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Cultivo de embriões bovinos produzidos in vitro: efeito do número de embriões e da proporção de meio Texto completo
2006
Daniela dos Santos Brum | Fábio Gallas Leivas | Mari Lourdes Bernardi | Fabrício Desconzi Mozzaquatro | Carlos Antonio Mondino Silva | Mara Iolanda Batistella Rubin
Na última década, os produtores de leite e carne bovina incrementaram consideravelmente o uso da aspiração folicular (OPU) associada à produção in vitro de embriões (IVP). Oócitos recuperados pela OPU têm qualidade diversificada e seu número reduzido requer condições diferenciadas de cultivo para a IVP. Para determinar o efeito do número de embriões e volume de meio sobre a IVP, 1428 embriões bovinos foram cultivados em grupos de 5, 10 e 20, em 1:1, 1:5 e 1:10mL de meio. Grupos de 20 oócitos foram maturados in vitro em 200mL de TCM-199+ rFSHh+10% de soro de vaca em estro (SVE), por 24h. A fecundação in vitro foi em grupos de 20 oócitos/200mL de meio Fert-Talp, por 18h com 1x10(6) espermatozóides/mL. O cultivo foi em SOFaaci+5% SVE por 8 dias. Considerando-se o dia da fecundação como D0, conduziu-se as avaliações no D2 (clivagem), D7 (blastocistos) e no D9 (eclosão). A taxa de clivagem foi superior quando o cultivo foi com 20 embriões e não foi afetada quando a proporção de meio variou (1:1; 1:5 e 1:10). Com as proporções de meio de cultivo 1:5 ou 1:10, a taxa de embriões em D7 foi superior (P<0.05) à 1:1. O número de embriões cultivados influenciou a produção de blastocistos em D7 (P<0,05) com 20 embriões/gota. Estes resultados também se refletem nos percentuais de blastocistos eclodidos em D9, sendo que 1:5 e 1:10 foram superiores (P<0,05) à 1:1. Da mesma forma, a taxa de eclosão foi superior (P<0,05) com o cultivo de 10 ou 20 embriões/gota quando comparado ao grupo de 5 embriões/gota. A redução do número de embriões e da proporção de volume de meio no cultivo, afeta os índices de desenvolvimento na produção in vitro de embriões bovinos.
Mostrar más [+] Menos [-]Morfologia da junção atrioventricular em Iguana iguana (Reptilia-Iguanidae) Texto completo
2006
Sonia Regina Jurado | Roberto Jorge da Silva Franco | Valdívia Rocha Morceli
A área da junção atrioventricular (AJAV), incluindo nó e feixe atrioventriculares foi investigada em sete corações de iguana comum ou verde (Iguana iguana), usando microscopia de luz. Animais adultos, de ambos os sexos, foram capturados no Pantanal, Brasil. Todos os corações foram fixados em formaldeído tamponado 10% (pH 7,2) por 24 horas, incluídos em parapast de acordo com métodos de rotina e seccionados com 5µm de espessura. Na iguana, a AJAV consiste de uma massa de fibras musculares mergulhada em uma quantidade variável de tecido conjuntivo e vasos sangüíneos, rodeada por miocárdio adjacente e aderida à valva atrioventricular direita no esqueleto fibroso. Através da microscopia de luz, células de condução do nó e feixe atrioventriculares podem ser distinguidas das células de trabalho por serem menores, de coloração pálida e pela presença de um envoltório de tecido conjuntivo. O nó AV bem como o feixe AV e seus ramos formam um trato contínuo. Histologicamente, encontramos fibras elásticas entre as células de condução, principalmente no nó AV. O método do PAS revelou a presença de glicogênio nas células especializadas. O esqueleto fibroso, principalmente, o trígono direito, apresentou um tecido condróide bem desenvolvido, constituído de cartilagem semelhante à hialina (condrócitos binucleados inseridos em grandes lacunas e matriz extracelular com colágeno fibrilar). O esqueleto fibroso tem fibras colágenas e cartilagem semelhante à hialina. Em conclusão, as células nodais e de Purkinje no coração de iguana apresentam pouca diferença morfológica quando comparadas às de mamíferos e aves, contudo o esqueleto fibroso tem um tipo diferente de cartilagem.
Mostrar más [+] Menos [-]Estudo da variação da concentração sérica de fenobarbital em cães cronicamente medicados Texto completo
2006
Helena Arantes do Amaral | Maria Helena Matiko Akao Larsson
Com a finalidade de avaliar a variação na concentração sérica do fenobarbital durante um intervalo de 12 horas da sua administração, as concentrações séricas foram mensuradas a cada duas horas em 30 cães cronicamente medicados, durante no mínimo um mês. A determinação dos valores séricos de fenobarbital, por meio de Imunofluorescência polarizada. Os valores de meia-vida obtidos variaram de 13-131 horas, sendo que a maioria dos cães atingiram o estado de equilíbrio dinâmico por volta de 15 dias, e todos após quatro semanas, recomendando-se assim monitoração após quatro semanas do início da terapia ou após cada ajuste de dose. Houve diferença significante entre as médias das amostras coletadas duas e quatro horas (pico) com as das amostras coletadas imediatamente antes e oito, 10 e 12 horas após sua administração. Assim, para a monitoração, pode-se realizar a coleta sangüínea, imediatamente antes da administração do fenobarbital, ou em qualquer horário, entre oito a 12 horas após sua administração e nos casos suspeitos de intoxicação uma segunda amostra pode ser coletada dentro de duas a quatro horas após a sua administração.
