Este experimento foi conduzido para avaliar o valor nutricional (matéria seca e proteína bruta) de seis genótipos de sorgo para silagem, com e sem tanino no grão, colhidos no estádio de grão farináceo, utilizando a técnica da degradabilidade in situ. Seis silagens de genótipos de sorgo foram utilizadas: BR 303, BR 304, BR 601 e AG 2006 (sem tanino no grão) e BR 700 e BR 701 (com tanino no grão). Quatro bovinos machos, canulados no rúmen foram utilizados. Os tempos de incubação foram: 6, 12, 24, 48, 72 e 96 horas. Utilizou-se o tempo zero (t0) para cálculo da solubilidade das silagens. A silagem do sorgo BR 304 apresentou os melhores resultados para a média de desaparecimento da MS e da PB às 96 horas de incubação, seguida pela do AG 2006. O tanino presente nos grãos dos genótipos BR 700 e BR 701 ensilados no estádio de grão farináceo, não respondeu por nenhum efeito depressivo sobre os parâmetros estudados de degradação da matéria seca e da proteína bruta. | The current experiment was carried out to evaluate the nutritive value (dry matter and crude protein) of six sorghum silage genotypes, with or without tannin on grain, harvested in the hard dough stage, by in situ degradability technique. Six sorghum silage genotypes (BR 303, BR 304, BR 601, and AG 2006 without tannin on grain, and BR 700 and BR 701 with tannin on grain) were used. Four crossbred steers, canulated in the rumen, were used for incubation tests. Incubation times were: 6, 12, 24, 48, 72, and 96 hours. The time zero (t0) were used to evaluate the soluble fraction. The BR 304 sorghum silage was better than others to mean disappearance of the dry matter and crude protein, at 96 hours of incubation. The tannin on grain, of the BR 700 and BR 701 sorghum silages (harvested at hard dough stage), didn't influence degradability parameters of the neutral detergent fiber, and acid detergent fiber.

Este experimento foi conduzido para avaliar o valor nutricional (matéria seca e proteína bruta) de seis genótipos de sorgo para silagem, com e sem tanino no grão, colhidos no estádio de grão farináceo, utilizando a técnica da degradabilidade in situ. Seis silagens de genótipos de sorgo foram utilizadas: BR 303, BR 304, BR 601 e AG 2006 (sem tanino no grão) e BR 700 e BR 701 (com tanino no grão). Quatro bovinos machos, canulados no rúmen foram utilizados. Os tempos de incubação foram: 6, 12, 24, 48, 72 e 96 horas. Utilizou-se o tempo zero (t0) para cálculo da solubilidade das silagens. A silagem do sorgo BR 304 apresentou os melhores resultados para a média de desaparecimento da MS e da PB às 96 horas de incubação, seguida pela do AG 2006. O tanino presente nos grãos dos genótipos BR 700 e BR 701 ensilados no estádio de grão farináceo, não respondeu por nenhum efeito depressivo sobre os parâmetros estudados de degradação da matéria seca e da proteína bruta.

Com frequência o dermatófito Microsporum canis está envolvido na etiologia da dermatofitose, podendo ser transmitido para o homem por cães e gatos. Neste estudo foi procedida inoculação experimental de M. canis em cobaias resultando em lesões em 100 % dos animais e o curso clínico consistiu de período de incubação, fase inflamatória e fase de resolução das lesões. O exame histopatológico de biópsias cutâneas revelou presença de infiltrado neutrofílico e edema; acantose, hiperqueratose e espongiose. Estas lesões tornaram-se menos acentuadas no 30.0 dia pós-inoculação. Esporos e hifas de M. canis foram detectadas em cortes histológicos corados com PAS (Ácido Periódico de Schiff). A combinação dos corantes fluorescentes diacetato de fluoresceína (DF) e brometo de etídio (BE), possibilitou uma adequada visualização das células fúngicas viáveis e não viáveis com evidenciação de seus caracteres morfológicos. Este modelo experimental representa um valioso instrumento para o estudo da patogênese da infecção por dermatófitos, para a avaliação da eficácia de drogas antifúngicas, podendo também ser utilizado em estudos sobre a imunologia das dermatofitoses e na determinação da morfogênese de dermatófitos. | Dermatophytosis is a zoonosis in whose etiology the dermatophyte Microsporum canis is frequently involved. The fungus can be transmitted to man by dogs and cats. In the present study, guinea pigs were experimentally inoculated with M. canis and the course of the lesions was evaluated. Inoculation resulted in lesions in 100% of the animals, with a clinical course consisting of an incubation period, an inflammatory and a phase of lesion resolution. The histopathologic evaluation of the skin biopsies revealed the presence of acanthosis, hyperkeratosis, spongiosis and marked dermal edema. M. canis spores and hyphae were detected in histologic sections stained with periodic acid-Schiff. The combination of the fluorescent dyes FD and EB permitted the adequate visualization of viable and dead fungal cells in skin fragments of guinea pigs inoculated with M. canis and the identification of the morphologic characteristics of the cells. This experimental model represents a valuable instrument for the study of the pathogenesis of dermatophytic infection with respect to the evaluation of the efficacy of antifungal drugs, and may also be used for the study of the immunology of dermatophytoses and of dermatophyte morphogenes

Com frequência o dermatófito Microsporum canis está envolvido na etiologia da dermatofitose, podendo ser transmitido para o homem por cães e gatos. Neste estudo foi procedida inoculação experimental de M. canis em cobaias resultando em lesões em 100 % dos animais e o curso clínico consistiu de período de incubação, fase inflamatória e fase de resolução das lesões. O exame histopatológico de biópsias cutâneas revelou presença de infiltrado neutrofílico e edema; acantose, hiperqueratose e espongiose. Estas lesões tornaram-se menos acentuadas no 30.0 dia pós-inoculação. Esporos e hifas de M. canis foram detectadas em cortes histológicos corados com PAS (Ácido Periódico de Schiff). A combinação dos corantes fluorescentes diacetato de fluoresceína (DF) e brometo de etídio (BE), possibilitou uma adequada visualização das células fúngicas viáveis e não viáveis com evidenciação de seus caracteres morfológicos. Este modelo experimental representa um valioso instrumento para o estudo da patogênese da infecção por dermatófitos, para a avaliação da eficácia de drogas antifúngicas, podendo também ser utilizado em estudos sobre a imunologia das dermatofitoses e na determinação da morfogênese de dermatófitos.

