This study was performed in order to evaluate the detection limit of PCR with fluorescent capillary electrophoresis for Leptospira pomona diagnosis in bovine semen. Negative bovine semen samples were artificially contaminated with Leptospira pomona (10(0) to 10(7) bacteria/ml) and DNA was extracted by phenol/chloroform protocol. DNA fragments visualization was done by three electrophoresis methods: under UV light in 2% agarose gel, silver staining 8% polyacrylamide gel and fluorescent capillary electrophoresis. The detection limit of capillary electrophoresis for Leptospira pomona was 10²bacteria/ml. Under UV light, in 2% agarose gel, the detection limit was of 10(4) bacteria/ml while for silver stained 8% polyacrylamide gel it was 10² bacteria/ml. PCR with fluorescent capillary electrophoresis is an efficient and rapid diagnostic test for DNA detection of Leptospira in bovine semen and this can be an important tool for herd and semen sanitary control in artificial insemination centers. | Este estudo pretendeu avaliar o limiar de detecção da técnica de PCR aliada à eletroforese capilar para diagnóstico da Leptospira pomona em sêmen bovino. Doses inseminantes livres de patógenos foram contaminadas experimentalmente com Leptospira pomona em escalas que variavam de 10(0) a 10(7) bactérias/ml e submetidas à extração de DNA pelo método de fenol/clorofórmio. Após a reação de PCR, a visualização dos fragmentos foi realizada em três tipos de eletroforese: agarose 2% sob luz UV, acrilamida 8% corado com prata e eletroforese capilar fluorescente. A detecção de DNA de Leptospira pomona em sêmen bovino através de eletroforese capilar fluorescente foi possível a partir de concentração de 10² bactérias/ml. Nos métodos de eletroforese em agarose 2%, observou-se limite de detecção de 10(4) bactérias/ml e em gel de poliacrilamida 8% o limite de detecção foi de 10² bactérias/ml. A eletroforese capilar demonstrou ser uma alternativa eficaz e rápida na detecção de DNA de Leptospira em sêmen bovino podendo ser uma valiosa ferramenta para controle de qualidade do sêmen produzido em centrais de inseminação artificial dada a facilidade de automação desse processo.

Anomalias congênitas do coração e de grandes vasos estão entre as mais comuns encontradas em animais, porém são raras em eqüinos. Este relato descreve uma anomalia cardíaca que apresenta confluência entre a parede da aorta e do tronco pulmonar, ramificação da veia cava caudal no átrio esquerdo com presença de válvula e conseqüentemente posição errônea do coração na cavidade torácica de um potro da raça Quarto-de-Milha encontrado morto após o nascimento. O diagnóstico foi realizado pela associação dos achados macroscópicos durante a necrópsia e o exame histopatológico realizados no Curso de Medicina Veterinária- UNESP-Araçatuba. | Congenital anomalies of heart and large vessels are among more common found in animals, however rare in horses. This survey describes a cardiac anomaly that presents confluence between aorta wall and lung trunk, ramification of caudal cava vein in left atrium with presence of valve and consequently erroneous position of heart in thoracic cavity of one foal found dead after birth. The diagnostic was carried out for macroscopic finds association during the necropsy and histopathologic exams carried out at School of Veterinary Medicine - Unesp Araçatuba.

