p. 232-236 | In this study, transplacental transmission of Neospora caninum in bitches at different stages of pregnancy was evaluated. Three bitches were inoculated in the 3rd week and three in the 6th week of gestation with 108 tachyzoites of N. caninum (Nc-1 strain). All the infected bitches and at least one of their offspring presented anti-N. caninum antibodies according to the indirect fluorescent antibody test (IFAT > 400). The pups and their mothers were sacrificed and tissues from the central nervous system (CNS), popliteal lymph nodes, skeletal muscle, brain, lungs, heart and liver were analyzed for the presence of N. caninum using the nested polymerase chain reaction (nested PCR), restriction fragment length polymorphism (RFLP) and immunohistochemistry (IHC). The parasite was found in the pups in lymph node, CNS, heart and liver tissues using nested PCR. There was no difference in perinatal mortality between the offspring from bitches infected in the 3rd week of gestation (60%) and in the 6th week (53.8%).

ABSTRACT. Camargo M.G., Sá F.A., Kluck G.E.G., Coutinho-Rodrigues C.J.B., Perinotto W.M.S., Angelo I.C., Gôlo P.S., Quinelato S., Albuquerque J.M.L. & Bittencourt V.R.E.P. [Interaction among Scopulariopsis brevicaulis, Metarhizium anisopliae and Rhipicephalus microplus under laboratory conditions]. Interação entre Scopulariopsis brevicaulis, Metarhizium anisopliae e Rhipicephalus microplus em condições de laboratório. Revista Brasileira de Medicina Veterinária, 34(Supl. 1):60-65, 2012. Departamento de Parasitologia Animal, Universidade Federal Rural do Estado do Rio de Janeiro, BR 465, Km 7, Seropédica, RJ 23890-000, Brasil. E-mail: vaniabit@ufrrj.br Rhipicephalus microplus is the one of the most important cattle ectoparasites causing great concerns for the Brazilian breeders. As an alternative to the chemical acaricides, biological control has been increasingly studied. The present study aimed to evaluate a possible interaction among Scopulariopsis brevicaulis, Metarhizium R. microplus ticks, by testing if a possible S. brevicaulis maternal transmission would contribute for a better comprehension about the fungal infection physiopathology. R. microplus females were previously immersed in different concentrated suspensions of S. brevicaulis and the posterior virulence levels of Metarhizium anisopliae sensu lato (s.l.) were analyzed on larvae from eggs of these S. brevicaulis-treated females. S. brevicaulis virulence against larvae and eggs were also evaluated; although there were no significant alterations in the hatching percentage as well as in the larval mortality (89.8% ± 1.6 and 1% ± 0.1 respectively). Results on virulence of the entomopathogenic fungus showed a reduced mortality of larvae from eggs of ticks’ females previously treated with S. brevicaulis when larvae were immersed in M. anisopliae s.l. 105 conidia ml-1. Therefore, S. brevicaulis was not pathogenic for R. microplus, although this fungus was able to reduce the mortality of larvae treated with low concentrations of M. anisopliae s.l. | Rhipicephalus microplus é um ectoparasita causador de grandes prejuízos à pecuária brasileira. Como alternativa a acaricidas químicos, o controle biológico tem sido cada vez mais estudado. O presente trabalho objetivou a avaliação de uma possível interação entre Scopulariopsis brevicaulis, Metarhizium anisopliae e R. microplus em relação à patogenicidade destes fungos e a possível transmissão vertical contribuindo para um melhor conhecimento da fisiopatologia da infecção por estes fungos. Para testar a ação patogênica, ovos e larvas foram imersos em suspensões de diferentes concentrações de S. brevicaulis. A capacidade de transmissão vertical foi avaliada através do tratamento de fêmeas com diferentes concentrações S. brevicaulis, utilizadas para obtenção de larvas, que foram posteriormente expostas a diferentes concentrações de Metarhizium anisopliae sensu lato (s.l.). Na avaliação da patogenicidade não houve alteração significativa nos percentuais de eclosão e mortalidade de larvas (com médias de 89,8 ± 1,6%, e 1 ± 0,1%, respectivamente). Já na avaliação da transmissão vertical, foi observada redução da mortalidade na concentração de 105 conídios/mL de M. anisopliae s.l. sobre larvas oriundas de fêmeas expostas a S. brevicaulis. Desta forma, S. brevicaulis não se mostrou patogênico a R. microplus, porém esse fungo foi capaz de promover diminuição da mortalidade de larvas tratadas com baixa concentração de M. anisopliae s.l. 

