Maize transformation with cry genes for European corn borer (Ostrinia nubilalis Hub.) resistance

Inglés. Bacillus thuringiensis is a common gram positive bacterium isolated from soil and has a specific gene called cry gene. The gene can produce insecticidal crystal protein (delta-endotoxin), which is toxic to lepidopteran larvae, e.g., the European corn borer (O. nubilalis). Experiments on maize transformation with cry gene were conducted to introduce cry genes into maize cells for European corn borer resistance. Particle gun bombardment and whiskers methods were used for the experiment. Cells from embryogenic maize suspension culture of A188 x B73 inbred lines were used as target cells. Results indicated that both transformation methods can be used to introduce cry genes into maize cells. Some clones and transgenic plants were obtained from the experiments. They showed BT-positive on polymerase chain reaction and bioassays/feeding assays analysis. Particle gun bombardment was more effective in DNA delivery than whiskers methods. On gun experiment I, approximately 80 clones were obtained from 141 plate cells bombarded with cry5. Twenty three clones could be regenerated and produced 201 transgenic plants. These plants produced 258 seeds. Gun experiment II produced 31 clones from 133 plate cells combarded with cry 1A(c) and cry5. Only 17 clones could be regenerated and produced 196 transgenic plants. Whiskers experiments only produces 35 clones from 560 plate cells whiskered with cryV/5

desconocido. Bacillus thurigiensis merupakan bakteri gram positif yang memiliki gen khusus yang disebut gen cry. Gen ini berfungsi untuk mensintesis kristal protein yang bersifat racun terhadap larva serangga, termasuk larva penggerek jagung Eropa (O. nubilis). Percobaan transformasi jagung dengan gen cry telah dilakukan untuk memperoleh sifat ketahanan terhadap penggerek jagung Eropa. Transformasi dilaksanakan dengan menggunakan dua teknik, yaitu gold particle gun bombardment (penembakan dengan partikel emas) dan whiskers (silikon karbida). Sel target yang dipakai diambil dari suspensi sel embriogenik jagung inbred A188 x B73. Hasil percobaan menunjukkan bahwa kedua teknik transformasi berhasil memasukkan plasmid yang mengandung gen cry ke dalam sel jagung. Hal ini dibuktikan dengan dihasilkannya beberapa klon dan tanaman transgenik yang menunjukkan Bt-positif pada pengujian molekuler dengan teknik polymerase chain reaction dan biologis dengan bioassays/feeding assays. Teknik penembakan tampak lebih efektif dalam memasukkan gen cry dibandingkan teknik whiskers. Dari 141 petri sel pada percobaan penembakan I dihasilkan 80 klon yang 23 klon diantaranya dapat diregenerasikan menjadi 201 tanaman transgenik. Tanaman ini mampu menghasilkan biji jagung sebanyak 258. Pada percobaan penembakan II, sebanyak 133 petri sel telah ditembak dengan gen cry 1 A(c) dan cry5 dan menghasilkan 31 klon. Tujuh belas klon diantaranya berhasil diregenerasikan menjadi 196 tanaman transgenik, sedangkan teknik whiskers hanya mampu menghasilkan 35 klon dari 560 petri sel ditransformasi dengan gen cry V/5