O presente estudo teve por objetivo avaliar funcionalmente os macrófagos lácteos "nonelicited" presentes por meio de testes de fagocitose, espraiamento e liberação de peróxido de hidrogênio. Foram colhidas 56 amostras de leite de 15 búfalas hígidas e mensuradas a contagem de células somáticas total e diferencial, a viabilidade celular, os testes de fagocitose, de espraiamento e a liberação de peróxido de hidrogênio. Dessas variáveis obteve-se respectivamente média de 14.500 cél/mL de leite; com mediana de 4,33% de linfócitos e médias e desvios padrão de 50,77% + 18,28 de células da série monócito/macrófago e 32,13% + 19,27 de polimorfonucleares. A viabilidade das células na suspensão foi 66,8% +15,8 e os índices de fagocitose e espraiamento foram 30,1% + 16,9 e 58,5% +13,3. Não houve diferença entre a liberação de H2O2 espontânea e induzida por PMA. Concluiu-se que os macrófagos presentes no leite de búfalas hígidas e espraiaram significativamente, além de apresentarem correlação com outro marcador de ativação celular, no caso, a liberação de peróxido de hidrogênio; mais da metade dos macrófagos aderidos fagocitaram partículas de zymosan; os fagócitos mantêm sua capacidade de liberar peróxido de hidrogênio, espontaneamente ou não, em grau máximo, com uma significativa variação entre amostras. | The objective of the present study was to evaluate the functioning of nonelicited dairy macrophages present in phagocytosis, spreading and hydrogen peroxide release tests. Fifty-six samples of milk were collected from 15 healthy buffaloes. Total and differential somatic cell counts, cell viability, and indexes of phagocytosis, spreading and hydrogen peroxide release were assessed. The following values were obtained: mean of 14,500 cells/mL of milk, with median equal to 4.33% of lymphocytes; mean and standard deviation equal to 50.77% + 18.28 of monocytes / macrophages and 32.13% + 19.27 polymorphouclear cells. Mean viability of cells in suspension was 66.8% +15.8; phagocytosis and spreading indexes were equal to 30.1% + 16.9 and 58.5% +13.3, respectively. There was no difference between the spontaneous release of H2O2 and the one induced by PMA. It was concluded that nonelicited macrophages present in the milk of healthy buffaloes were significantly capable to spread and phagocyte. Phagocytes presented the ability to release hydrogen peroxide either spontaneously or not, in a maximum level and with a significant variation between samples.

The purpose of the present study was to evaluate the chronic granulomatous inflammatory process experimentally induced in Oreochromis niloticus by the inoculation of BCG and to clarify aspects of the inflammatory reaction in fish for a better understanding of the phylogeny of the process. Results obtained by light microscopy and ultrastructural analysis showed the participation of macrophages, thrombocytes, lymphocytes, eosinophils, plasma cells and foreign type giant cells in the inflammatory process. Besides these cell types, a granulomatous reaction mainly consisting of epithelioid cells was also observed ultrastructurally. These epithelioid cells developed desmosomes throughout the experiment, and also began to express receptors for cytokeratin. Both findings are immunocytochemically characteristic of epithelial cells. Pigment cells (melanomacrophages) could also be seen surrounding all the granulomatoid formation in a crescent fashion and participating in the chronic granulomatous inflammatory reaction. | O objetivo do presente estudo foi avaliar o processo inflamatório crônico granulomatoso induzido experimentalmente em Oreochromis niloticus através da inoculação de BCG e elucidar aspectos da reação inflamatória em peixes para uma melhor compreensão da filogenia do processo. Os resultados obtidos por microscopia de luz comum e ultra-estrutural demonstraram a participação de macrófagos, trombócitos, linfócitos, eosinófilos, células plasmáticas e células gigante tipo corpo estranho no processo inflamatório. Além desses tipos celulares, uma reação granulomatosa constituída predominantemente de células epitelióides também foram observadas ultraestruturalmente. Essas células epitelióides desenvolveram desmossomos ao longo do experimento, e também passaram a expressar receptores para citoqueratina, características estas de células epiteliais. Células pigmentares (melanomacrófagos), envolvendo de maneira crescente toda a formação granulomatóide e, participando ativamente da reação inflamatória crônica granulomatosa.

Objetivou-se avaliar os efeitos da inclusão na ração de 0 ou 8% de fibra em detergente neutro proveniente de feno de gramínea sobre a morfologia dos órgãos digestivos e não digestivos de suínos nas fases de creche e de crescimento-terminação. Foram utilizados suínos mestiços alimentados à vontade com rações isoprotéicas e isoenergéticas, em experimento inteiramente casualizado. Ao final de cada período, os animais foram abatidos e eviscerados. Observou-se que a ração fibrosa promoveu, na creche, aumento do peso do estômago vazio, do intestino grosso e do ceco cheio (expressos em percentual do peso vivo dos animais). Nos animais da fase de crescimento-terminação, registrou-se aumento do peso do trato gastrointestinal cheio e do estômago vazio. O aumento do peso de alguns órgãos digestivos sugere possível adaptação morfológica à presença de ração fibrosa. | This work was targeted to evaluate the effects of including 0 or 8% of neutral detergent fiber from grass hay on the morphology of digestive and non-digestive organs of swine receiving starting or growing-finishing diets. It was employed cross-bred animals fed isoproteic and isoenergetic ad libitum rations in a completely randomized experimental design. At the end of each period, animals were slaughtered and eviscerated. It was detected that the fibrous ration increased the weight of empty stomach, large intestine and filled cecum (as a percentage of live weight) of starting animals. In the growing-finishing animals fibrous ration increased the weights of filled gastrointestinal tract and empty stomach. Higher weights of some digestive organs suggest a possible morphological adaptation to high fiber diets.

