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Detection of IgG antibodies to Toxocara vitulorum soluble larval extract (Ex) by Western Blotting in the colostrum and serum of buffalo cows and calves | Detecção de anticorpos IgG aos antígenos extratos solúveis (Ex) de larvas de Toxocara vitulorum pelo Western Blotting no colostro e no soro de vacas e bezerros búfalos
2005
Wilma Aparecida Starke-Buzetti | Fabiano Pan Ferreira
Toxocara vitulorum is a nematode parasite of the small intestine of cattle and water buffaloes, particularly buffalo calves between one and three months old, causing high morbidity and mortality. The purpose of this research was the characterization of soluble larval extract (Ex) antigen of T. vitulorum by Sds-page and Western blotting (WB) using immune sera and colostrum of buffaloes naturally infected by T. vitulorum. The parasitological status of the buffalo calves was also evaluated using sequential fecal examinations. The results showed that this antigen revealed eleven (11, 13, 16, 22, 25, 32, 43, 53, 68, 82 and 96 kDa) polypeptide bands by SDS-PAGE. Five polypeptide bands of higher molecular weight (43, 53, 68, 82 and 96 kDa) were recognized by sera and colostrum of all groups of infected animals when analyzed by WB. But only the fractions of 53, 68, 82, and 96 kDa that were more prominent persisted in the groups of buffalo calves during the beginning of the infection, at the peak of egg output, as well as during the period of rejection and post-rejection of T. vitulorum by the feces of the calves. On the other hand, sera of buffalo calves at one day old, after suckling the colostrum and at the beginning of infection, reacted with the same bands detected by serum and by colostrum of the buffalo cows. | Toxacara vitulorum é um nematódeo que acomete principalmente bezerros búfalos na faixa etária de um a três meses de vida, causando grande morbidade ou mortalidade quando não tratados. A pesquisa objetivou a obtenção do antígeno extrato larval solúvel bruto (Ex) de larvas infectantes de T. vitulorum, bem como a separação das frações antigênicas pelo SDS-PAGE e pelo "Western blotting" (WB), utilizando-se soros imunes e colostros de búfalos naturalmente infectados com T. vitulorum. O acompanhamento do quadro parasitário dos bezerros búfalos também foi realizado. Pôde-se verificar que o antígeno revelou 11 (11, 13, 16, 22, 25, 32, 43, 53, 68, 82 e 96 kDa) bandas protéicas. Quando analisadas pelo WB, cinco dessas bandas (43, 53, 68, 82 e 96 kDa) foram reconhecidas pelos anticorpos presentes nas amostras de soros e de colostros das búfalas e de soros dos bezerros búfalos com um de vida após mamarem o colostro. No entanto, somente as bandas de 53 a 96 kDa que foram as mais evidentes persistiram nos grupos de bezerros búfalos que se encontravam tanto no pico da infecção como no período de expulsão ou pós-expulsão dos helmintos adultos do intestino. As bandas antigênicas de 68 e de 92 kDa, por serem as mais proeminentes podem ser consideradas componentes para futuras vacinas contra T. vitulorum em búfalos.
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