Amostras de fezes foram colhidas de 138 gatos, de idade, sexo e raça variadas, capturados nas ruas das cidades de São Paulo e Guarulhos, para determinação da presença de parasitos gastrintestinais. Os animais encontravam-se alojados individualmente no Centro de Controle de Zoonoses dos Municípios de São Paulo (107 gatos) e Guarulhos (31gatos). As fezes foram colhidas individualmente e processadas pela técnica de flutuação em solução de sacarose (d=1,203g/cm³). Dentre os protozoários o agente mais freqüente foi o Cystoisospora felis, em 36 gatos (26,09%), seguido pelo Cystoisospora rivolta, em 34 (24,64%), pelo Cryptosporidium parvum, em dois (1,45%) e pelo Sarcocystis spp. em um animal (0,72%). Dentre os helmintos, Toxocara cati foi o de maior ocorrência, com 39 gatos positivos (28,26%), seguido pelo Ancylostoma spp., com 12 gatos positivos (8,70%) e pelo Platynosomun fastosum em dois gatos (1,45%). A presença de proglotes de Dipylidium caninum foi observada em duas amostras, quando da colheita nas gaiolas, dado este certamente subestimado, uma vez que o encontro de cápsula ovígera em fezes é bastante raro, sendo o diagnóstico feito pela observação de proglotes nas fezes frescas. Os parasitos estavam presentes em infecções múltiplas em 25 animais (18,12%) sendo as ocorrências mais comuns T.cati com Cystoisospora spp. e T.cati com Ancylostoma spp., ambas com 7,97% de ocorrência (11 amostras). | Fecal samples were collected from 138 cats with different sex and breeds captured from the streets of São Paulo and Guarulhos for the determination of gastrointestinal parasites infection. The animals were kept individually at Zoonosis Control Center at the cities of São Paulo (107 cats) and Guarulhos (31 cats). The feces were individually collected and examined by using sacarose solution flotation technique (d=1.203g/cm³). From the 138 samples, 80 (57.97%) were positive. Among the protozoa the most frequent agent was Cystoisospora felis in 36 cats (26.09%) followed by Cystoisospora rivolta in 34 cats (24.64%), Cryptosporidium parvum (1.45%) in two cats and Sarcocystis spp, in one cat (0.72%). Among the helminthes, Toxocara cati presented the high occurrence with 43 positive cats (31.16%), followed by Ancylostoma spp with 12 positive cats (8.70%) and Platynosomum fastosum in two cats (1.45%). Mixed infection were observed in 25 cats (18.12%) with T.cati and Cystoisospora spp. and T.cati and Ancylostoma spp, been the most common occurrence, both with 7.97% (11 samples) of occurrence.

Amostras de fezes foram colhidas de 138 gatos, de idade, sexo e raça variadas, capturados nas ruas das cidades de São Paulo e Guarulhos, para determinação da presença de parasitos gastrintestinais. Os animais encontravam-se alojados individualmente no Centro de Controle de Zoonoses dos Municípios de São Paulo (107 gatos) e Guarulhos (31gatos). As fezes foram colhidas individualmente e processadas pela técnica de flutuação em solução de sacarose (d=1,203g/cm³). Dentre os protozoários o agente mais freqüente foi o Cystoisospora felis, em 36 gatos (26,09%), seguido pelo Cystoisospora rivolta, em 34 (24,64%), pelo Cryptosporidium parvum, em dois (1,45%) e pelo Sarcocystis spp. em um animal (0,72%). Dentre os helmintos, Toxocara cati foi o de maior ocorrência, com 39 gatos positivos (28,26%), seguido pelo Ancylostoma spp., com 12 gatos positivos (8,70%) e pelo Platynosomun fastosum em dois gatos (1,45%). A presença de proglotes de Dipylidium caninum foi observada em duas amostras, quando da colheita nas gaiolas, dado este certamente subestimado, uma vez que o encontro de cápsula ovígera em fezes é bastante raro, sendo o diagnóstico feito pela observação de proglotes nas fezes frescas. Os parasitos estavam presentes em infecções múltiplas em 25 animais (18,12%) sendo as ocorrências mais comuns T.cati com Cystoisospora spp. e T.cati com Ancylostoma spp., ambas com 7,97% de ocorrência (11 amostras).