Forty two 2-year-old thoroughbreds were examined clinically at intervals of 15 days during their training for the first race to determine the incidence and the predisposing factors of dorsal metacarpal disease. During the first year 25 horses were followed during 2 months and in the second year the follow up was done for 4 months in 17 . Horses' data like gender, average speed, speed exercise work and trainer were also collected. Dorsal metacarpal disease was diagnosed in 28% and 70,6% of the 2 year-old thoroughbreds in the first and second year of the study, respectively. Total incidence was 45%. The incidence and average speed was not affected by gender. The average speed achieved by affected and none affected horses remained between 16 and 18m/s. On 500 and 700m speed exercise, the average speed of affected horses was higher than of none affected ones (p<0,05). Ten out of 19 horses showed dorsal metacarpal disease signs at the distance of 700m. There was significant difference between trainers regarding the incidence of dorsal metacarpal disease and average speed of their horses. 2-year-olds under care of trainers whose horses had the highest incidence o dorsal metacarpal disease also were the fastest one's. Therefore, fast speed associated with longer distances (700m) and trainer are factors that predispose young horses to dorsal metacarpal disease. | Quarenta e dois potros Puro Sangue de Corrida, de 2 anos de idade, foram acompanhados clinicamente a cada 15 dias, durante o treinamento para sua primeira corrida, para determinar a incidência e possíveis fatores pré-disponentes da periostite metacarpiana dorsal. Durante dois meses no primeiro ano (n=25) e quatro meses (n=17) no segundo ano em que foi realizado o acompanhamento dos potros eles foram submetidos a exames físicos para a identificação de sinais clínicos de periostite metacarpiana dorsal. Dados como sexo, velocidade média, distância dos exercícios de velocidade e treinador foram tabulados. No primeiro ano 28% dos potros manifestaram periostite metacarpiana dorsal e no segundo ano este índice foi de 70,6%. Considerando-se todo o período de estudo a incidência foi de 45%. Não houve diferença entre os sexos na manifestação de periostite metacarpiana e velocidade média alcançada. A velocidade média desenvolvida pelos potros que permaneceram sadios e dos que apresentaram periostite metacarpiana se manteve entre 16 e 18 m/s. Nos 500 e 700m a velocidade média dos animais com periostite metacarpiana foi maior (p<0,05). A periostite metacarpiana se manifestou em 10 de 19 potros na distância de 700 m. Houve diferença na incidência de periostite metacarpiana e velocidade média atingida pelos potros de acordo com o treinador. Os potros treinados pelos treinadores que apresentaram maior incidência de periostite metacarpiana foram os mais rápidos. Portanto, fatores que favoreceram a manifestação de periostite metacarpiana foram velocidade média elevada sobre distâncias maiores como os 700m e regime de treinamento preconizado pelos diferentes treinadores.

