PCR - specific detection of a plum pox virus (PPV) isolate in Chile
1996
Rosales V, Marlene | Hinrichsen R, Patricio | Herrera M, Guido (Instituto de Investigaciones Agropecuarias, Santiago (Chile). Centro Regional de Investigacion La Platina)
Español; castellano. El virus plum pox (PPV Potyvirus) es el agente causal de la enfermedad de Sharkas. Este virus ataca severamente arboles frutales de carozo, donde usualmente se encuentra en muy bajos titulos e irregularmente distribuido en diferentes tejidos de la planta. Hasta ahora, PPV estaba restringido a Europa y la parte norte de Africa, pero el virus fue detectado por primera vez fuera de esa region, en Chile (Acuna, 1993), en el Campo Experimental Los Tilos del INIA (Santiago). Considerando la importancia crucial de esta enfermedad, se hace necesario contar con una tecnica de deteccion de alta sensibilidad para controlar su dispersion. En este trabajo se presenta la optimizacion de un metodo de deteccion basado en la reaccion de la polimerasa en cadena (PCR), lograndose la amplificacion especifica de un fragmento del genoma viral. A partir del RNA viral presente en un extracto crudo de hojas o frutos, se preparo cDNA correspondiente al extremo 3' del virus. Este cDNA sirvio de templado en una reaccion de PCR, usando partidores que reconocen y se alinean en secuencias especificas del extremo 3' del genoma viral. Con este procedimiento se amplifico un fragmento de 243 bp, correspondiente a la region carboxi-terminal del gen de la proteina de cubierta viral (partidores de CP) y un fragmento de 220 bp de la region 3'-no codificante del genoma de PPV (partidores de 3'-NCR). La amplificacion de estos fragmentos de ADN permitio la deteccion especifica del virus en 24 muestras, de un total de 28, en su mayoria sero-positivas frente a un anticuerpo policional anti-PPV, aunque solo un 36% de estas muestras presentaban sintomas visuales de la enfermedad
Mostrar más [+] Menos [-]Palabras clave de AGROVOC
Información bibliográfica
Este registro bibliográfico ha sido proporcionado por Instituto de Investigaciones Agropecuarias