Desarrollo y evaluación in vitro de un implante hormonal de liberación prolongada para la inducción del desove en peces | Development and in vitro evaluation of a prolonged release hormonal implant for the induction of spawning in fish

La acuicultura de peces marinos es una actividad productiva que ha adquirido gran importancia durante las últimas décadas; sin embargo, su desarrollo enfrenta diversas problemáticas. Dentro de las más importantes se encuentran las alteraciones en la reproducción durante el cautiverio, sobre todo en las hembras. Para resolver estos problemas, desde hace varias décadas se ha recurrido al uso de terapias hormonales en diversas especies. En la actualidad se utilizan análogos de la hormona liberadora de las gonadotropinas (GnRHa) dado su resistencia a la degradación enzimática en comparación con la GnRH nativa. Sin embargo, aunque existen implantes para la liberación de GnRHa en peces, estos no son útiles para todas las especies de importancia comercial y los protocolos de preparación no son claros para su replicación en campo, lo que hace necesario el desarrollo de nuevos protocolos claramente descritos. El presente estudio tuvo como objetivo describir y comparar el perfil de liberación de GnRHa de implantes preparados con diferentes excipientes en pruebas in vitro: 1) colesterol-celulosa; 2) alginato- metil éter metacrilato de polietilénglicol (PEGMA) y 3) etilvinilacetato (EVAc). Para la elección de los implantes a probar en la liberación de GnRHa se elaboraron implantes con diferentes excipientes y se describió el perfil de liberación de albúmina de suero bovino (BSA) como proteína modelo. Todos los implantes estudiados mostraron una liberación tipo estallido que se presentó en diferentes tiempos. Por esta razón se eligieron los implantes que iniciaron la liberación después de 6 h y liberaron por un periodo más prolongado. Para los implantes de alginato adicionalmente se probaron diferentes recubrimientos: 1) 2-hidroxietilo de metacrilato (HEMA)- PEGMA y 2) EVAc; ambos recubrimientos redujeron significativamente (p<0.01) el grado de hinchamiento de los implantes al compararlos con implantes sin cobertura. Se evaluó la liberación de GnRHa a partir de diferentes implantes: 1) 95% colesterol m/m, 5% celulosa m/m; 2) 1.5% alginato de sodio m/v-PEGMA v/v cubierto con EVAc m/m-inulina m/m, y 3) EVAc m/m. La cuantificación de las proteínas liberadas se hizo con el método del ácido bicinconínico (BCA). No se encontraron diferencias significativas en la magnitud de liberación tipo estallido entre los implantes de alginato y los de colesterol-celulosa, sin embargo, esta liberación se registró a las 6 y 48 h, respectivamente. El porcentaje acumulado liberado fue ...

Marine fish aquaculture is a productive activity that has acquired great importance during the last decades; however, its development faces several problems. Among the most important are reproductive alterations during captivity, especially in females. To solve these problems, hormonal therapies have been applied for several decades in various species. Currently, gonadotropin-releasing hormone analogues (GnRHa) are used because of their resistance to enzymatic degradation compared to native GnRH. However, although implants for GnRHa release in fish exist, they are not useful for all commercially important species and preparation protocols are not clear for field replication, what makes it necessary the development of new clearly described protocols. The present study aimed to describe and compare the GnRHa release profile of implants prepared with different excipients in in vitro tests: 1) cholesterol-cellulose; 2) alginatepolyethylene glycol methacrylate ether (PEGMA) and 3) ethylene vinyl acetate (EVAc). For the choice of implants to be tested on GnRHa release, implants with different excipients were prepared and the release profile of bovine serum albumin (BSA) as a model protein was described. All the implants studied showed a burst-like release occurring at different times. For this reason, the implants that initiated release after 6 h and released for a longer period were chosen. For the alginate implants additionally, different coatings were tested: 1) 2-hydroxyethyl methacrylate (HEMA)- PEGMA and 2) EVAc; both coatings significantly (p<0.01) reduced the degree of implant swelling when compared to uncoated implants. GnRHa release from different implants was evaluated: 1) 95% cholesterol m/m, 5% cellulose m/m; 2) 1.5% sodium alginate m/v-PEGMA v/v coated with EVAc m/m-inulin m/m, and 3) EVAc m/m. Quantification of the released proteins was done with the bicinchoninic acid (BCA) method. No significant differences were found in the magnitude of burst-type release between alginate and cholesterol-cellulose implants; however, this release was recorded at 6 and 48 h, respectively. The cumulative percentage released was significantly higher (62.1%, p=0.003) in the alginate implants. Cholesterol implants released for 192 h,while alginate implants released for 72 h. Quantification of GnRHa released from EVAc implants was not accurate because the method was not specific for GnRHa, however, released proteins were detected up to 336 h after the start of the ..