The aim of this study was to evaluate isolated sheep preantral follicles (PF) after exposure and cryopreservation using glycerol (GLI), ethylene glycol (EG), propanediol (PROH) or dimethyl sulfoxide (DMSO) at 1.5 and 3.0 M. Each ovarian pair from 5 mixed breed adult sheeps was obtained at a local slaughterhouse and submited to follicular isolation. From the obtained suspension, one aliquot was immediately analysed with trypan blue. The remaining suspension was divided in 16 aliquots of 0.9 mL, suspended in (v/v) in MEM+ with EG, DMSO, GLI or PROH at 1.5 or 3.0 M to the toxicity test and cryopreservation. After the end of each treatment, the follicular viability was analysed and the PF were classified as viable if not dyed or not viable if dyed with trypan blue. The analysis of the results showed that after the toxicity test and cryopreservation, using all cryoprotectants and at both concentrations, the percentage of viable PF was significantly reduced when compared to the control. At the toxicity test, when the cryoprotectants were compared at the same concentrations, the lowest percentage of viable preantral follicles was obtained when 3.0 M PROH (38,9%) was used, being, more toxic when compared to the others cryoprotectants. After cryopreservation, significantly higher percentual of viable PF was observed when the EG and DMSO were used. In conclusion, sheep PF can be cryopreserved successfully using DMSO and EG at 1.5 and 3.0 M. | O objetivo deste estudo foi avaliar folículos pré-antrais (FOPA) ovinos isolados após sua exposição e criopreservação utilizando glicerol (GLI), etilenoglicol (EG), propanodiol (PROH) ou dimetilsulfóxido (DMSO) a 1,5 e 3,0 M. Cada par ovariano de 5 ovelhas sem raça definida foi coletado em abatedouro local e submetido ao isolamento folicular. Da suspensão obtida, uma alíquota foi imediatamente destinada à análise da viabilidade folicular com o auxílio do corante vital azul de trypan. O restante da suspensão foi dividida em 16 alíquotas de 0,9 mL, suspensas (v/v) em MEM+ com EG, DMSO, GLI ou PROH a 1,5 ou 3,0 M, para teste de toxicidade e criopreservação. Após o término de cada tratamento, a viabilidade folicular foi analisada e os FOPA considerados viáveis se não corados ou não viáveis, quando corados. A análise dos dados mostrou que após o teste de toxicidade e criopreservação, em todos os crioprotetores e em ambas as concentrações, a percentagem de FOPA viáveis foi significativamente reduzida quando comparada ao controle. No teste de toxicidade, quando os crioprotetores foram comparados entre si nas mesmas concentrações, foram observadas percentagens significativamente menores de FOPA viáveis no PROH 3,0 M (38,9%), apresentando-se, portanto, mais tóxico quando comparado aos demais crioprotetores. Após criopreservação, obteve-se percentagens significativamente maiores de folículos pré-antrais viáveis quando o EG e o DMSO foram utilizados. Em conclusão, FOPA ovinos isolados podem ser criopreservados com sucesso utilizando-se DMSO e EG a 1,5 e 3,0 M.

The detection of infected animals is one of the main factors involved in tuberculosis control and, with some variations, is performed through intradermal tuberculin tests. Nevertheless, skin test-negative animals may be infected and represent an important threat to bovine tuberculosis eradication programs. Despite this well-known phenomenon, ELISA testing did not become a routine in tuberculosis control programs. Our purpose was to describe field applications of ELISA in the detection of anergic animals in Rio de Janeiro, Brazil. From 18 herds involved on a tuberculosis control program, two presented skin test-negative infected animals what have delayed and compromised the success of the program, with severe economic losses. Infection in those animals was identified through ELISA and confirmed by isolation of M. bovis from lung lesions. Therefore they were considered to be the most probable source of continuing infection and responsible for the maintenance of the disease in their herds. Without the use of serological tests as ELISA those cows would probably stay in their herds perpetuating the disease and the eradication of the disease in those herds would become impossible. In conclusion, we suggest the use of ELISA as a valuable complementary tool in order to identify possible anergic cows that may be acting as reservoirs of the agent in the herd. | A detecção de animais infectados é um dos mais importantes fatores envolvidos no controle da tuberculose e, com algumas variações, é realizado através de testes intradérmicos de tuberculinização. No entanto, animais negativos aos testes intradérmicos podem estar infectados e representam uma importante ameaça aos programas de erradicação da tuberculose. Apesar deste conhecido fenômeno, o uso de ELISA não é rotina nestes programas. Nosso objetivo foi o de descrever experiências do uso a campo de ELISA na detecção de animais anérgicos no Rio de Janeiro, Brasil. Dentre 18 rebanhos envolvidos em um programa de controle da tuberculose, dois apresentaram animais infectados negativos aos testes intradérmicos, o que atrasou e comprometeu o sucesso do programa, com severas perdas econômicas. A infecção nestes animais foi identificada através de ELISA e confirmada pelo isolamento de M.bovis nas lesões pulmonares. Desta forma foram considerados como a mais provável fonte de infecção e responsáveis pela manutenção da enfermidade nos rebanhos. Sem o uso de testes sorológicos como ELISA estes animais provavelmente permaneceriam nos rebanhos perpetuando a infecção e a erradicação da enfermidade seria impossível. Em conclusão, sugere-se o uso de ELISA como uma valiosa ferramenta complementar para identificar animais anérgicos que possam atuar como reservatórios do agente nos rebanhos.

