Silencing of genes envolved in starch biosynthesis in cassava | Silenciamiento de genes de la ruta de biosíntesis de almidón en yuca

Inglés. Cassava (Manihot esculenta Crantz), due to its starchy roots is a potential raw material for the biofuel market. To modify the starch quality/quantity in cassava, we used RNA interference (RNAi) to silence selected genes of the starch biosynthesis pathway in the roots. Genes coding for GBSS, SBE & AGPasa were PCR-amplified and cloned into the silencing vector pHELLSGATE. The constructs were introduced in cassava cultivar 60444 by cocultivating Friable Embryogenic Callus (FEC) with Agrobacterium. After several transformation attempts, only two lines of plants were confirmed by Southern blot as transgenics for construct pHELLSGATE::SBE. These lines showed abnormal growth and deformed leaves. These findings suggested that silencing genes of the biosynthesis pathway in cassava may compromise the viability of plants.

Español; castellano. La yuca (Manihot esculenta Crantz), por presentar gran cantidad de almidón en sus raíces almacenadoras, se constituye en una potencial materia prima para el mercado de agrocombustibles. En este proyecto se buscó aprovechar la estrategia del silenciamiento génico mediado por ARN de interferencia (ARNi), para silenciar algunos de los genes de la ruta de biosíntesis del almidón y así obtener variedades con contenidos y estructura de almidón diferentes. Los genes que codifican para GBSS, SBE y AGPasa se amplificaron y clonaron en el vector binario de silenciamiento pHELLSGATE. Estas construcciones fueron empleadas para transformar Callo Embriogénico Friable (CEF) de yuca de la variedad 60444. Tras varios experimentos de transformación se lograron obtener dos líneas transgénicas correspondientes a la construcción pHELLSGATE:SBE las cuales fueron confirmadas. Estas plantas presentaron problemas de crecimiento y deformaciones en las hojas. Estos resultados parecen sugerir que el silenciamiento de los genes implicados en la biosíntesis de almidón compromete la viabilidad de las plantas de yuca.