O presente trabalho investigou a eficiência da solução salina 0,9% e tampão fosfato salina (PBS) na conservação de folículos pré-antrais caprinos in situ a diferentes temperaturas e tempos de incubação. O par ovariano de cada animal foi dividido em 19 fragmentos. Um fragmento foi escolhido aleatoriamente e fixado (controle). Os outros 18 fragmentos foram distribuídos aleatoriamente em tubos contendo solução salina 0,9% ou PBS a 4, 20 ou 39 °C por 4, 12 ou 24 h. Um total de 5.921 folículos pré-antrais foram analisados. A qualidade dos folículos pré-antrais foi avaliada através de histologia clássica. A incubação de fragmentos ovarianos em solução salina 0,9% ou PBS a 4 ºC não reduziu significativamente a percentagem de folículos morfologicamente normais quando comparados com o controle, exceto após a conservação em solução salina 0,9% por 24 h. A incubação de fragmentos ovarianos a 20 ou 39°C reduziu a percentagem de folículos pré-antrais normais quando comparados com o controle, exceto após conservação em PBS a 20°C por 4 h. Em conclusão, este estudo mostrou pela primeira vez que folículos pré-antrais caprinos podem ser conservados in situ com sucesso a 4 ºC em solução salina 0,9% por 12 h e em PBS por 24 h, e a 20 ºC em PBS por 4 h. | The present work investigated the efficiency of 0.9% saline solution and Phosphate Buffered Saline (PBS) in the preservation of goat preantral follicles in situ at different temperatures and incubation times. The ovarian pair of each animal was divided into 19 fragments. One ovarian fragment was taken randomly and fixed (control). The other 18 fragments were randomly distributed in tubes containing 0.9% saline solution or PBS at 4, 20 or 39 ºC for 4, 12 or 24 h. A total of 5,921 preantral follicles were examined. The quality of preantral follicles was evaluated by classical histology. The storage of ovarian fragments in 0.9% saline solution or PBS at 4 ºC did not reduce significantly the percentage of morphologically normal follicles when compared with the control, except after preservation in 0.9% saline solution for 24 h. The storage of ovarian fragments at 20 or 39°C reduced the percentage of normal preantral follicles when compared to the control, except after preservation in PBS at 20°C for 4 h. In conclusion, this study showed for the first time that goat preantral follicles can be stored in situ successfully at 4 ºC in 0.9% saline solution for 12 h and in PBS for 24 h, and at 20 ºC in PBS for 4 h.

O presente trabalho investigou a eficiência da solução salina 0,9% e tampão fosfato salina (PBS) na conservação de folículos pré-antrais caprinos in situ a diferentes temperaturas e tempos de incubação. O par ovariano de cada animal foi dividido em 19 fragmentos. Um fragmento foi escolhido aleatoriamente e fixado (controle). Os outros 18 fragmentos foram distribuídos aleatoriamente em tubos contendo solução salina 0,9% ou PBS a 4, 20 ou 39 °C por 4, 12 ou 24 h. Um total de 5.921 folículos pré-antrais foram analisados. A qualidade dos folículos pré-antrais foi avaliada através de histologia clássica. A incubação de fragmentos ovarianos em solução salina 0,9% ou PBS a 4 ºC não reduziu significativamente a percentagem de folículos morfologicamente normais quando comparados com o controle, exceto após a conservação em solução salina 0,9% por 24 h. A incubação de fragmentos ovarianos a 20 ou 39°C reduziu a percentagem de folículos pré-antrais normais quando comparados com o controle, exceto após conservação em PBS a 20°C por 4 h. Em conclusão, este estudo mostrou pela primeira vez que folículos pré-antrais caprinos podem ser conservados in situ com sucesso a 4 ºC em solução salina 0,9% por 12 h e em PBS por 24 h, e a 20 ºC em PBS por 4 h.

Foi avaliada a influência da citocalasina B na vitrificação de oócitos e embriões bovinos produzidos in vitro. No Experimento I, 956 oócitos foram maturados por 22h, sendo imediatamente vitrificados (tratamento Vitri) ou expostos por 15 a 20 minutos, à solução com 7,5µg/mL (tratamento CB7,5Vitri) ou 45µg/mL (tratamento CB45Vitri) de citocalasina B, antes da vitrificação. Após 30 segundos de exposição à SV1 [400µl TCM-Hepes com 10% soro fetal (SF), 50µl etilenoglicol (EG) e 50µl DMSO], e 20 segundos à SV2 (300µl trealose 1,0M + 20% SF, 100µl EG e 100µl DMSO), os oócitos foram vitrificados em palhetas estiradas (OPS). O reaquecimento foi realizado a 37-38ºC em duas etapas de 5 minutos cada, em trealose 0,3M e 0,15M. Não houve diferenças (P>;0,05) nos percentuais de clivagem e desenvolvimento embrionário entre os tratamentos Vitri, Cito7,5Vitri e Cito45Vitri, os quais foram inferiores (P;0,05) no percentual de re-expansão e eclosão entre os grupos Vitri e CB45Vitri, os quais foram inferiores (P<0,05) ao grupo controle. Os resultados indicam que, independentemente da dose utilizada, a exposição a citocalasina B não produz efeito benéfico na vitrificação de oócitos ou blastocistos bovinos produzidos in vitro. | In this study, the influence of cytochalasin B on the survival and development after vitrification of oocytes and in vitro produced (IVP) bovine blastocysts was evaluated. In the Experiment I, 956 oocytes were matured for 22h and were immediately vitrified (Vitri treatment) or exposed for 15-20 minutes, to 7.5µg/ml (CB7.5Vitri treatment) or 45µg/ml (CB45Vitri treatment) cytochalasin B solutions, before vitrification. After 30 seconds of exposure to SV1 [400µl TCM-Hepes with 10% fetal serum (SF), 50µl ethylene glycol (EG) and 50µl DMSO], and 20 seconds to SV2 (300µl trehalose 1,0M + 20% SF, 100µl EG and 100µl DMSO) solutions, the oocytes were vitrified in Open Pulled Straws (OPS). The rewarming was performed at 37-38ºC in two steps of 5 minutes each, into 0.3 and 0.15M trehalose solutions, respectively. There was no difference (P>;0.05) in the cleavage and embryo rates between Vitri, Cito7.5Vitri and Cito45Vitri treatments, which were inferior to control group (P;0.05), which were lower than those observed in the Control group (P<0.05). The results show that, independently of dose studied (7.5 or 45mg/ml), cytochalasin B has not a beneficial effect to the vitrification of oocytes and IVP bovine blastocysts.

