Adaptation of the rabies virus of the production strain "sheep" GNKI to the transplanted cultures of NGUK-1 and ВНК-21/13 cells | Адаптация вируса бешенства производственного штамма "овечий" ГНКИ к перевиваемым культурам клеток НГУК-1 и ВНК-21/13

Inglés. The selection of the optimal line of the passaged cell culture and the adaptation of the rabies virus to it makes it possible to exclude the use of laboratory animals, fully control the process of obtaining virus-containing material with high infectious activity in large quantities and with a faster and shorter production cycle. The adaptive potential of various strains of rabies virus varies significantly, in this regard, the sensitivity of the production strain of the rabies virus "Sheep" GNKI to the passaged cultures of NGUK -1 and VNK-21/13 cells. The adaptation of the rabies virus to the passaged cultures of NGUK-1 and VNK-21/13 cells was carried out by sequential passaging. The titer of the virus was calculated by the number of fluorescent foci, the concentration of rabies virus antigen was determined by the ELISA method, the pathogenicity of the virus at the level of 11 passages on different cell lines – on white mice. It was found that the passaged VNK -21/13 cell line provided a faster adaptation of the virus and the achievement of maximum titers within 36-48 h, whereas the NGUK-1 line maintained relatively slow replication - 96-120 h. The optimal multiplicity of infection with NGUK-1 and VNK-21/13 was 0.1 CCID50/cell (a 50% infectious dose for cell cultures), while the titers of the "Sheep" virus strains were 4.11±0.26 and 6.17±0.49 lg CCID50/cm3, respectively. Virus replication in VNK-21/13 cells was characterized by greater intensity: the antigenic titer of the virus at all passage levels was 1.5-2 times (p is less than 0.05) higher than that in NGUK-1 cells. The positive dynamics of the accumulation of the viral titer persisted until passage 8-9, after which this indicator remained stable until passage 11 inclusively preserving pathogenicity for white mice. It is concluded that the passaged VNK-21/13 cell line significantly exceeds the NGUK-1 cell line in terms of replicative capabilities and can be used in developing viral raw materials for the production of diagnostic tools and specific prophylaxis.

Ruso. Подбор оптимальной линии перевиваемой культуры клеток и адаптация к ней вируса бешенства позволяет исключить использование лабораторных животных, полностью контролировать процесс получения вируссодержащего материала c высокой инфекционной активностью в больших количествах и с более быстрым и коротким производственным циклом. Адаптационный потенциал различных штаммов вируса бешенства существенно варьирует, в связи с чем изучали чувствительность производственного штамма вируса бешенства "Овечий" ГНКИ к перевиваемым культурам клеток НГУК-1 и ВНК-21/13. Адаптацию вируса бешенства к перевиваемым культурам клеток НГУК-1 и ВНК-21/13 осуществляли путем последовательного пассирования. Титр вируса рассчитывали по количеству флуоресцирующих фокусов, концентрацию антигена вируса бешенства определяли методом нИФА, патогенность вируса на уровне 11 пассажа на разных клеточных линиях – на белых мышах. Установлено, что перевиваемая линия клеток ВНК-21/13 обеспечивала более быструю адаптацию вируса и достижение максимальных титров в течение 36-48 ч, тогда как линия НГУК-1 поддерживала относительно медленную репликацию - 96-120 ч. Оптимальная множественность инфицирования НГУК-1 и ВНК-21/13 составила 0,1 ККИД50 (50%-ная инфекционная доза для культур клеток)/клетку, при этом титры штаммов вируса "Овечий" составили 4,11±0,26 и 6,17±0,49 lg ККИД50/см3 соответственно. Репликация вируса в клетках ВНК-21/13 была более интенсивной: антигенный титр вируса на всех пассажных уровнях в 1,5-2 раза (p меньше 0,05) превышал таковой в клетках НГУК-1. Положительная динамика накопления вирусного титра сохранялась до 8-9 пассажа, после чего показатель оставался стабильным до 11 пассажа включительно, сохраняя патогенность для белых мышей. Сделан вывод, что перевиваемая линия клеток ВНК-21/13 по репликативным возможностям значительно превосходит линию клеток НГУК-1 и может использоваться при наработке вирусного сырья для производства средств диагностики и специфической профилактики.