ABSTRACT. Perinotto W.M.S., Angelo I.C., Gôlo P.S., Camargo M.G., de Sá F.A., Monteiro C.M.O., Coutinho-Rodrigues C.J.B., Quinelato S., Marciano A.F. & Bittencourt V. R.E.P. [Efficiency of Beauveria bassiana Commercial Formulation in control of Rhipicephalus microplus under laboratory conditions]. Eficiência de uma formulação comercial de Beauveria bassiana no controle de Rhipicephalus microplus em condições laboratoriais. Revista Brasileira de Medicina Veterinária, 34(Supl. 1):95-101, 2012. Departamento de Parasitologia Animal, Instituto de Veterinária, Universidade Federal Rural do Estado do Rio de Janeiro, BR 465, Km 7, Seropédica, RJ 23897-970, Brasil. E-mail: vaniabit@ufrrj.br Rhipicephalus microplus is an ectoparasite that owns both veterinary and economical importance. The control of this ectoparasite is made mainly with chemical products, that when used indiscriminately result in the development of resistant strains as well as environmental and animal products contamination. Fungal formulations have became an alternative method increasingly viable to control ticks. Accordingly, the present study aimed test the effectiveness of Boveril® WP (Wettable Powder) on R. microplus eggs, larvae and engorged females, using both different formulations (water and oil-based) and different conidial concentrations. The effect of Boveril®on engorged females was evaluated based on the following biological parameters: weight of eggs, egg production index and nutritional index. Nine groups, with ten repetitions each, were formed: aqueous control (CTR), oil (OL) CTR 0.5%, OL CTR 10%, aqueous Boveril®(Bb) 107 , OL Bb 107 0.5%, OL Bb 107 10%, aqueous Bb 108 , OL Bb 108 0.5% and OL Bb 108 10%. Females, eggs or larvae were immersed in one ml of conidial suspention for 3 minutes. Obtained results showed that the commercial product was effective on all R. microplus ticks stages, although the higher conidial concentration and the higher oil percentage have yielded the best results. Therefore, R. microplus eggs, larvae and engorged females are susceptible to Boveril®. This is the first report on the efficacy of a comercial product (Boveril®) to control R. microplus ticks. | Rhipicephalus microplus é um ectoparasita que apresenta grande importância veterinária e econômica. O controle deste carrapato é realizado com produtos químicos, cujo uso indiscriminado vem ocasionando o desenvolvimento de cepas resistentes e contaminação do meio ambiente e dos produtos de origem animal. A utilização de formulações fúngicas torna-se um método alternativo cada vez mais viável. Sendo assim, o presente estudo teve como objetivo testar a eficácia de Boveril® WP (pó molhável) sobre ovos, larvas e fêmeas ingurgitadas de R. microplus, utilizando diferentes formulações (aquosa e oleosa) e concentrações conidiais. Para avaliar o efeito de Boveril® sobre as fêmeas ingurgitadas de R. microplus foram observados os parâmetros reprodutivos peso da postura, índice de produção de ovos e índice nutricional. Para realização deste estudo, foram formados nove grupos (CTR Aquoso, CTR OL 0,5% e CTR OL 10% Bb 107 aquoso, Bb 107 OL 0,5%, Bb 107 OL 10%, Bb 108 aquoso, Bb 108 OL 0,5% e Bb 108 10%) com 10 repetições cada. O tratamento consistiu na imersão dos espécimes em um ml da suspensão testada durante três minutos. A partir da análise dos dados observou-se que o produto comercial foi eficaz sobre todos os estágios de R. microplus, porém as maiores concentrações conidiais contendo maior percentual de óleo demonstraram os melhores resultados. Logo, ovos, larvas e fêmeas ingurgitadas de R. microplus são susceptíveis ao produto comercial Boveril®. Este é o primeiro relato da eficácia do produto comercial Boveril® para o controle de R. microplus.