Foi avaliada a influência da citocalasina B na vitrificação de oócitos e embriões bovinos produzidos in vitro. No Experimento I, 956 oócitos foram maturados por 22h, sendo imediatamente vitrificados (tratamento Vitri) ou expostos por 15 a 20 minutos, à solução com 7,5µg/mL (tratamento CB7,5Vitri) ou 45µg/mL (tratamento CB45Vitri) de citocalasina B, antes da vitrificação. Após 30 segundos de exposição à SV1 [400µl TCM-Hepes com 10% soro fetal (SF), 50µl etilenoglicol (EG) e 50µl DMSO], e 20 segundos à SV2 (300µl trealose 1,0M + 20% SF, 100µl EG e 100µl DMSO), os oócitos foram vitrificados em palhetas estiradas (OPS). O reaquecimento foi realizado a 37-38ºC em duas etapas de 5 minutos cada, em trealose 0,3M e 0,15M. Não houve diferenças (P>;0,05) nos percentuais de clivagem e desenvolvimento embrionário entre os tratamentos Vitri, Cito7,5Vitri e Cito45Vitri, os quais foram inferiores (P;0,05) no percentual de re-expansão e eclosão entre os grupos Vitri e CB45Vitri, os quais foram inferiores (P<0,05) ao grupo controle. Os resultados indicam que, independentemente da dose utilizada, a exposição a citocalasina B não produz efeito benéfico na vitrificação de oócitos ou blastocistos bovinos produzidos in vitro.

Para avaliar a influência da gestação e do puerpério sobre os constituintes do leucograma de caprinos da raça Saanen foram colhidas 150 amostras de sangue, distribuídas em 5 grupos com 30 animais cada: cabras não prenhes; fase inicial da gestação (30 -| 60 dias de prenhez); fase média da gestação (60 -| 120 dias de prenhez); fase final da gestação (&gt;; 120 dias de prenhez); e recém-paridas (&lt; 30 dias de puerpério). Nas amostras de sangue, colhidas em frascos contendo EDTA, foi realizada a contagem do número total de leucócitos em câmara de Neubauer, utilizando-se o líquido de Thoma como diluidor e a contagem diferencial de leucócitos,efetuada em esfregaços sangüíneos, corados pelo Método de Rosenfeld. Observou-se a influência da gestação sobre o leucograma, pois o quadro leucocitário foi caracterizado por uma diminuição gradual do número de leucócitos com o avançar da gestação, atingindo seus menores valores no final da gestação e no puerpério. Essa diminuição ocorreu devido ao comportamento observado para o número absoluto de linfócitos, que também diminuiu com a evolução da gestação. Dessa forma, o quadro leucocitário tornou-se, predominantemente, neutrofílico na fase final da gestação e no puerpério. | With the intention of evaluating the influence of pregnancy and puerperium in the leucogram of Saanen goats (Capra hircus), blood samples were taken from 150 goats bred on the State of São Paulo and were allotted into 5 experimental groups of 30 goats each as described: non-pregnant; initial pregnancy (30 to 60 days of pregnancy); middle pregnancy (60 to 120 days of pregnancy); late pregnancy (more than 120 days of pregnancy); kidding goats (until 30 days after parturition). The blood samples were collected with EDTA and submitted to the following tests: total leukocyte counts (in the modified Neubauer hemocytometer, using Thoma's liquid as a dilute); and differential leukocyte count (made up with blood smears and stained with Rosenfeld method). The influence of pregnancy and puerperium on the leucogram was verified due to a gradual decrease on the number of leucocytes further on in pregnancy, reaching its lower values at the end of pregnancy and puerperium. This decrease occurred due to behavior observed on the absolute number of lymphocytes that also decreased further on in pregnancy. Therefore the leucograma became mostly neutrophilic at the end of pregnancy and puerperium.

Para avaliar a influência da gestação e do puerpério sobre os constituintes do leucograma de caprinos da raça Saanen foram colhidas 150 amostras de sangue, distribuídas em 5 grupos com 30 animais cada: cabras não prenhes; fase inicial da gestação (30 -| 60 dias de prenhez); fase média da gestação (60 -| 120 dias de prenhez); fase final da gestação (>; 120 dias de prenhez); e recém-paridas (< 30 dias de puerpério). Nas amostras de sangue, colhidas em frascos contendo EDTA, foi realizada a contagem do número total de leucócitos em câmara de Neubauer, utilizando-se o líquido de Thoma como diluidor e a contagem diferencial de leucócitos,efetuada em esfregaços sangüíneos, corados pelo Método de Rosenfeld. Observou-se a influência da gestação sobre o leucograma, pois o quadro leucocitário foi caracterizado por uma diminuição gradual do número de leucócitos com o avançar da gestação, atingindo seus menores valores no final da gestação e no puerpério. Essa diminuição ocorreu devido ao comportamento observado para o número absoluto de linfócitos, que também diminuiu com a evolução da gestação. Dessa forma, o quadro leucocitário tornou-se, predominantemente, neutrofílico na fase final da gestação e no puerpério.

