[Determination of rabies virus, using RFLP] | Determinacion de la especie transmisora del virus de la rabia mediante analisis del genoma viral por RFLP

Español; castellano. El establecimiento de medidas adecuadas de control de la rabia en una zona geografica, dependera de poder determinar con precision cuales son el o los vectores de la enfermedad en ese lugar. Cuando el aislamiento del virus se efectua a partir de especies como el ser humano o los bovinos que se consideran fondo de saco epidemiologicos, por no transmitir la enfermedad en forma activa, en ocasiones no se conoce cual fue la especie responsable de la infeccion. El objetivo de este trabajo fue el de establecer las condiciones metodologicas en Mexico, para llevar a cabo la tecnica del polimorfismo del largo de los fragmentos de restriccion (RFLP) en el genoma de diferentes aislados de rabia, a fin de poder determinar la especie transmisora del virus. Se trabajaron 40 muestras de diferentes especies (domesticas y silvestres) y regiones geograficas de Mexico, a las cuales se les extrajo el RNA con fenol-cloroformo, se obtuvo el DNA complementario (cDNA) mediante la enzima transcriptasa reversa y este se amplifico mediante PCR usando un iniciador de 22 pb dirigido contra una region hipervariable del genoma viral llamada pseudogen, situada entre los cistrones G y L. Los amplicones se expusieron a 4 endonucleasas. Con base en los patrones obtenidos se determino que de las 40 muestras 21 presentaban el patron de digestion que correspondio a ciclo terrestre, 5 a ciclo aereo (murcielago), 3 hipervariables (es decir ninguna de las enzimas de restriccion usadas digirio su material genetico), y 5 de los aislamientos no amplificaron. Se concluye que RFLP es una herramienta molecular valiosa, ya que distingue con un alto porcentaje (90%) entre los principales ciclos epidemiologicos que estan presentes en el pais.