Techniki mutagenezy losowej prowadzącej do zwiększenia polimorfizmu [białka bakteryjnego] | Random mutagenesis techniques resulting in increased polymorphism

Polaco. Inżynieria białek jest obecnie bardzo ważnym działem we współczesnej biotechnologii. Polega ona między innymi na losowej mutagenezie genów kodujących białka i pozwala na tworzenie enzymów oraz białek o pożądanych cechach lub o zwiększonej aktywności. Istnieje wiele technik umożliwiających losową zmianę w sekwencji aminokwasowej białek poprzez zmianę sekwencji nukleotydów w kodujących je genach. Można to osiągnąć poddając całe bakterie lub DNA działaniu związków chemicznych; bądź wystawiając je na promieniowanie UV; wykorzystując zmodyfikowane techniki PCR lub RCA (Error-prone rolling circle amplification) - z zamierzonymi błędami w mutowanych szczepach; lub używając jednej z metod tasowania DNA. Dzięki tym technikom i odpowiednim sposobie selekcji zmutowanych klonów możliwe jest przyspieszenie ewolucji genomów na potrzeby przemysłu.

Inglés. Protein engineering is now a very important sector in modern biotechnology. They are used random mutagenesis, which allows production enzymes and proteins with the desired characteristics or increased activity. These techniques and the appropriate method of bacterial selection permit to accelerate the evolution of genomes for industry. There are many techniques to create random changes in the amino acid sequence of the protein. This can be achieved by treating the whole bacteria or DNA chemicals or UV radiation, using modified techniques of PCR or RCA in error-prone mix, mutator strains and using one of the methods of DNA shuffling. The following article provides a description of these methods and examples of successful use of them. Key words: physical and chemical mutagenesis, EP-PCR, RCA, mutator strain, DNA shuffling, StEP, RACHITT