O aperfeiçoamento das técnicas que objetivam a exploração do potencial reprodutivo das fêmeas requer a compreensão mais ampla dos mecanismos de controle de desenvolvimento folicular. Uma alternativa de estudo nesta esfera, é a quantificação da expressão relativa de genes envolvidos nos processos de recrutamento, seleção e desenvolvimento folicular, pelo emprego da técnica de transcrição - reversa associado a reação em cadeia pela polimerase (RT - PCR). O presente trabalho objetivou quantificar a expressão relativa dos genes insulin-like growth factor I (IGF-I) e do receptor do hormônio folículo estimulante (FSHR), tendo como controle interno o gene da gliceraldeído 3-fosfato desidrogenase (GAPDH). Foram utilizados ovários bovinos de animais de matadouro em diferentes fases do ciclo estral. O RNA total dos folículos e tecido ovarianos foi purificado por TRIZOL. As reações de RT-PCR foram realizadas com o "kit" SuperScriptTM First-Strand. Os produtos de PCR foram analisados em gel de agarose e as bandas submetidas à análise densitométrica. Todos os genes foram amplificados observando-se a curva exponencial de amplificação, a validação do método foi realizada através de análise de regressão, sendo estabelecido o coeficiente de amplificação (E). A expressão relativa de mRNA para cada gene de interesse foi calculada pela fórmula estabelecida por Prelle et al.12. Em todos os tecidos analisados, todos os genes foram expressos, sobressaltando-se diferenças nos diferentes ciclos estudados. Com relação os dados referentes ao coeficiente de amplificação (E), observou-se tanto para gene controle (GAPDH), como para o gene IGF-I concordância nos valores encontrados para as diferentes classes analisadas. Quanto ao gene IGF-I, a interpretação dos achados para a expressão relativa de mRNA pode está relacionada ao caráter constitutivo dessa proteína ou devido os transcritos não serem dependentes dos níveis de FSH. Observou-se diferenças na expressão relativa de mRNA de FSHR entre as classes de tecidos analisados, o que pode ser explicado pela variação do número de receptores nas células da granulosa nas diferentes fases do ciclo estral. Pode-se perceber a partir desse estudo que a técnica de RT-PCR semi quantitativo é de grande importância biotecnológica, possibilitando auxílio na compreensão da dinâmica folicular. Entretanto esses estudos devem ser ampliados com outros genes para melhor compreensão das etapas fisiológicas envolvidas na foliculogênese. | The improvement of techniques to maximize reproductive potential of females needs the whole comprehension of the controlling mechanisms of follicular development. An alternative for this purpose is the quantification of relative gene expression from those genes involved in recruitment, selection and follicular development, using reverse transcriptase - polymerase chain reaction (RT - PCR). The present study aimed to quantify relative gene expression from insulin-like growth factor I (IGF-I) and follicle stimulating hormone receptor (FSHR) in cattle (Bos primigenius indicus), using as internal control the gliceraldheyde 3 phosphate dehydrogenase (GAPDH) gene. Ovaries in different estral cycle stages were obtained from slaughtered animals. Total RNA from follicles and ovarian tissue was purified and the RT-PCR conditions were standardized. PCR products were analyzed in ethydium bromide agarose gels and the bands submitted to densitometric analysis. Exponential amplification curves were constructed and the method's validation was performed using regression analysis to determine the amplification coefficient (E) for each of the three genes. Relative expression for each gene was calculated using the formula described by Prelle et al.12. In every sample there was gene expression detected for each gene showing differences related to cycle temperature. Amplification coefficient (E) was similar between control gene (GAPDH) and IGFI, independently of the class analyzed. IGFI linear amplification could be related to the constitutive characteristic of this protein since the transcripts are not dependents of FSH levels. It was observed difference in FSHR mRNA expression between the classes analyzed. It could be due to the variation of the receptor number in granulosa cells for each different phase of estral cycle. Semi-quantitative RT-PCR has a large application in biotechnology since it is useful to help us the better understanding of follicular dynamics. However these studies must be conducted using other genes in order to provide new clues for the physiology of folliculogenesis.

O aperfeiçoamento das técnicas que objetivam a exploração do potencial reprodutivo das fêmeas requer a compreensão mais ampla dos mecanismos de controle de desenvolvimento folicular. Uma alternativa de estudo nesta esfera, é a quantificação da expressão relativa de genes envolvidos nos processos de recrutamento, seleção e desenvolvimento folicular, pelo emprego da técnica de transcrição - reversa associado a reação em cadeia pela polimerase (RT - PCR). O presente trabalho objetivou quantificar a expressão relativa dos genes insulin-like growth factor I (IGF-I) e do receptor do hormônio folículo estimulante (FSHR), tendo como controle interno o gene da gliceraldeído 3-fosfato desidrogenase (GAPDH). Foram utilizados ovários bovinos de animais de matadouro em diferentes fases do ciclo estral. O RNA total dos folículos e tecido ovarianos foi purificado por TRIZOL. As reações de RT-PCR foram realizadas com o "kit" SuperScriptTM First-Strand. Os produtos de PCR foram analisados em gel de agarose e as bandas submetidas à análise densitométrica. Todos os genes foram amplificados observando-se a curva exponencial de amplificação, a validação do método foi realizada através de análise de regressão, sendo estabelecido o coeficiente de amplificação (E). A expressão relativa de mRNA para cada gene de interesse foi calculada pela fórmula estabelecida por Prelle et al.12. Em todos os tecidos analisados, todos os genes foram expressos, sobressaltando-se diferenças nos diferentes ciclos estudados. Com relação os dados referentes ao coeficiente de amplificação (E), observou-se tanto para gene controle (GAPDH), como para o gene IGF-I concordância nos valores encontrados para as diferentes classes analisadas. Quanto ao gene IGF-I, a interpretação dos achados para a expressão relativa de mRNA pode está relacionada ao caráter constitutivo dessa proteína ou devido os transcritos não serem dependentes dos níveis de FSH. Observou-se diferenças na expressão relativa de mRNA de FSHR entre as classes de tecidos analisados, o que pode ser explicado pela variação do número de receptores nas células da granulosa nas diferentes fases do ciclo estral. Pode-se perceber a partir desse estudo que a técnica de RT-PCR semi quantitativo é de grande importância biotecnológica, possibilitando auxílio na compreensão da dinâmica folicular. Entretanto esses estudos devem ser ampliados com outros genes para melhor compreensão das etapas fisiológicas envolvidas na foliculogênese.

