality (5,37%) was lower than treatment B. | Doze carneiros machos adultos mestiços Santa Inês de mesma idade e porte semelhante foram empregados em um delineamento inteiramente casualizado, por um período experimental de 60 dias. Os animais foram distribuídos para três tratamentos: A. 100% das exigências em proteína degradável no rúmen (controle); B. 100% das exigências em proteína degradável no rúmen + 3% de uréia + enxofre (99% S) e C. 100% das exigências em proteína degradável no rúmen + 3% de uréia + enxofre quelatado (21,5% S). Semanalmente foram colhidas amostras de sêmen obtidas com emprego de vagina artificial e de sangue para determinação da concentração de nitrogênio uréico plasmático, assim como realizadas pesagens dos animais e aferições de circunferência escrotal. No sêmen foram analisados: volume e turbilhonamento; vigor, motilidade e concentração espermática; total de espermatozóides e total de espermatozóides viáveis no ejaculado; integridade de membrana e de acrossoma; morfologia espermática e concentração de nitrogênio uréico no plasma seminal. Os animais suplementados com uréia apresentaram níveis de N-uréico no plasma sanguíneo e seminal significativamente maiores que os encontrados nos do tratamentos controle (p<0,05). Houve diferença significativa entre as fontes de enxofre utilizadas (p<0,05) quanto às características do sêmen estudadas, o tratamento C apresentando valores maiores para turbilhonamento (4,57), motilidade espermática (85,69%), vigor espermático (4,66) e total de espermatozóides por ejaculado (9,02 x 10(9)), além de uma porcentagem inferior de defeitos menores (5,37%) quando comparado ao tratamento B.

Foram coletados oito sistemas reprodutores de fêmeas de gambás (Didelphis sp). Destes cinco, foram destinados ao estudo macroscópico e três ao estudo microscópico. Estes animais encontravam-se fixados no Departamento de Anatomia da UNIfeob, em formaldeído a 10%, provenientes do Criatório Científico de Araçatuba (IBAMA). Para análise macroscópica, os sistemas reprodutores foram retirados, guardando-se as devidas posições "in situ" e foi realizada a documentação fotográfica para resultados macroscópicos. Para o estudo microscópico, o sistema reprodutor foi processado rotineiramente pela técnica de inclusão em Paraplast e cortadas em micrótomo, com espessura média de 5 mm, e os cortes foram corados em HE, Azul de Toluidina, Picrosírius, PAS e tricromo de Masson16,17 . O sistema reprodutor feminino do gambá era composto por dois ovários, útero duplo, duas vaginas laterais e entre estas um canal pseudovaginal, estas três estruturas se unem formando o seio urogenital encerrando em um "monte" púbico ou tubérculo genital, formando uma abertura comum interna ao ânus e a vulva, chamada de pseudocloaca ou seio urogenital. Microscopicamente os ovários eram funcionais com folículos mono e poliovulares. A tuba uterina era característica, revestida por epitélio prismático ciliado. Os cornos uterinos apresentaram epitélio de revestimento prismático ciliado. O seio urogenital apresentou três estruturas tubulares. A vulva apresentou as mesmas características da pele. | Eight reproductive systems of opossum females of had been collected (Didelphis sp). Five, had been destined to macrocospic study and three to the microscopical study. These animals were died and fixeded in the Department of Anatomy of the UNIfeob, with formaldehyde 10% from Araçatuba scientific creator - IBAMA. For macrocospic analysis, the reproductive systems had been removed, keeping to its positions "in situ" and were carried through the photographic documentation for macrocospic results. For the microscopical study, the reproductive system was processed routinely by the technique of inclusion in similar of paraffin and cut with 5µm thickness, and the cuts had been stained in HE, Toluidin blue, Picrosirius, PAS (periodic acid Shiff reaction) and tricromo de Masson16, 17. The feminine reproductive system of the opossum was compose for two ovaries, double uterus, two lateral vagins and between these a pseudovaginal canal, these three structures if they join forming the urogenital sinus locking up in a "pubic mount" or genital tubercle, forming an internal common opening to the anus and vulva, call of pseudocloaca or urogenital sinus. Microscopically the ovarios were functional with mono and poliovulares follicles. The uterine tube was characteristic, coated for ciliad prismatic epithelium. The uterine horns had presented epithelium of ciliad prismatic covering. The urogenital sinus presented three tubular structures. Vulva presented the same characteristics of the skin.