The article describes the first occurrence of hepatic coccidiosis in catfish of the species Brachyplatystoma vaillantii, captured in the coastal region of the Vigia city, state of Pará, Brazil, caused by species of the genus Calyptospora, family Calyptosporidae. Thirty specimens of piramutabas were examined where 60% were infected with liver location, featuring numerous mature and immature oocysts, grouped or isolated, with four sporocysts in pyriform shape. They were described on their morphology and dimensions of the oocysts and sporocysts, obtained from light microscopy and differential interference contrast. | O artigo descreve a primeira ocorrência de coccidiose hepática em bagres da espécie Brachyplatystoma vaillantii, capturados na região costeira do Município de Vigia, Estado do Pará, Brasil, causada por espécies do gênero Calyptospora, família Calyptosporidae. Foram examinados trinta exemplares de piramutabas, dos quais 60% encontravam-se parasitados com localização hepática, apresentando vários oocistos maduros e imaturos, agrupados ou isolados, com quatro esporocistos de formato piriforme. São descritas as características morfológicas e dimensões dos oocistos e esporocistos, obtidas a partir de microscopia de luz em campo claro e em contraste interferencial de fases.

O aumento na incidência da Leishmaníase Visceral (LV) no Brasil deve-se à ineficácia das medidas de controle da doença. Além disso, não há tratamento efetivo para LV canina com drogas sintéticas. Assim, o objetivo deste trabalho foi avaliar o efeito dos óleos essenciais de Coriandrum sativum e de Lippia sidoides e do óleo-resina de Copaiferareticulata sobre promastigotas e amastigotas de Leishmania chagasi e analisar o grau de toxicidade sobre células monocíticas murinas RAW 264.7. Para determinar a CI50 sobre promastigotas foi usado teste MTT (brometo de 3-[4,5-dimetil-tiazol-2-il]-2,5-difeniltetrazólio) e sobre amastigotas foi realizado imunoensaio in situ pela técnica de ELISA. Os resultados obtidos comprovaram que o óleo-resina de C. reticulata foi o mais eficaz contra as formas promastigotas (CI50 de 7,88 µg.mL-1) e amastigotas (CI50 de 0,52 µg.mL-1) e em nenhum dos dois testes diferiu do controle pentamidina que obteve CI50 de 2,149 µg.mL-1, no teste sobre promastigotas, e anfotericina B que obteve CI50 de 9,754 µg.mL-1, nos testes com amastigotas (p > 0.05). Quanto à citotoxicidade apenas o óleo-resina não apresentou toxicidade com 78,45% de monócitos viáveis. Os resultados obtidos sobre promastigotas e amastigotas e a ausência de citotoxicidade do óleo-resina de C. reticulata evidenciam que este óleo-resina pode ser viável para a análise de seus efeitos terapêuticos em testes in vivo. | The increased incidence of visceral leishmaniasis (VL) in Brazil is due to a lack of effective disease control measures. In addition to that, no effective treatment exists for canine VL in response to synthetic drugs. Thus, the objective of this study was to evaluate the effect of the essential oils of Coriandrum sativum and Lippia sidoides, and oleoresin from Copaifera reticulata, on Leishmania chagasi promastigotes and amastigotes. We also examined the toxicity of these treatments on the murine monocyte cell line RAW 264.7. To determine the IC50 a MTT test (3-(4,5-Dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide) was performed on promastigotes, and an in situ ELISA assay was conducted on amastigotes. Here, we demonstrate that oleoresin from C. reticulata was effective against both promastigotes (IC50 of 7.88 µg.mL-1) and amastigotes (IC50 of 0.52 µg.mL-1), and neither of the two treatments differed significantly (p > 0.05) from pentamidine (IC50 of 2.149 µg.mL-1) and amphotericin B (IC50 of 9.754 µg.mL-1). Of the three plant oils tested, only oleoresin showed no toxicity toward monocyte, with 78.45% viability after treatment. Inhibition of promastigote and amastigote growth and the lack of cytotoxicity by C. reticulata demonstrate that oleoresin may be a viable option for analyzing the in vivo therapeutic effects of leishmanicidal plants