Este experimento, realizado na região de Jaboticabal (SP), utilizou uma cultura de pêssego (Prunus persica L.), durante a sua florada com a finalidade de verificar a atuação dos insetos visitantes nas flores na produção de frutos. A concentração média de açucares no néctar e a quantidade média produzida por dia de néctar é de 27,9% e de 3,2 mg, respectivamente. O peso médio das anteras por flor foi de 1,59 mg. A abelha Apis mellifera (73%) foi o principal inseto visitante seguida da Trigona spinipes (17%) e Xylocopa sp (4%). Observou-se a presença de beija-flores (6%), coletando néctar. A freqüência máxima das abelhas A. mellifera, para coleta de néctar e pólen, ocorreu as 12 horas. O número de frutos resultantes do tratamento em que as flores recebiam as visitas foi 14% maior que no tratamento em as flores não eram visitadas. Do total de frutos colhidos no tratamento coberto (sem visitas), 82% apresentaram-se perfeitos, com boa formação e simetria. No tratamento descoberto, 90,2% apresentaram-se com boa formação, havendo diferença estatística entre os dois tratamentos. | This experiment, accomplished in the area of Jaboticabal (SP), it used a peach culture (Prunus persica L.), during yours bloomed with the purpose of verifying the insects visitors performance in the flowers in the production of fruits. The medium concentration of sugar in the nectar and the medium amount produced a day of nectar it is of 27,9% and of 3,2 mg, respectively. The medium weight of the anthers for flower was of 1,59 mg. The honeybee Apis mellifera (73%) it was the principal insect visitor followed by the Trigona spinipes (17%) and Xylocopa sp (4%). The presence of hummingbird was observed (6%), collecting nectar. The maximum frequency of the bees A. mellifera, for nectar collection and pollen, happened the 12 hours. The number of resulting fruits of the treatment in that the flowers received the visits it was 14% larger than in the treatment in the flowers were not visited. Of the total of fruits picked in the covered treatment (without visits), 82% came perfect, with good formation and symmetry. In the discovered treatment, 90,2% came with good formation, having difference statistics among the two treatments.

Este experimento, realizado na região de Jaboticabal (SP), utilizou uma cultura de pêssego (Prunus persica L.), durante a sua florada com a finalidade de verificar a atuação dos insetos visitantes nas flores na produção de frutos. A concentração média de açucares no néctar e a quantidade média produzida por dia de néctar é de 27,9% e de 3,2 mg, respectivamente. O peso médio das anteras por flor foi de 1,59 mg. A abelha Apis mellifera (73%) foi o principal inseto visitante seguida da Trigona spinipes (17%) e Xylocopa sp (4%). Observou-se a presença de beija-flores (6%), coletando néctar. A freqüência máxima das abelhas A. mellifera, para coleta de néctar e pólen, ocorreu as 12 horas. O número de frutos resultantes do tratamento em que as flores recebiam as visitas foi 14% maior que no tratamento em as flores não eram visitadas. Do total de frutos colhidos no tratamento coberto (sem visitas), 82% apresentaram-se perfeitos, com boa formação e simetria. No tratamento descoberto, 90,2% apresentaram-se com boa formação, havendo diferença estatística entre os dois tratamentos.

Este experimento, realizado na região de Jaboticabal (SP), utilizou uma cultura de pêssego (Prunus persica L.), durante a sua florada com a finalidade de verificar a atuação dos insetos visitantes nas flores na produção de frutos. A concentração média de açucares no néctar e a quantidade média produzida por dia de néctar é de 27,9% e de 3,2 mg, respectivamente. O peso médio das anteras por flor foi de 1,59 mg. A abelha Apis mellifera (73%) foi o principal inseto visitante seguida da Trigona spinipes (17%) e Xylocopa sp (4%). Observou-se a presença de beija-flores (6%), coletando néctar. A freqüência máxima das abelhas A. mellifera, para coleta de néctar e pólen, ocorreu as 12 horas. O número de frutos resultantes do tratamento em que as flores recebiam as visitas foi 14% maior que no tratamento em as flores não eram visitadas. Do total de frutos colhidos no tratamento coberto (sem visitas), 82% apresentaram-se perfeitos, com boa formação e simetria. No tratamento descoberto, 90,2% apresentaram-se com boa formação, havendo diferença estatística entre os dois tratamentos. | This experiment, accomplished in the area of Jaboticabal (SP), it used a peach culture (Prunus persica L.), during yours bloomed with the purpose of verifying the insects visitors performance in the flowers in the production of fruits. The medium concentration of sugar in the nectar and the medium amount produced a day of nectar it is of 27,9% and of 3,2 mg, respectively. The medium weight of the anthers for flower was of 1,59 mg. The honeybee Apis mellifera (73%) it was the principal insect visitor followed by the Trigona spinipes (17%) and Xylocopa sp (4%). The presence of hummingbird was observed (6%), collecting nectar. The maximum frequency of the bees A. mellifera, for nectar collection and pollen, happened the 12 hours. The number of resulting fruits of the treatment in that the flowers received the visits it was 14% larger than in the treatment in the flowers were not visited. Of the total of fruits picked in the covered treatment (without visits), 82% came perfect, with good formation and symmetry. In the discovered treatment, 90,2% came with good formation, having difference statistics among the two treatments.

