Effect of membrane protector and thawing solution on the in vitro quality of frozen goat semen in pellets | Efecto del protector de membrana y la solución descongelante en la calidad in vitro del semen caprino congelado en pastillas

Inglés. The aim of this research was to evaluate the effect of membrane protector and thawing solution on the in vitro quality of goat semen frozen in pellets. Two hundred and fourteen ejaculates, collected twice a week by artificial vagina, were processed. The parameters volume, motility, concentration, viability, and total sperm abnormalities were evaluated. Suitable ejaculates were mixed and divided into two portions. Each received the corresponding formulation without carrying out the sperm washing by centrifugation. A non-commercial freeze-dried diluent composed of Tris-Glucose-Citric Acid and Glycerol, with different membrane protectors, egg yolk (4.45%) or BSA (5%), was used. It was frozen in vapor phase nitrogen (0.1 mL pellets), stored in liquid nitrogen for seven days. For thawing, two solutions (Tris and CIMATE) and a control (dry tube without thawing solution) were used. Percent motility (30, 120 and 240 minutes), viability and damaged acrosomes (30 and 120 minutes) were determined in incubation test. Membrane protector, thawing solution and their interactions were compared using a Binary Logistic Regression model. The combination of BSA and CIMATE presented the highest probability (P<0.05) of motility and viability at all times and the lowest probability (P<0.05) of damaged acrosomes at 30 min and 120 min. It is concluded that BSA can be used as a membrane protector for goat semen frozen in pellets in a freeze-dried Tris-based diluent, without carrying out sperm washing by centrifugation. In addition, CIMATO solution, as a thawing agent, enables better sperm cell recovery.

Español; castellano. Esta investigación se realizó con el objetivo de evaluar el efecto del protector de membrana y la solución descongelante en la calidad in vitro del semen caprino congelado en pastillas. Se procesaron 214 eyaculados, colectados dos veces por semana mediante Vagina Artificial. Se evaluaron los parámetros volumen, motilidad, concentración, viabilidad y anomalías espermáticas totales. Los eyaculados aptos fueron mezclados y divididos en dos porciones; cada una recibió la formulación correspondiente sin realizar el lavado seminal por centrifugación. Se utilizó un diluyoconservador liofilizado no comercial compuesto por Tris-Glucosa-Ácido Cítrico y Glicerol, con diferentes protectores de membrana, yema de huevo (4,45%) o BSA (5%). Se congeló en vapores de nitrógeno, en pastillas de 0,1 mL y se almacenaron en nitrógeno líquido durante siete días. Para la descongelación, se utilizaron dos soluciones (Tris y CIMATO) y un control (tubo seco sin solución descongelante). Se determinó en test de incubación, porcentaje de motilidad (30, 120 y 240 minutos), viabilidad y acrosomas dañados (30 y 120 minutos). El protector de membrana, la solución descongelante y sus interacciones se compararon mediante un modelo de Regresión Logística Binaria. La combinación de BSA y el CIMATO presentaron la mayor probabilidad (P<0,05) de motilidad y viabilidad en todos los tiempos y la menor probabilidad (P<0,05) de acrosomas dañados a 30 min y 120 min. Se concluye que la BSA puede utilizarse como protector de membrana, para la congelación del semen caprino en pastillas en un diluyoconservador liofilizado a base de Tris, sin realizar el lavado seminal por centrifugación y la solución CIMATO, como descongelante, posibilita mejor recuperación de la célula espermática.