Este estudo representa a primeira avaliação da maturação nuclear de oócitos por análise citogenética realizada em duas espécies de felídeos brasileiros ameaçados de extinção: L. pardalis (n=5) e L. tigrinus (n=4). Os animais foram submetidos à estimulação ovariana alternada com eCG-hCG e pFSH-pLH a cada quatro meses pelo período de dois anos, perfazendo um total de 6 intervenções. Os oócitos foram recuperados por vídeo-laparoscopia, caracterizados quanto à morfologia e utilizados para determinação dos estágios do ciclo meiótico por análise citogenética e maturação pela caracterização de metáfase II. Dos 33 oócitos de jaguatirica avaliados 12% (n=4) apresentaram cromossomos condensados em seu interior e dos 11 oócitos de gato-do-mato-pequeno avaliados 36% (n=4) apresentaram cromossomos condensados em seu interior, no entanto, nenhum oócito encontrava-se em metáfase II. Avaliação morfológica dos oócitos mostrou as mesmas características encontradas em outros mamíferos. Comparando os tratamentos, não houve diferença significativa (p>;0,05) no número total de estruturas ovarianas (folículos e corpos lúteos recentes) observadas em estimulações alternadas sucessivas, nas duas espécies estudadas. Também não houve diferença significativa em relação ao total de estruturas ovarianas encontradas em cada tratamento (5,7±1,2 eCG/hCG; 7,9±0,9 pFSH/pLH) para L. pardalis e (2,6±0,7 eCG/hCG; 2,0±0,5 pFSH/pLH) para L. tigrinus. Apesar das limitações deste experimento e do número reduzido de oócitos avaliados podemos sugerir que a aspiração folicular após estimulação ovariana com eCG/hCG e pFSH/pLH alternadamente resulta na recuperação de oócitos imaturos, que necessitam de cultivo em meios específicos para atingir o estágio de Metáfase II. | This study represents the first assessment of oocyte's nuclear maturation by cytogenetical analysis in two endangered Brazilian felids: L. pardalis (n=5) and L. tigrinus (n=4). Females were treated 6 times with alternating eCG/hCG and pFSH/pLH protocols using an interval of 4 months between each treatment. Ovarian follicular development and oocytes recovery were performed through laparoscopy. Recovered oocytes were submitted to the morphological and cytogenetical analysis in order to evaluate the meiotic cycle and maturation (metaphase II), respectively. In 33 ocelot's oocytes observed 12% (n=4) showed condensed chromosomes and in 11 tigrinu's oocytes observed 36% (n=4) showed condensed chromosomes. However no oocytes in metaphase II were observed. Oocytes morphological evaluation showed the same characteristics were observed in others mammals. Our results suggest that L. pardalis and L. tigrinus do not show a decrease (p>;0.05) in ovarian response after repeated and alternate exposure to different gonadotropin treatments. In both L. pardalis and L. tigrinus, no differences (p>;0.05) were found regarding to the number of total ovarian structures (total follicles and CL) during successive gonadotropin treatments. There were no differences (p>;0.05) regarding to the total number of ovarian structures in L. pardalis (5.7 ± 1.2 eCG/hCG and 7.9 ± 0.9 pFSH/ pLH) or L. tigrinus (2.6 ± 0.7 eCG/hCG and 2.0 ± 0.5 pFSH/pLH). With these results we can suggest that follicular aspiration after ovarian stimulation with exogenous gonadotrophins results in immature oocytes, needing in vitro culture in specific mediums for metaphase II stage was observed.

Reproductive success in endangered captive small felids species is very low. Due to great variability in endocrine environment post gonadotropin treatment, after artificial insemination pregnancy rates are very low. Nowadays, ovarian activity controll improves the AI success in many species. In this study, new protocols were compared to improve the fertilization rates in artificial insemination programs in domestic cat. Female domestic cats were divided in three treatments: 1) control (eCG/hCG); 2) levonorgestrel (0.075 mg) orally during 37 days + eCG/hCG; 3) etonogestrel subdermal implant during 37 days + eCG/hCG: Laparoscopies were done 29-39 hours post hCG treatment to verify ovarian activity. Vaginal swabs were collected at laparoscopic procedures. Fecal samples were colected 60 days before, during and 60 days after the gonadotropin treatment for estradiol assay. Means comparisons were done by ANOVA test. Results demonstrated that etonogestrel (implant) and not oral levonorgestrel successfully suppressed ovarian activity. The levonorgestrel group did not show ovarian inactivity during the administration, presenting oestradiol peaks and without significative diference comparing to control group. All females presented anuclear and nuclear superficial vaginal epithelial cells at laparoscopies. In conclusion, the etonogestrel implant used in the domestic cat was efficient and can be used previous to gonadotropin protocol in artificial insemination programs, follicular aspiration and contraception. | Os índices de prenhez após inseminação artificial em felídeos selvagens não são satisfatórios devido ao variável ambiente endócrino após a estimulação com gonadotropinas. O objetivo deste estudo consistiu em aumentar a taxa de sucesso em programas de inseminação artificial em gatas domésticas (animal modelo). As fêmeas (n=9) foram divididas em três grupos, cada um com três animais, sendo: 1) controle (C), somente 200 UI eCG/ 100 UI hCG ; 2) levonorgestrel oral (L) (0,075 mg) durante 37 dias + eCG/hCG; 3) etonogestrel (E), implante subdérmico durante 37 dias + eCG/hCG. Foram submetidas ao exame laparoscópico 29-39 horas após a administração de hCG para verificação da resposta ovariana e realização de esfregaço vaginal para monitoração da fase do ciclo estral. Foram coletadas amostras de fezes 60 dias antes e 60 dias após o tratamento com gonadotropinas para dosagem hormonal de estrógenos. Os resultados foram avaliados através do Teste ANOVA. Os níveis de significância mostraram que o Grupo E, em contraste com o Grupo C e o Grupo L, apresentou inibição satisfatória das concentrações de estrógenos durante a sua utilização. O grupo L não apresentou inibição ovariana durante o tratamento e diferença significativa em relação ao Grupo C. No exame laparoscópico todas as fêmeas dos grupos C, L e E apresentaram folículos e 77% das fêmeas apresentaram corpo lúteo. Também apresentaram células epiteliais superficiais anucleadas e nucleadas características de estro. Concluiu-se que a utilização de implantes de etonogestrel em gatas domésticas mostrou-se eficaz, possibilitando a sua utilização prévia aos programas de inseminação artificial, aspiração folicular e também para a contracepção.