Foi estudada a resposta reprodutiva (taxa de parição e tamanho de leitigada) das ovelhas inseminadas artificiosamente após o tratamento de sincronização do estro em relação à carneiros, dose de PMSG e número de inseminações artificiales. Ovelhas adultas Merino em estação reprodutiva (primavera), foram tratadas com esponjas intravaginais impregnadas com 60 mg acetato de medroxiprogesterona (MAP) para sincronização do estro. As esponjas foram retiradas após 14 dias e foram administradas i.m. 375 ou 400 UI gonadotrofina da égua pregnhe (PMSG). Utilizaram-se carneiros vasectomizados para a detecção do cio. As ovelhas que apresentaram cio foram inseminadas artificiosamente com sêmen fresco diluido de carneiros, uma ou duas vezes. A taxa de parição não foi afectada pelos carneiros ou pelo número de inseminações. A taxa de parição foi maior nas ovelhas tratadas com 400 UI PMSG que aquêlas tratadas com 375 UI (76.47% v 54.32%; p&lt;0.01). O tamanho de leitigada não sofreu influência das variáveis estudadas. | The experiment was conducted to determine the reproductive performance (lambing rate and litter size) of sheep artificially inseminated at a synchronized estrus in relation to rams, dose of PMSG and number of artificial inseminations performed. During spring cyclic Merino adult ewes were treated with intravaginal sponges impregnated with 60 mg medroxyprogesterone acetate (MAP). After 14 days sponges were removed and the females received an intramuscular injection of either 375 or 400 IU pregnant mare serum gonadotropin (PMSG). Estrus detection was performed with vasectomized rams. Females in estrus were cervically inseminated with fresh diluted semen from different rams either once or twice. Data on lambing rate and litter size were recorded. Lambing rate was not affected by rams or number of inseminations. A higher proportion of ewes that received 400 IU PMSG lambed compared with those receiving 375 IU PMSG (76.47% v 54.32%; p&lt;0.01). Litter size was not affected by any of the variables under study.

The experiment was conducted to determine the reproductive performance (lambing rate and litter size) of sheep artificially inseminated at a synchronized estrus in relation to rams, dose of PMSG and number of artificial inseminations performed. During spring cyclic Merino adult ewes were treated with intravaginal sponges impregnated with 60 mg medroxyprogesterone acetate (MAP). After 14 days sponges were removed and the females received an intramuscular injection of either 375 or 400 IU pregnant mare serum gonadotropin (PMSG). Estrus detection was performed with vasectomized rams. Females in estrus were cervically inseminated with fresh diluted semen from different rams either once or twice. Data on lambing rate and litter size were recorded. Lambing rate was not affected by rams or number of inseminations. A higher proportion of ewes that received 400 IU PMSG lambed compared with those receiving 375 IU PMSG (76.47% v 54.32%; p&lt;0.01). Litter size was not affected by any of the variables under study. | Foi estudada a resposta reprodutiva (taxa de parição e tamanho de leitigada) das ovelhas inseminadas artificiosamente após o tratamento de sincronização do estro em relação à carneiros, dose de PMSG e número de inseminações artificiales. Ovelhas adultas Merino em estação reprodutiva (primavera), foram tratadas com esponjas intravaginais impregnadas com 60 mg acetato de medroxiprogesterona (MAP) para sincronização do estro. As esponjas foram retiradas após 14 dias e foram administradas i.m. 375 ou 400 UI gonadotrofina da égua pregnhe (PMSG). Utilizaram-se carneiros vasectomizados para a detecção do cio. As ovelhas que apresentaram cio foram inseminadas artificiosamente com sêmen fresco diluido de carneiros, uma ou duas vezes. A taxa de parição não foi afectada pelos carneiros ou pelo número de inseminações. A taxa de parição foi maior nas ovelhas tratadas com 400 UI PMSG que aquêlas tratadas com 375 UI (76.47% v 54.32%; p&lt;0.01). O tamanho de leitigada não sofreu influência das variáveis estudadas.

Foi estudada a resposta reprodutiva (taxa de parição e tamanho de leitigada) das ovelhas inseminadas artificiosamente após o tratamento de sincronização do estro em relação à carneiros, dose de PMSG e número de inseminações artificiales. Ovelhas adultas Merino em estação reprodutiva (primavera), foram tratadas com esponjas intravaginais impregnadas com 60 mg acetato de medroxiprogesterona (MAP) para sincronização do estro. As esponjas foram retiradas após 14 dias e foram administradas i.m. 375 ou 400 UI gonadotrofina da égua pregnhe (PMSG). Utilizaram-se carneiros vasectomizados para a detecção do cio. As ovelhas que apresentaram cio foram inseminadas artificiosamente com sêmen fresco diluido de carneiros, uma ou duas vezes. A taxa de parição não foi afectada pelos carneiros ou pelo número de inseminações. A taxa de parição foi maior nas ovelhas tratadas com 400 UI PMSG que aquêlas tratadas com 375 UI (76.47% v 54.32%; p<0.01). O tamanho de leitigada não sofreu influência das variáveis estudadas.

O objetivo deste estudo foi avaliar os protocolos de capacitação espermática in vitro com 100 mg/ml de heparina e 5 mM de cálcio ionóforo e correlacionar a capacitação com a fertilidade in vivo. A capacitação espermática foi avaliada pela coloração com iodeto de propídio e diacetato de carboxifluoresceína e pela coloração tripla com vermelho congo, vermelho neutro e giemsa. Os espermatozóides foram avaliados quanto a viabilidade (vivos ou mortos) e a qualidade do acrossomo (lesados ou íntegros), sendo caracterizados como capacitados (vivos e lesados), não capacitados (vivos e íntegros) e mortos (lesados ou íntegros). A heparina apresentou 64,54% e 39,16% e o cálcio ionóforo 36,41% e 18,11% de espermatozóides capacitados, respectivamente, pela epifluorescência e coloração tripla. Os touros foram divididos em três grupos de fertilidade, sendo o Grupo A ;68%. Nos três grupos houve diferença significativa (p;0,01) para os espermatozóides capacitados, não capacitados e mortos entre os grupos A, B e C, tanto na epifluorescência quanto na coloração tripla para ambos capacitores (heparina e cálcio ionóforo). Não houve correlação entre os espermatozóides capacitados in vitro e a taxa de fertilidade a campo. A heparina apresentou melhor taxa de espermatozóides capacitados e a epifluorescência mostrou-se mais eficiente na detecção da capacitação espermática (p&lt;0,01). | The aim of this particular study was to test in vitro sperm capacitation protocols, using heparin (100mg/ml) and calcium ionophore (5mM). Propidium iodide and carboxifluorescein diacetate (IP/CFDA) in a fluorescence microscope as well as triple stain (congo red, neutral red and Giemsa) in Phase contrast microscope were used as staining. The spermatozoa were classified according to its viability (alive or dead) and acrossome integrity (damaged or intact). They were considered as follows: capacitated (alive and damaged); non capacitated (alive and not damaged) and dead (damaged or intact). The heparin group showed a ratio of 64.54% and 39.16% of capacitated spermatozoa in IP/CFDA and triple stain, respectively. In the calcium group, 36.41% and 18.11% of spermatozoa were capacitated in IP/CFDA and triple stain, respectively. Bulls were divided into 3 groups according to their fertility rates as follows: Group A &lt; 63%, Group B from 63 to 68% and Group C &gt;; 68%. For all three groups there was significant differences (p;0.01), when observed capacitated, non capacitated and dead spermatozoa among groups A and B; A and C; B and C, using heparin and calcium ionophore in both stains. No correlation was seen between capacitation and fertility rates. Therefore heparin treatment showed better sperm capacitation rates than calcium ionophore. The IP/CFDA technique showed itself as being a better method to evaluate sperm capacitation than the triple stain (p&lt;0.01).

