Toward a new rapid method to assess plant species in a bee pollen diet

Inglés. Honey bee diet surveys require an accurate knowledge of the pollen supply and a rapid counting method for microscopic analyses. Referring to the literature, we aimed at reducing the number of pollen grains counted in order to decrease the time spent for each sample. For this, we compared counts on whole transects to alternative methods of counting by sub-sampling, using the non-acetolysed palynological method. For each pellet sample, a drop of a homogenized suspension was dried, degreased, and mounted onto a slide dressed with glycerol gelatin. The counting was performed through a digital camera fitted on a microscope. The study was carried out in two phases. Phase 1 was a test of slide homogeneity, carried out on a 10-slide set with one replicate. For each slide, we compared an exhaustive count of each present taxon on a whole transect divided in four quarters. Phase 2 was a search for an alternative counting method. The work was performed over the first six samples with replicates retaining exactly the same transect, but counting only one microscope field in three, then four, and finally one in five. Data analyses were carried out with Chi-square tests on taxa that were present in more than 5% of the sample. Phase 1 showed some cases of heterogeneity in microscope slides, leading to an error hazard when counting in a continuous mode up to a defined grain number. In phase 2, the comparison of alternative countings to full transects verified the linearity of the counting results. Suitable results were given by the reading method “one in three”. We improved the accuracy of this method for the particular case of samples containing large pollen grains, e.g., Zea mays, which are unevenly disseminated on the slide.

Español; castellano. La evaluación de la dieta de la abeja de la miel requiere un conocimiento exacto del suministro de polen y un método de conteo rápido para los análisis microscópicos. En referencia a la literatura, tuvimos como objetivo reducir el número de granos de polen contados con el fin de disminuir el tiempo empleado para cada muestra. Para ello, se compararon los recuentos en transectos enteros con otros métodos de conteo mediante submuestreos usando el método palinológico no acetolisado. Para cada muestra de precipitado, se secó una gota de una suspensión homogeneizada, desengrasada y montada en un portaobjetos impregnado con gelatina de glicerol. El recuento se llevó a cabo a través de una cámara digital montada en un microscopio. El estudio se llevó a cabo en dos fases. Fase 1 fue una prueba de homogeneidad del portaobjetos, llevado a cabo en una serie de 10 portaobjetos con un replicado. Para cada portaobjetos, se comparó un recuento exhaustivo de cada taxón presente en todo un transecto dividido en cuatro cuartos. Fase 2 fue la búsqueda de un método de recuento alternativo. El trabajo se llevó a cabo en las primeras seis muestras con réplicas usando exactamente el mismo transecto, pero contando sólo un campo al microscopio de tres, luego cuatro, y finalmente uno de cada cinco. Los análisis de datos se llevaron a cabo con las pruebas de Chi-cuadrado sobre taxa que estaban presentes en más de 5% de la muestra. Fase 1 mostró algunos casos de heterogeneidad en los portaobjetos de microscopio, dando lugar a un riesgo de error cuando se cuentan en un modo continuo hasta un número definido de grano. En la fase 2, la comparación de recuentos alternativos para transectos completos verificó la linealidad de los resultados del recuento. Los resultados más adecuados se obtuvieron con el método de lectura “uno de cada tres”. Hemos mejorado la exactitud de este método para el caso particular de las muestras que contienen grandes granos de polen, por ejemplo, Zea mays, que se difunde de manera desigual en el portaobjetos.