Effect of growth factors on proliferation, apoptosis and protein kinase A expression in cultured porcine cumulus oophorus cells | Effets des facteurs de croissance sur la prolifération, l'apoptose et l'expression de la protéine kinase A des complexes " cumulus-ovocyte " de porc en culture

Francés. Des complexes " cumulus-ovocyte " de porc (COC) ont été mis en culture en présence d'IGF-I, IGF-II, EGF (10 ng/mL de milieu). Leurs effets sur la prolifération cellulaire, l'apoptose et la protéine kinase A (PKA) ont été évalués par immuno-cytochimie à l'aide d'anticorps spécifiques dirigés contre PCNA, TUNEL et les sous-unités catalytique (C-alpha) et régulatrice (RI) de PKA. En milieu témoin, les cellules des COC montrent une diminution de prolifération (de 51 à 31 / de cellules PCNA positives, p 0,05). Avec IGF-I ou EGF dans le milieu, on constate au contraire une augmentation de la prolifération par comparaison aux niveaux de départ (64 et 67 / respectivement, p 0,001). Pendant la culture, les cellules apoptotiques (TUNEL-positives) ont augmenté de 42 à 57 / (p 0,01) ce qui est inhibé par l'addition d'IGF-I ou d'EGF (36 et 12 / des témoins respectivement, p 0,001). IGF-II et EGF ont réduit de façon significative les quantités de la sous-unité catalytique de PKA (cellules immuno-détectables pour cette sous-unité : 28 et 27 / respectivement par comparaison aux témoins 41 /, p 0,05) alors que l'effet d'IGF-I n'a pas été significatif (31 /). EGF a provoqué une augmentation de la sous-unité régulatrice de PKA (51 / versus 29 / chez les témoins, p 0,05) alors que IGF-I et IGF-II ont été sans effet sur cette dernière (30 et 29 / respectivement). Nos observations montrent que les cellules de COC de porc ont une activité de prolifération en diminution et une apoptose en augmentation lorsqu'elles sont cultivées pendant 40 h. IGF-I et EGF peuvent stimuler la prolifération et inhiber l'apoptose. L'influence de ces facteurs de croissance sur PKA suggère que cAMP/PKA peut être un médiateur de ces facteurs sur ces types cellulaires. Les effets différenciés des IGFs et de l'EGF sur les sous-unités de PKA peuvent indiquer des différences de leurs modes d'action