Influence of Vessel Type, Physical State of Medium and Temporary Immersion on the Micropropagation of Three Rhodophiala species

Inglés. Rhodophiala C. Presl (Amaryllidaceae) is a genus of attractive flowering geophytes native to South America. They have ornamental value, but most species are little known and have conservation problems. The objective of this study was to optimize a micropropagation process to support the use and preservation of three Chilean native species, R. montana (Phil.) Traub, R. splendens (Rengifo) Traub., and R. ananuca (Phil.) Traub. The research evaluated the feasibility of implementing liquid medium culture and assessed the influence of different tissue culture systems on the shoot production and biomass increment of small bulbs. Three experiments were carried out. The first one determined the influences of flask size and volume of media; the second compared liquid and solid media, and in the third experiment, a temporary immersion system (TIS), and conventional culture in static liquid, shaken liquid and gelled Murashige and Skoog (MS) media were compared. By using larger (350 mL) flasks with higher (50 mL) media volume, 100% more fresh weight of microbulb was obtained that treatment with smaller flasks (45 mL) and media volume (10 mL). In gelled medium, hyperhydricity affected only 5% of explants, while in liquid medium was 16-40%. Survival to acclimatization reached 87-94% for plants from gelled medium; from liquid medium only 38-69%. TIS yielded higher propagation rate (1.9 shoots in 30 d) compared with shaken liquid medium (1.0) (P < 0.05) in R. ananuca only. Current procedures are appropriate for the support of ex situ conservation and germplasm bank establishment.

Español; castellano. Rhodophiala C. Presl (Amaryllidaceae) es un género de geófitas nativas de Sudamérica con un gran potencial ornamental por sus atractivas flores. La mayoría de las especies de este género son poco conocidas y tienen problemas de conservación. El objetivo de este estudio fue optimizar un proceso de micropropagación para sustentar el uso y preservación de tres especies nativas de Chile: R. montana (Phil.) Traub, R. splendens (Rengifo) Traub y R. ananuca (Phil.) Traub. Se evaluó la factibilidad de la implementación del cultivo en medio líquido y se determinó la influencia de diferentes sistemas de cultivo in vitro en la formación de brotes e incremento en biomasa de microbulbillos. Se ejecutaron tres experimentos. El primero determinó la influencia del tamaño del frasco y el volumen de medio Murashige y Skoog (MS), el segundo comparó medio MS líquido y sólido, y el tercero comparó un sistema de inmersión temporal (SIT), líquido estático, líquido en agitación y medio MS gelificado. Con frascos de 350 mL con volumen de medio de 50 mL se obtuvo un 100% de mayor peso fresco de bulbo que en frascos de 45 mL con volumen de medio de 10 mL. En medios gelificados, la hiperhidricidad afectó al 5% de los explantes, mientras que en medio líquido fue 16-40%. La supervivencia a la aclimatación alcanzó un 87-94% para plantas provenientes de medio gelificado; para las provenientes de medio líquido llegó a 38-69%. SIT permitió obtener mayor tasa de propagación (1,9 brotes en 30 días), comparado con medio líquido en agitación (1,0 brote) (P < 0,05) en R. ananuca. Los procedimientos presentados son apropiados para la conservación ex situ y el establecimiento de bancos de germoplasma.