Techniki wykorzystywane w ukierunkowanej mutagenezie białek | Techniques used in site-directed protein mutagenesis

Polaco. W obecnych czasach poszukuje się w przemyśle enzymów o jak najwyższej aktywności. Można je uzyskać, stosując metody ich mutagenezy. Techniki ukierunkowanej mutagenezy pozwalają na wprowadzenie zmian w konkretnym miejscu w sekwencji DNA kodującej białko. Należą do nich między innymi: metoda wydłużania startera, QuikChange PCR, MegaWhop PCR, GeneTailorTM Site-Directed Mutagenesis System, OmniChange PCR. Techniki te można również zastosować do badania znaczenia konkretnych aminokwasów w białku. W wypadku gdy nie wiemy, jaki aminokwas podstawić w wytypowanym miejscu w enzymie, to możemy wykorzystać mutagenezę nasycenia. Przedstawiono opis tych metod i możliwości ich wykorzystania.

Inglés. In the present day, the enzyme industry is looking for the highest activity. They can be obtained using methods of their mutagenesis. Site-directed mutagenesis techniques allow changes in a specific site in the amino acid sequence of proteins. These include the primer extension method, QuikChange PCR, MegaWhop PCR, GeneTailorT.Site-Directed Mutagenesis System, OmniChange PCR. These techniques can also be used to study the meaning of specific amino acids in the protein. In case we do not know which amino acids are best to replace, which would be best for the selected site, then we can use saturation mutagenesis. The following article describes these methods and how they can be used.