Development of a copro-LAMP assay for detection of several species of Echinococcus granulosus sensu lato complex

Cystic echinococcosis represents a significant problem in human and animal health and constitutes one of the most severe Neglected Tropical Diseases prioritized by the World Health Organization. The etiological agent is the complex Echinococcus granulosus sensu lato (s. l.), composed of several species/genotypes. Diagnosis in the definitive host and molecular epidemiology studies are important points for cystic echinococcosis control. Here we developed a new copro-LAMP assay, LAMP EGSL, for diagnosis in the definitive host for simultaneous detection of Echinococcus granulosus sensu stricto (s. s.), Echinococcus ortleppi, and Echinococcus canadensis species. Also, the analytical sensitivity, specificity and plausibility of performance in a rural context of a previously reported species-specific LAMP reaction, was evaluated. Both reactions showed high analytical sensitivity values (10 fg-100 fg DNA) and did not show cross reaction with DNA from host or other helminthic parasites. LAMP EGSL was performed with samples from an endemic area. In addition, the alkaline hydrolysis of one E. granulosus s. s. adult parasite followed by specific LAMP to E. granulosus s. s. was performed in a laboratory with low resources from another cystic echinococcosis endemic area. The results obtained suggest that LAMP EGSL represents a potential tool for canine diagnosis that could be useful for cystic echinococcosis control programs. In addition, we showed that LAMP reaction for E. granulous s. s., E. ortleppi and E. canadensis specific detection, could be useful for molecular epidemiology studies applicable to the definitive host. Both reactions were performed in endemic, rural areas without sophisticated equipment.

Instituto de Biotecnología

Fil: Avila, Héctor Gabriel. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Investigaciones en Microbiología y Parasitología Médica. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Investigaciones en Microbiología y Parasitología Médica; Argentina. Centro de Investigación en Zoonosis (Chubut); Argentina

Fil: Mozzoni, Cecilia. Santa Cruz (Argentina : provincia). Ministerio de Salud y Ambiente. Hospital Zonal Caleta Olivia; Argentina

Fil: Trangoni, Marcos David. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Agrobiotecnología y Biología Molecular. Laboratorio de Brucella, Campylobacter & Microbiota; Argentina.

Fil: Cravero, Silvio Lorenzo Pedro. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Agrobiotecnología y Biología Molecular. Laboratorio de Brucella, Campylobacter & Microbiota; Argentina

Fil: Pérez, Verónica Mirtha. San Juan (Argentina : provincia). División Zoonosis; Argentina

Fil: Valenzuela, Federico. San Juan (Argentina : provincia). División Zoonosis; Argentina

Fil: Gertiser, María Laura. Centro de Investigación en Zoonosis (Chubut); Argentina

Fil: Butti, Marcos Javier. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Veterinarias. Cátedra de Parasitología Comparada. Laboratorio de Parasitosis Humanas y Zoonosis Parasitarias; Argentina

Fil: Kamenetzky, Laura. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Investigaciones en Microbiología y Parasitología Médica. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Investigaciones en Microbiología y Parasitología Médica; Argentina.

Fil: Jensen, Oscar. Centro de Investigación en Zoonosis (Chubut); Argentina

Fil: Rosenzvit, Mara Cecilia. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Investigaciones en Microbiología y Parasitología Médica. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Investigaciones en Microbiología y Parasitología Médica; Argentina.