Zona pellucida hardening assay on in vitro matured equine oocytes

Inglés. Slaughter-derived equine oocytes reach the metaphase-II stage when cultured for in vitro maturation (IVM) but fail to be fertilized in vitro with standard procedures. A possible involvement of a zona pellucida hardening (ZPH) mechanism related to different culture conditions was investigated by means of alpha-chymotrypsin digestion. The solubilization times observed in oocytes examined at retrieval were not statistically different from those of oocytes examined after culture. No effects of the presence and morphology of cumulus oophorus on the solubilization properties of ZP were observed. The supplementation of IVM medium with follicular fluid resulted in a reduced resistance to enzyme action. A certain variability, found between groups of oocytes obtained from different mares, could have influenced the outcome of ZPH assay in equine oocytes

Italiano. [Oociti equini derivati dalla macellazione raggiungono il II stadio della metafase quando coltivati per la maturazione in vitro (MIV), ma non risultano fecondati in vitro secondo le procedure standard. E' stato quindi studiato se interveniva un meccanismo di hardening della zona pellucida (HPZ), in relazione a diverse condizioni di coltura, mediante il ricorso a digestione con alfa-chimotripsina. I tempi di solubilizzazione osservati negli oociti esaminati al momento del prelievo non risultavano statisticamente differenti rispetto a quelli degli oociti esaminati dopo la coltura. Non sono stati osservati effetti della presenza e della morfologia del cumulo ooforo sulle proprieta' di solubilizzazione della ZP. L'arricchimento del substrato di MIV con fluido follicolare si traduceva in una riduzione della resistenza all'azione dell'enzima. Una certa variabilita' osservata fra i gruppi di oociti ottenuti da differenti cavalle potrebbe aver influenzato il risultato della prova di HPZ negli oociti equini]