Immunochemical detection of esterases from the cattle tick Boophilus Microplus | Detección inmunoquímica de esterasas en dos cepas de la garrapata Boophilus microplus (acarii: ixodidae)resistentes a ixodicidas

Inglés. Rosario-Cruz R, García-Vázquez Z, Edward JG. Téc Pecu Méx 2000,38(3)203-210. An esterase from Boophilus microplus tick strain resistant to organophosphates was detected after SDS-PAGE. The protein showing activity was separated and used as an antigen to produce a polyclonal antibody. The polyclonal antibody was tested in a western blot for specific binding and three different Boophilus microplus tick strains were electrophoretically analyzed. The active protein showed differences in activity favoring the resistant tick strains but did not show any difference in a Western-Blot analysis when the same amount of protein was electrophoretically separated. The isoelectrofocussing however, showed differences in expression of esterase isozymes within a range of isoelectric point from 4.5 to 5.0. The evidences suggest that differences in activity are due to the participation of isoforms which are not immunologically differentiated, since, the Western blot did not show any difference between strains. The presence of isozymes with different physicochemical features, will be of great interest in the diagnosis of resistance to ixodicides, since they can be used as molecular markers for acaricide resistance detection.

Español; castellano. Rosario-Cruz R, García-Vázquez Z, Edward JG. Téc Pecu Méx 2000,38(3)203-210. Se encontró una esterasa en Boophilus microplus con actividad incrementada, en dos cepas de garrapatas resistentes a acaricidas de la familia de los piretroides y organofosforados, que fue detectada después de ser separadas electroforéticamente. La proteína fue separada y utilizada en la preparación de un anticuerpo policlonal monoespecífico. La especificidad de este anticuerpo fue probada mediante un ensayo de inmunoelectrotransferencia, en extractos totales de dos cepas de garrapatas resistentes, una a coumafos y otra a flumetrina, y una cepa susceptible a ambos compuestos. Las cepas de garrapatas resistentes mostraron una actividad de esterasa incrementada en relación con la cepa susceptible. El ensayo de isoelectroenfoque mostró diferencias en la expresión de varias isoformas con actividad de esterasa, que fueron detectadas en forma de escalera dentro del rango 4.5 a 5.0 de punto isoeléctrico. Los resultados sugieren que existen diferencias en la actividad enzimática que no son detectadas inmunológicamente, ya que en el ensayo de inmunoelectrotransferencia, no se encuentran diferencias entre los extractos. La presencia de isoformas con diferentes caracteristicas fisicoquímicas, será de gran interés en el diagnóstico de la resistencia, ya que pueden ser utilizadas como blancos moleculares para el diagnóstico de resistencia a ixodicidas.