Mostrar más [+] Menos [-]Citotoxicidade do extrato alcaloidal das vagens de Prosopis juliflora Swartz. D.C. (Algaroba) em células gliais Texto completo
2006
Juliana Bentes Hughes | Victor Diógenes Amaral da Silva | Ana Rita Silva | Cleide dos Santos Souza | André Mário Mendes da Silva | Eudes da Silva Velozo | Maria José Moreira Batatinha | Maria de Fátima Dias Costa | Marcienne Tardy | Ramon dos Santos El-Bachá | Silvia Lima Costa
A Prosopis juliflora é amplamente utilizada na alimentação humana e de várias espécies animais, especialmente bovinos. Quadros de intoxicação por esta planta, nesta espécie, têm sido relatados, principalmente quando a mesma é oferecida como única fonte alimentar, desencadeando uma doença de sintomatologia nervosa. Neste estudo, objetivou-se avaliar os efeitos in vitro da fração de alcalóides totais (FA) extraída das vagens da Prosopis juliflora utilizando cultura primária de astrócitos obtidos do córtex cerebral de ratos como modelo de estudo. A avaliação da atividade mitocondrial pelo teste do MTT demonstrou a citotoxicidade em 30 µg/ml da FA após 24 h. As concentrações de 0,3 e 3 µg/ml da FA induziram um aumento da atividade mitocondrial, indicando reatividade celular. Testes imunocitoquímicos para a GFAP, principal proteína de citoesqueleto de astrócitos, revelaram alterações morfológicas nas células após tratamento com 0,3 e 3 µg/ml da FA por 72 h. Tais resultados são consoantes à análise desta proteína por westernblot, quando as culturas foram tratadas com 0,3 e 3 µg/ml da FA por 72 h, demonstrando interferências na regulação da expressão da GFAP. A expressão de vimentina não foi significativamente alterada em nenhuma das concentrações testadas. Estes resultados sugerem que os alcalóides da P. juliflora induzem a reatividade astrocitária, o que pode estar envolvido nos efeitos neurotóxicos providos pelo consumo desta planta.
Mostrar más [+] Menos [-]Avaliação da reutilização de implantes auriculares contendo norgestomet associados ao valerato ou ao benzoato de estradiol em vacas nelore inseminadas em tempo fixo Texto completo
2006
Alexandre Barreto Almeida | Claudia Maria Bertan | Luis Augusto Ferreira Rossa | Pércio dos Santos Gaspar | Mario Binelli | Ed Hoffmann Madureira
Em fêmeas bovinas a utilização da técnica de inseminação artificial em tempo fixo (IATF) é possibilitada pelo emprego de fármacos que tem como objetivos sincronizar a emergência das ondas foliculares, os estros e a ovulação. Em rebanhos comerciais, o custo de tais fármacos deve estabelecer uma vantajosa relação com os benefícios. O presente estudo, objetivou comparar as taxas de prenhez em vacas Nelore (Bos taurus indicus) inseminadas em tempo fixo, tratadas com implantes auriculares contendo 3mg de norgestomet (Crestar®), novos (IN) ou utilizados uma vez (IR; reutilizados), associados a administração de norgestomet (NG) e valerato de estradiol (VE) ou progesterona (P4) e benzoato de estradiol (BE). Vacas Nelore PO (n=241), amamentando, com o bezerro ao pé, receberam um dos quatro tratamentos: Crestar®novo durante 10 dias associado a administração de 3mg de NG e 5mg de VE (grupo IN/NG+VE; n=61); Crestar®novo inserido durante 8 dias associado a 50mg de P4 e 2mg de BE (grupo IN/P4+BE; n=61); Crestar®reutilizado inserido durante 10 dias associado a administração de 3mg de NG e 5mg de VE (grupo IR/NG+VE; n=58) ou Crestar®reutilizado inserido durante 8 dias associado a e 50mg de P4 e 2mg de BE (grupo IR/P4+BE; n=61). No dia da remoção dos implantes os animais receberam 7,5mg de Luprostiol e 24 horas após a remoção 1mg de BE. A IATF foi realizada 54 a 56 horas após a retirada dos implantes. Após a IATF, as vacas tiveram os estros observados durante um período de 49 dias e em estro foram reinseminadas 12 horas após a observação. O diagnóstico de gestação foi realizado por ultra-sonografia 35 dias após a IATF e após o final da estação de monta. Foram avaliadas as taxas de prenhez na IATF (TP IATF) e no final da estação de monta (TP EM). Não houve interação entre as características dos implantes (novos e reutilizados) e os tratamentos administrados no dia da inserção do implante (NG+VE e P4+BE). A utilização do CIDR®novo ou reutilizado não teve efeito nas TP IATF (48,3% vs 48,7%) e nas TP EM (85,2 vs 86,5%). Os tratamentos com NG+VE e P4+BE não tiveram efeito nas TP IATF (49,5 vs 47,5%) e TP EM (86,5 vs 85,2%). Houve efeito do número de parições (primíparas e multíparas) nas TP IATF (35% vs. 52,7%; P<0,01) e nas TP EM (71,9% vs. 90,2%; P<0,01). Conclui-se que implantes de norgestomet novos e reutilizados, quando associados ao NG+VE ou P4+BE promovem taxas de prenhez bastante satisfatórias em vacas Nelore e que melhores taxas são obtidas em fêmeas multíparas.
