Identification de partenaires phloémiens du CABYV

National audience

Francés. Le Cucurbit aphid borne yellows virus (CABYV) est un polérovirus de la famille des Luteoviridae. Ces virus sont strictement localisés dans les cellules phloémiennes des plantes. Ils se multiplient dans les cellules nucléées et empruntent les faisceaux des tubes criblés pour se propager dans la plante. Ces derniers servent également de réservoir de virus à partir desquels les pucerons vecteurs vont acquérir les virions afin de les transmettre à d’autres plantes. L’objectif de cette étude est d’identifier, dans le compartiment vasculaire, des partenaires cellulaires ayant une affinité pour le virus, et d’étudier leur rôle dans le mouvement du virus dans la plante et dans sa transmission par puceron. Deux approches ont été développées au laboratoire : une approche biochimique consistant à identifier dans la sève de concombre les protéines capables de se lier in vitro aux particules du CABYV (technique du Far western blot sur gels mono- et bi-dimensionnels) et une approche génétique basée sur le système du double hybride dans la levure pour cribler une banque d’ADNc de cellules compagnes d’A. thaliana, en utilisant comme appâts les protéines de structure du CABYV. L’approche biochimique a permis d’identifier dans la sève de concombre une dizaine de protéines susceptibles de se lier aux particules du CABYV. Parmi les candidats, on trouve majoritairement des protéines de défense de la plante ainsi que deux lectines (CsLec26, et CsLec17) prépondérantes dans la sève des cucurbitacées. La CsLec26 présente un intérêt tout particulier pour notre étude car elle est mobile dans les tubes criblés et aussi capable de se lier à certains agents pathogènes non conventionnels, les viroïdes, pour assurer leur mouvement systémique. De plus, en tant que lectine, un rôle au niveau de l’acquisition du virus par le puceron peut être envisagé. Une étude fonctionnelle de l’orthologue du gène codant pour CsLec26 chez A. thaliana a donc été initiée. Par ailleurs,