A importância do cão como reservatório de L. infantum chagasi no meio urbano tem estimulado a realização de inúmeros trabalhos de avaliação de técnicas de diagnóstico, uma vez que este procedimento, quando realizado corretamente, torna-se um importante passo na prevenção da doença em humanos. Dentre os métodos de diagnóstico, as técnicas moleculares têm adquirido destaque. Objetivou-se neste trabalho verificar o desempenho da Reação em Cadeia da Polimerase (PCR) e da PCR em tempo real (qPCR) para diagnóstico da Leishmaniose Visceral Canina (LVC) utilizando diferentes amostras biológicas. Para tanto foram utilizados 35 cães provenientes de uma área endêmica para LVC, onde foram utilizados para o diagnóstico molecular, aspirado de medula óssea, fragmentos de linfonodo e baço. Neste estudo a qPCR foi capaz de detectar um maior número de animais positivos quando comparada com a PCR. Já entre as diferentes amostras biológicas utilizadas não foi observada diferença significativa na detecção de DNA de L. infantumchagasi por meio da PCR e qPCR. Mesmo assim, considerando a facilidade de obtenção, o linfonodo pode ser considerada como a melhor amostra para diagnóstico molecular da infecção por L. infantum chagasi. | The importance of dogs as a reservoir for Leishmania infantumchagasi in urban environments has stimulated numerous studies assessing diagnostic techniques. When performed properly, such procedures are an important step in preventing leishmaniasis in humans. Molecular methods have become prominent for this purpose. The aim of the present study was to determine the performance of the polymerase chain reaction (PCR) and real-time PCR (qPCR) for diagnosing of canine visceral leishmaniasis (CVL) using different biological samples. For this, 35 dogs from an area endemic for CVL were used. Bone marrow aspirate and lymph node and spleen fragments from these dogs were used for the molecular diagnosis. In the present study, qPCR was able to detect a greater number of positive animals than seen with PCR. Among the different biological samples used, there was no significant difference in L. infantumchagasi DNA detection between PCR and qPCR. However, considering that lymph nodes are easy to acquire, these can be considered to be the best samples for making molecular diagnoses of L. infantum chagasi infection.

O objetivo do presente estudo, foi determinar a presença de Tritrichomonas foetus em dois rebanhos leiteiros no Altiplano Cundiboyacense. De vacas com um histórico de problemas reprodutivos, foram avaliados 21 lavados uterinos de pequeno volume, em dois rebanhos leiteiros localizados nos municípios de Sibaté (Cundinamarca) e Ventaquemada (Boyacá). No primeiro rebanho, 10 vacas foram amostradas e no segundo 11, baseado em três critérios de inclusão. Os lavados uterinos foram obtidos mediante infusão de solução salina fisiológica no corpo do útero. As amostras foram centrifugadas e semeadas em meio de cultura básico para Tritrichomonas por 10-15 dias a 37 ºC. Os protozoários foram avaliados no dia da colheita de amostras e 10 e 15 dias após incubação por meio de visualização direta sob um microscópio de campo escuro. As amostras positivas foram coradas com Wright e Lugol para identificar as características morfológicas. Este estudo mostrou que T. foetus estava presente em 61,8% dos animais amostrados. A determinação de que T. foetus estava presente em 61,8% das amostras analisadas é um achado significativo, dado que nos rebanhos avaliados, esse agente não tinha sido previamente diagnosticado. | The aim of this study was to determine the presence of Tritrichomonasfoetus in two dairy herds on the Altiplano Cundiboyacense. Twenty-one low-volume uterine lavages from cows with a history of reproductive problems in two dairy herds located in the municipality of Sibaté (Cundinamarca) and Ventaquemada (Boyacá) were evaluated. In the first herd, 10 cows were sampled and in the second, 11 cows, based on three inclusion criteria. The uterine lavages were obtained through infusion of physiological saline solution into the uterine body. The samples were centrifuged and seeded in Tritrichomonas basal medium for 10-15 days at 37 ºC. The protozoa were evaluated on the day of sampling and 10 and 15 days after incubation by means of direct viewing under a dark-field microscope. Positive samples were stained with Wright and Lugol to identify the morphological characteristics. This study showed that T. foetus was present in 61.8% of the animals sampled. The determination that T. foetus was present in 61.8% of the samples analyzed is a significant finding given that in the herds evaluated, this agent had not previously been diagnosed.