The frequency of anti-Neospora caninum IgG antibodies was studied in 415 serum samples from owned and stray dogs from Salvador and Lauro de Freitas counties. The Indirect immunofluorescence was performed using a cut-off of 1:50. Anti-N. caninum IgG antibodies were detected in 13.3% (22/165) owned dogs and in 11.2% (28/250) stray dogs. The frequencies of males and females seropositivity were 8.0% (6/75) and 18.4% (14/76) for owned dogs and 12.6 % (17/135) and 9.6% (11/115) in the stray dogs population, respectively. There were not a statistical significant difference between sex, age, breed and the dogs anti-N. caninum IgG antibodies incidence. | A freqüência de anticorpos IgG anti-Neospora caninum foi estudada em 415 amostras séricas de cães domiciliados e errantes, procedentes dos municípios baianos de Salvador e Lauro de Freitas, utilizando-se a técnica de imunofluorescência indireta, com ponto de corte igual a 1:50. Anticorpos da classe IgG anti-N. caninum foram detectados em 13,3% (22/165) dos cães domiciliados e em 11,2% (28/250) dos errantes. As freqüências de soropositivos machos e fêmeas foram 8,0% (6/75) e 18,4% (14/76) nos cães domiciliados e 12,6% (17/135) e 9,6% (11/115) nos errantes, respectivamente. Não houve diferenças estatisticamente significativas entre sexo, idade, raça e a freqüência de soropositividade ao N. caninum dos cães domiciliados e errantes.

O Centro de Resgate de Mamíferos Aquáticos (CRMA) tem trabalhado desde 1999 com o resgate e a reabilitação de cetáceos e pinípedes em situação de encalhe no litoral do Estado da Bahia. O presente trabalho objetiva apresentar e avaliar os resultados de hemogramas e dosagens séricas de alanina aminotranferase (ALT), aspartato aminotransferase (AST) e creatinina realizados em um exemplar de elefante-marinho-do-sul, Mirounga leonina (LINNAEUS, 1758), encontrado no dia 11 de fevereiro de 2002 na praia da Barra, litoral de Salvador, BA. Tratava-se de um filhote macho, com 137cm de comprimento e peso aproximado de 49kg, com estado nutricional debilitado, um ferimento no lado direito na altura da escápula. O exemplar permaneceu em acompanhamento clínico por 56 dias, sendo vermifugado com Febendazole, o ferimento suturado e tratado com álcool iodado, Nitrofurazona solução e Tartarato de Ketanserina, simultaneamente com Enrofloxacina 10%, Potenay®, Complexo B e Benerva®. No dia 16 seguinte apresentou um quadro de conjuntivite unilateral direita, sendo tratado até o final de sua estadia com pomada oftálmica à base de Cloridrato de Cloranfenicol. Durante este período colheu-se um total de seis amostras de sangue, sendo três para a realização de hemograma e as demais para dosagem de ALT, AST e creatinina. De acordo com os resultados dos eritrogramas o filhote desenvolveu um quadro de anemia, classificada como microcítica e normocrômica. Com relação aos leucogramas, destacou-se linfopenia, eosinopenia e monocitopenia, possivelmente influenciado pelas condições de estresse e o manejo. Constatou-se nos exames bioquímicos valores diminuídos para a AST e creatinina, porém não representando a existência de um quadro patológico de significância clínica. | Since 1999 the Aquatic Mammals Rescue Center - AMRC has been working in the rescue and rehabilitation of stranded cetaceans and pinnipeds on the coast of Bahia, Brazil. This paper presents and analyses the blood cells count and clinical chemistry of alanine aminotransferase (ALT), aspartate aminotransferase (AST) and creatinine of a southern elephant seal, Mirounga leonina (LINNAEUS, 1758), found on February the 11th at Barra Beach, Salvador, BA. The specimen was an orphan male calf, with 137cm of length and estimated weight of 49kg. It presented bad nutritional conditions and a shark bite on the right shoulder area. Clinical management was performed for 56 days, anthelmintic Febendazole was utilized, and the bite was treated with iodined alcohol, Nitrofurazone solution and Kethanserin, simultaneously with Enrofloxacin 10%, Potenay®, Vitamin B Complex and Benerva®. On the 16th the animal presented a right unilateral conjuntivitis, treated with Cloranphenicol oftalmic pomade until the end of its stay in the captive. During this period a total of six blood samples were collected, three for total blood counts and the others for the biochemistry determination of ALT, AST and creatinine. According to the haematological analysis the seal developed an anaemia which was classified as microcytic and normochromic. Lymphopenia, eosinopenia and monocytopenia were also observed, possibly due to its handling and stress conditions. The clinical chemistry presented low values for AST and creatinine, although this did not represent the existence of any pathologic context or disease with clinical significance.