O objetivo deste estudo foi avaliar os protocolos de capacitação espermática in vitro com 100 mg/ml de heparina e 5 mM de cálcio ionóforo e correlacionar a capacitação com a fertilidade in vivo. A capacitação espermática foi avaliada pela coloração com iodeto de propídio e diacetato de carboxifluoresceína e pela coloração tripla com vermelho congo, vermelho neutro e giemsa. Os espermatozóides foram avaliados quanto a viabilidade (vivos ou mortos) e a qualidade do acrossomo (lesados ou íntegros), sendo caracterizados como capacitados (vivos e lesados), não capacitados (vivos e íntegros) e mortos (lesados ou íntegros). A heparina apresentou 64,54% e 39,16% e o cálcio ionóforo 36,41% e 18,11% de espermatozóides capacitados, respectivamente, pela epifluorescência e coloração tripla. Os touros foram divididos em três grupos de fertilidade, sendo o Grupo A ;68%. Nos três grupos houve diferença significativa (p;0,01) para os espermatozóides capacitados, não capacitados e mortos entre os grupos A, B e C, tanto na epifluorescência quanto na coloração tripla para ambos capacitores (heparina e cálcio ionóforo). Não houve correlação entre os espermatozóides capacitados in vitro e a taxa de fertilidade a campo. A heparina apresentou melhor taxa de espermatozóides capacitados e a epifluorescência mostrou-se mais eficiente na detecção da capacitação espermática (p<0,01).

O objetivo deste estudo foi avaliar os protocolos de capacitação espermática in vitro com 100 mg/ml de heparina e 5 mM de cálcio ionóforo e correlacionar a capacitação com a fertilidade in vivo. A capacitação espermática foi avaliada pela coloração com iodeto de propídio e diacetato de carboxifluoresceína e pela coloração tripla com vermelho congo, vermelho neutro e giemsa. Os espermatozóides foram avaliados quanto a viabilidade (vivos ou mortos) e a qualidade do acrossomo (lesados ou íntegros), sendo caracterizados como capacitados (vivos e lesados), não capacitados (vivos e íntegros) e mortos (lesados ou íntegros). A heparina apresentou 64,54% e 39,16% e o cálcio ionóforo 36,41% e 18,11% de espermatozóides capacitados, respectivamente, pela epifluorescência e coloração tripla. Os touros foram divididos em três grupos de fertilidade, sendo o Grupo A &lt;63%, o Grupo B entre 63 e 68% e o Grupo C &gt;68%. Nos três grupos houve diferença significativa (p&lt;0,01) em relação aos espermatozóides capacitados dos tratamentos com heparina e cálcio ionóforo, tanto na epifluorescência quanto na coloração tripla. Não houve diferença estatística significativa (p&gt;0,01) para os espermatozóides capacitados, não capacitados e mortos entre os grupos A, B e C, tanto na epifluorescência quanto na coloração tripla para ambos capacitores (heparina e cálcio ionóforo). Não houve correlação entre os espermatozóides capacitados in vitro e a taxa de fertilidade a campo. A heparina apresentou melhor taxa de espermatozóides capacitados e a epifluorescência mostrou-se mais eficiente na detecção da capacitação espermática (p&lt;0,01). | The aim of this particular study was to test in vitro sperm capacitation protocols, using heparin (100mg/ml) and calcium ionophore (5mM). Propidium iodide and carboxifluorescein diacetate (IP/CFDA) in a fluorescence microscope as well as triple stain (congo red, neutral red and Giemsa) in Phase contrast microscope were used as staining. The spermatozoa were classified according to its viability (alive or dead) and acrossome integrity (damaged or intact). They were considered as follows: capacitated (alive and damaged); non capacitated (alive and not damaged) and dead (damaged or intact). The heparin group showed a ratio of 64.54% and 39.16% of capacitated spermatozoa in IP/CFDA and triple stain, respectively. In the calcium group, 36.41% and 18.11% of spermatozoa were capacitated in IP/CFDA and triple stain, respectively. Bulls were divided into 3 groups according to their fertility rates as follows: Group A &lt; 63%, Group B from 63 to 68% and Group C &gt; 68%. For all three groups there was significant differences (p&lt;0.01), regarding capacitated spermatozoa with heparin and calcium ionophore in both stains IP/CFDA and triple stain. On the other hand, there was no significant differences (p&gt;0.01), when observed capacitated, non capacitated and dead spermatozoa among groups A and B; A and C; B and C, using heparin and calcium ionophore in both stains. No correlation was seen between capacitation and fertility rates. Therefore heparin treatment showed better sperm capacitation rates than calcium ionophore. The IP/CFDA technique showed itself as being a better method to evaluate sperm capacitation than the triple stain (p&lt;0.01).