A prevalência das infecções parasitárias e em particular, aquelas causadas por ectoparasitos, pode influenciar na biologia e ecologia das aves silvestres. O objetivo do estudo foi investigar a ocorrência e identificar as espécies de carrapatos coletadas em aves silvestres capturadas no campus da Universidade Federal Rural do Rio de Janeiro. As aves foram coletadas em rede-de-neblina durante o período de outubro de 2009 a dezembro de 2010. No total foram capturadas 223 aves representadas por 53 espécies, 19 famílias em 9 ordens. Parasitismo por formas imaturas de carrapatos, foram encontradas em 19 aves (n = 7 espécies) correspondendo a uma prevalência de 8,5%. Foram coletados 44 carrapatos onde 23 estavam em estágio de ninfa e 21 em estágio de larva. Houve associação entre o parasitismo por carrapatos e aves não Passeriformes e entre o parasitismo e aves de hábitos terrestres capturadas, que se deu possivelmente pela presença (ou inclusão da captura) de Vanellus chilensis (Charadriiforme: Charadriidae). Todas as ninfas coletadas foram identificadas como Amblyomma cajennense. De modo geral, devemos ressaltar que aves silvestres da área estudada podem exercer papel de dispersoras, ainda que não preferenciais, para estágios imaturos de A. cajennense. | The prevalence of parasitic infections, particularly those caused by ectoparasites, may influence the biology and ecology of wild birds. The aim of this study was to investigate occurrences and identify the species of ticks collected from wild birds caught on the campus of the Federal Rural University of Rio de Janeiro. The birds were caught using mist nets between October 2009 and December 2010. In total, 223 birds were caught, represented by 53 species and 19 families in nine orders. Nineteen birds (n = 7 species) were parasitized by immature ticks (prevalence of 8.5%). Forty-four ticks were collected, of which 23 were nymphs and 21 were larvae. There were associations between parasitism by ticks and non-Passeriformes birds, and between parasitism and ground-dwelling birds, which was possibly due to the presence (or inclusion among the captured birds) of Vanellus chilensis (Charadriiformes: Charadriidae). All the nymphs collected were identified as Amblyomma cajennense. In general terms, we must emphasize that wild birds in the study area may play the role of dispersers for the immature stages of A. cajennense, albeit non-preferentially.

