Determinação de concentrações mínimas bactericidas em biofilmes do biocida cloreto de benzalcónio

Dissertação de Mestrado Integrado em Medicina Vetrinária

Uma das formas de estudar a eficácia de um biocida é através da determinação da sua concentração mínima bactericida (CMB) em certas espécies bacterianas. Este procedimento é atualmente usado na determinação das suscetibilidades a antimicrobianos de bactérias potencialmente patogénicas em humanos e animais. Assim sendo, o presente trabalho experimental teve como objetivo estudar a eficácia do biocida cloreto de benzalcónio, através da determinação das suas CMB em cinco isolados bacterianos, quer na sua forma plantónica, quer em biofilme. Os resultados obtidos permitiram concluir que a eficácia do biocida além de depender do tipo de microrganismo presente e do tempo de contacto, também é alterada consoante os microrganismos estejam na sua forma plantónica ou em biofilme, sendo que o biocida é menos eficaz em biofilmes constituídos por mais do que uma espécie bacteriana. Concluiu-se que o isolado de Pseudomonas aeruginosa foi o responsável pela resistência demonstrada pelos outros isolados. Verificou-se também que o procedimento experimental adotado foi adequado para o estudo de eficácia do cloreto de benzalcónio, dado que foram determinadas as suas CMB, apresentando no entanto algumas limitações relacionadas com algumas metodologias adotadas. Ainda não existem muitos estudos que avaliem a eficácia de biocidas através da determinação de CMB em biofilmes constituídos por várias espécies microbianas. Por outro lado, a natureza variada dos biofilmes traduz-se numa dificuldade em prever os resultados da sua interação com biocidas. Assim sendo, justifica-se o desenvolvimento de protocolos que permitam fazer estudos de eficácia de biocidas em biofilmes multespécie, de modo a aprofundar os conhecimentos nesta área.

ABSTRACT - Determination of minimum bactericidal concentrations in biofilmes of the biocide benzalkonium chloride - The determination of a biocide’s minimum bactericidal concentration (MBC) in certain bacterial species is one possible way of assessing its efficacy. This procedure is currently widely used to determine certain human and animal pathogenic bacteria’s susceptibilities to antimicrobial agents. Thus, the present experimental procedure aimed to study the efficacy of the biocide “benzalkonium chloride”, through the determination of its minimum bactericidal concentrations on the planktonic form and biofilms of five bacterial isolates. According to the results obtained, it was possible to conclude that the efficacy of the biocide not only depends on the type of microorganisms present and on the contact time, but it’s also affected by the bacteria’s spacial display, being less effective on multispecies biofilms. It was concluded that the Pseudomonas aeruginosa isolate was the main responsible for the resistance demonstrated by the other bacterial isolates to the biocide. It was also observed that the experimental procedure adopted was adequate to study the benzalkonium chloride’s efficacy since it was possible to determine its MBC, despite presenting some limitations related to certain methodologies adopted. Currently, there aren’t many studies that have evaluated a biocide’s efficacy through the determination of its MBC in multispecies biofilms. On the other hand, the diverse nature of a biofilm makes it difficult to predict the outcome of its interactions with biocides. This justifies the need to develop protocols which will allow the evaluation of a biocide’s efficacy in multispecies biofilms, thus improving the knowledge in this area.