Maize elite inbred lines are susceptible to Agrobacterium tumefaciens mediated transformation [Zea mays L.]

Inglés. Eleven maize inbred lines were employed as target genotypes for Agrobacterium-mediated transformation. Six Agrobacterium strains, characterized by different chromosomal background and Ti-plasmid content, were chosen for infection of immature embryos and embryogenic primary calli; transformation efficiency was detected via histochemical staining for beta-glucuronidase expression. In all cases, the addition of acetosyringone, as an elicitor of vir genes, was employed. Microbombardment of the scutellar tissues was also tested as treatment mimicking a wounding response of the embryogenically competent cells. The efficiency of transformation was evaluated for each inbred, considering the interaction among maize genotypes and Agrobacterium strains. With the exception of inbred Lo 1123, in all cases a proper combination Agrobacterium strain/maize genotype was found, giving a histochemical positive response for GUS assay. The most effective Agrobacterium strains were C58 and EHA101. Additionally, two inbred lines, A188 and Lo1054, were evaluated for transformation using embryos at different maturation stages. The results obtained support the possibility of identifying an optimal embryo stage for the induction of embryogenic callus and for Agrobacterium infection. This would be helpful to establish desirable experimental conditions needed for stable transformation of a given maize genotype

Italiano. [Undici linee consanguinee di mais sono state utilizzate come genotipi target per la trasformazione mediata da Agrobacterium. Per l'infezione di embrioni maturi e di calli embriogenici primari sono stati utilizzate sei ceppi di Agrobacterium, caratterizzati da un assetto cromosomico e un contenuto di plasmidi Ti diversificati; l'efficienza della trasformazione e' stata verificata mediante colorazione istochimica per l'espressione della beta glucuronidasi. In tutti i casi e' stata utilizzata l'aggiunta di betasiringone, come elicitore dei geni vir. E' stato pure provato il microbombardamento dei tessuti scutellari come trattamento in grado di emulare una risposta di ferita delle cellule embriogenicamente competenti. L'efficienza della trasformazione e' stata valutata per ogni linea consanguinea, considerando le interazioni fra i genotipi di mais e i ceppi di Agrobacterium. Con l'eccezione della linea Lo 1123, in tutti i casi e' stata riscontrata combinazione appropriata ceppo di Agrobacterium/genotipo di mais, che dava una risposta istochimica positiva al test GUS. I ceppi di Agrobacterium piu' efficaci risultavano C58 ed EHA101. In aggiunta, due linee consanguinee, A188 e Lo1054, sono state valutate per quanto riguardava la trasformazione utilizzando embrioni a differenti stadi di maturazione. I risultati ottenuti supportano l'esistenza della possibilita' di identificare uno stadio embrionale ottimale per l'induzione del callo embriogeno e l'infezione con Agrobacterium. Questo sarebbe utile per determinare le condizioni sperimentali favorevoli per rendere possibile la trasformazione stabile di un dato genotipo di mais]