Rangelia vitalii is a protozoon that causes diseases in dogs, and anemia is the most common laboratory finding. However, few studies on the biochemical changes in dogs infected with this protozoon exist. Thus, this study aimed to investigate the biochemical changes in dogs experimentally infected with R. vitalii, during the acute phase of the infection. For this study, 12 female dogs (aged 6-12 months and weighing between 4 and 7 kg) were used, divided in two groups. Group A was composed of healthy dogs (n = 5); and group B consisted of infected animals (n = 7). Blood samples were collected on days 0, 10, 20 and 30 after infection, using tubes without anticoagulant to obtain serum and analyze the biochemical parameters. An increase in alanine aminotransferase (ALT) on day 20 (P < 0.05) was observed. Also, increased creatine kinase (CK) and aspartate aminotransferase (AST) levels were observed throughout the experimental period (P < 0.05). No changes in the serum gamma-glutamyltransferase, urea and creatinine levels were observed. Thus, is possible to conclude that experimental infection with R. vitalii in dogs causes changes to the biochemical profile, with increased ALT, AST and CK enzyme levels. | Rangelia vitalii é um protozoário que causa doença em cães, sendo a anemia o achado laboratorial mais frequente. No entanto, existem poucos estudos sobre as alterações bioquímicas em cães infectados com o protozoário. Assim, este estudo tem como objetivo investigar as alterações bioquímicas de cães experimentalmente infectados com R. vitalii na fase aguda da infecção. Para o estudo, foram utilizados 12 cães fêmeas (com idade entre 6 a 12 meses e peso entre 4 a 7 kg), divididos em dois grupos. O grupo A (n = 5) foi composto de animais saudáveis e o grupo B (n = 7) de animais infectados. Amostras de sangue foram coletadas nos dias zero, dez, vinte e trinta PI, utilizando tubos sem anticoagulante para obtenção de soro e análise dos parâmetros bioquímicos. Foi observado um aumento na alanino aminotransferase (ALT) no dia 20 PI (P < 0,05) e aumento na creatinoquinase (CK) e aspartato aminotransferase (AST) em todo o período experimental (P < 0,05). Não foram observadas alterações séricas na gama-glutamiltransferase, uréia e creatinina. Portanto, é possível concluir que a infecção experimental por R. vitalii causa alterações no perfil bioquímico, com aumento na ALT, CK e AST.

Avaliou-se a ocorrência de Leishmania infantum em cães do município de Palmas-TO, comparando dados diagnósticos obtidos pela Reação em Cadeia da Polimerase (PCR) e pelo diagnóstico parasitológico. Foram coletadas amostras de sangue e de aspirado de linfonodo de 63 cães machos e fêmeas, várias idades e raças, domiciliares ou não de agosto de 2009 a junho de 2010. As lâminas contendo esfregaço dos aspirados de linfonodos foram coradas pelo corante Giemsa. Na PCR, a sequência alvo de 145 pb do fragmento LT1, situado no minicírculo do kDNA do grupo Leishmania donovani, foi detectada através dos oligonucleotídeos iniciadores RV1 e RV2. O teste χ² (Qui-quadrado), demonstrou haver relação significativa entre a sintomatologia e a positividade dos cães para Leishmaniose Visceral (LV). O exame parasitológico mostrou uma concordância de 66,7% com a PCR em sangue e 84,1% com a PCR de aspirado de linfonodo. Além destas análises, houve a avaliação dos diagnósticos em paralelo e em série, onde as concordâncias com o exame parasitológico foram de 76,2% e 74,6%, respectivamente. Os resultados permitem sugerir a utilização da PCR de linfonodos na avaliação de grandes populações (inquéritos), e o exame parasitológico para a avaliação clínica inicial em consultórios veterinários. | This study evaluated occurrences of Leishmania infantum in dogs in the municipality of Palmas, Tocantins, comparing diagnostic data obtained using the polymerase chain reaction (PCR) and parasitological diagnosis. Blood samples and lymph node aspirates were collected from 63 dogs of males and females and various ages and races, with or without owners, between August 2009 and June 2010. Slides containing smears of lymph node aspirates were stained with Giemsa stained. In PCR, the 145 bp target sequence of the LT1 fragment, located in the Leishmania donovani kDNA minicircle was detected using the RV1 and RV2 oligonucleotide primers. The chi-square test revealed that there was a significant relationship between the symptoms and dogs that were positive for visceral leishmaniasis (VL). The parasitological investigation showed concordance of 66.7% with PCR on blood and 84.1% with PCR on lymph node aspirate. In addition to these tests, evaluations of the diagnoses in parallel and in series were conducted, which showed concordances with the parasitological test of 76.2% and 74.6%, respectively. The results make it possible to suggest that PCR on lymph nodes should be used in evaluating large populations (surveys) and that the parasitological test should be used for initial clinical evaluations in veterinary consultation offices.