Recobrado de Pseudomonas syringae pv. tabaci a partir de semillas de tabaco infestadas

Español; castellano. Las semillas de tabaco constituyen una vía importante para la diseminación de Pseudomonas syringae pv. tabaci. Se ensayó un procedimiento para el recobrado de la bacteria a partir de semillas inoculadas, que consistió en su extracción en buffer PBS, seguido de la centrifugación del sobrenadante, siembra en el medio de cultivo King B e inoculación del líquido recobrado por infiltración en hojas de tabaco. Para estudiar la sensibilidad del método se confeccionaron muestras de trabajo constituidas por diferentes cantidades de semillas inoculadas y sanas para complementar a un gramo. A partir de la muestra de semillas inoculadas solamente se recobró la bacteria con un promedio de 196,6 colonias por placa (10E7 ufc/mL). En los tratamientos que contenían semillas infectadas desde 0,5 hasta 0,1 g, se detectaron niveles altos del patógeno, en el rango de 10E6-10E5 ufc/mL. En las hojas de tabaco la concentración bacteriana de 10E7 ufc/mL provocó una necrosis circundada de halo clorótico a las 24 h, las concentraciones en el rango de 10E4 ufc/mL dieron lugar a clorosis y expansión de la infección a los tres o cuatro días. Las lesiones correspondientes a las poblaciones inferiores (10E3-10E1) aparecieron entre 10 y 15 días en forma de pequeñas manchas húmedas y clorosis ligera. Fue posible detectar la presencia de Pseudomonas syringae pv. tabaci en las semillas, por siembra en medio de cultivo, en concentración de hasta 103 ufc/mL y con la infiltración de las hojas de tabaco, en diluciones inferiores (10E_2-10E_1) no fue posible aislar colonias de la bacteria.

Inglés. Tobacco seeds are an important way for disseminating Pseudomonas syringae pv. tabaci. A procedure for recovering the bacteria from inoculated seeds was tried, which consisted in the extraction of bacteria in PBS, continued with centrifuging the supernatant, sowing in a King B medium and later the inoculation of recovered liquid by infiltration in tobacco leaves. To determine the method sensitivity, work samples were formed with different amounts of inoculated and healthy seeds to complement one gram. Only an average of 196.6 bacteria colonies/dish (10E7 cfu/mL) was recovered from the sample of inoculated seeds. High levels of the pathogen, within the range of 10E6 to 10E5 cfu/mL were detected in treatments contained infected seeds from 0.5 to 0.1 g. Bacterial concentration of 10E7 cfu/mL caused a necrosis surrounded by a chlorotic halo on tobacco leaves over a period of 24 hours, concentrations in the range of 10E4 cfu/mL produced chlorosis and infection expansion from 3-4 days. Injuries corresponding to lower populations (10E3-10E1) appeared between 10-15 days in the form of small humid spots and light chlorosis. It was possible to detect the presence of Pseudomonas syringae pv. tabaci in the seeds, by sowing in the culture medium with concentrations up to 10E3 cfu/mL and with infiltration of tobacco leaves, it was not possible to isolate colonies of the bacteria in lower dilutions (10E_2-10E_1).