[5'TaqMan PCR for pork detection and quantification in experimental meat mixtures] | 5'TaqMan PCR para la detección y cuantificación de cerdo en mezclas cárnicas experimentales
Rodríguez, M.A. | García Lacarra, T. E-mail:[email protected] | González, I. | Hernández, P.E. | Martín, R.(Universidad Complutense de Madrid (España). Facultad de Veterinaria)
Español; castellano. En este artículo se presenta una técnica de PCR cuantitativo en tiempo real, diseñada en el gen mitocondrial 125 ARN ribosómico (ARNr), para llevar a cabo la cuantificación de cerdo (Sus scrofa) en mezclas binarias de cerdo/vaca. El método combina el uso de cebadores específicos de cerdo, que amplifican un fragmento de 411 pb en el ADN de cerdo, junto a cebadores específicos de mamíferos, que se emplean como control endógeno y amplifican un fragmento de 425-428 pb en el ADN de mamíferos. Para monitorizar la amplificación del gen diana, se ha utilizado una sonda fluorogénica (Taqman) que hibrida tanto en el sistema de PCR "específico de cerdo" como en el "control endógeno de mamíferos". La comparación del número de ciclo (C sub(t)) en el que se detectan los productos de PCR de mamíferos y específico de cerdo, en combinación con el empleo de estándares con concentraciones de cerdo conocidas, permitió determinar el porcentaje de cerdo en las mezclas. El análisis de mezclas binarias experimentales cerdo/vaca demostró la especificidad y sensibilidad del ensayo para conseguir la detección y cuantificación de cerdo en el intervalo comprendido entre 0,5-5%.
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Información bibliográfica
Este registro bibliográfico ha sido proporcionado por Instituto Nacional de Investigación y Tecnología Agraria y Alimentaria