Mostrar más [+] Menos [-]Comparação entre a técnica de cultivo em camada delgada de ágar Middlebrook 7H11 e meio de Stonebrink para isolamento de Mycobacterium Bovis em amostras de campo Texto completo
2006
André Guaragna Marcondes | Maria de Lourdes M. Shikama | Sílvio Arruda Vasconcellos | Nílson Roberti Benites | Zenaide Maria de Morais | Eliana Roxo | Ricardo Augusto Dias | Sylvia Luisa Pincherle Cardoso Leão | Sônia Regina Pinheiro
O presente trabalho teve por objetivo avaliar a eficiência da técnica de cultivo em camada delgada de ágar Middlebrook 7H11 (TL7H11) no isolamento de Mycobacterium bovis de lesões sugestivas de tuberculose em bovinos, comparando seus resultados com os métodos tradicionais de cultivo. Numa primeira fase foram utilizadas estirpes padrão de M. bovis AN5 e M. tuberculosis H37Rv mantidas em laboratório, para comparação de desempenho entre o cultivo em TL7H11 e nos meios de Stonebrik e Petragnani. Ambas estirpes apresentaram crescimento visível em TL7H11 no terceiro dia de cultivo enquanto que nos meios de Stonebrink e Petragnani só houve crescimento a partir do 14º dia. Aos 13 dias de cultivo em TL7H11 foi possível diferenciar as duas estirpes pelas características morfológicas das colônias. Numa segunda fase, 62 amostras de campo foram cultivadas em TL7H11 e Stonebrink para isolamento de M. bovis. As amostras isoladas foram detectadas pelo TL7H11 até os 21 dias de cultivo contra nenhum crescimento dos tubos de Stonebrink. O tempo médio de crescimento no TL7H11 foi de 19,0 dias contra 49,0 dias do meio de Stonebrink (p = 0,014).
Mostrar más [+] Menos [-]Efeito do intervalo inseminação-ovulação induzida sobre a taxa de fecundação, viabilidade embrionária e número de espermatozóides acessórios em porcas Texto completo
2006
Carlos Henrique Cabral Viana | Pedro Henrique Candini | Rogério Dantas Gama | Adriana Carbone | Renato Campanarut Barnabe
O intervalo ideal entre a AI e ovulação (OV) não está bem determinado ainda, variando entre 12 a 28 h antes até 4 h depois da ovulação. A utilização de gonadotrofinas para sincronizar ovulação permitiria a pré-determinação do tamanho dos grupos, de acordo com os intervalos IA-OV, e possibilitaria determinar um intervalo seguro entre IA-OV. 120 porcas receberam 7.5 mg IM de Luprostiol, entre os dias 12 e 17 do ciclo estral, 600 IU de eCG IM 24 h após o Luprostiol e 5.0 mg de LH IM 72 h após a injeção de eCG. O momento de ovulação foi diagnosticado pela ultra-sonografia trans-retal a intervalos de 6 h. Definiu-se 5 tratamentos de acordo com o intervalo IA-OV: T1 - 48 a 36 h antes da OV; T2 - 36 a 24 h antes da OV; T3 - 24 a 12 h antes da OV; T4 - 12 a 0 h antes da OV e T5 - 0 a 12 h após a OV. O abate ocorreu 96.7±11.37 h após a OV. A taxa de recuperação (RR), número de lutea de corpos (NC), número total de estruturas (ST), taxa de fecundação (FR), viabilidade embrionária (EV) e número de espermatozóides acessórios (AS) foram analisados. O protocolo de sincronização mostrou uma distribuição homogênea dos animais entre os tratamentos (intervalo LH-OV de 39.22±7.6h), e não influenciou os resultados. A FR e os resultados de EV sugerem que 36 h seja o tempo de viabilidade do espermatozóide trato genital da porca. Houve um forte declínio do AS entre T3 e T4.
Mostrar más [+] Menos [-]Teste de toxicidade e criopreservação de folículos pré-antrais ovinos isolados utilizando Glicerol, Etilenoglicol, Dimetilsulfóxido e Propanodiol Texto completo
2006
Regiane Rodrigues dos Santos | Ana Paula Ribeiro Rodrigues | Sônia Helena Furtado Costa | Maria Helena Tavares Matos | José Roberto Viana Silva | Juliana Jales de Hollanda Celestino | Fabricio Sousa Martins | Marcia Viviane Alves Saraiva | Mônica Aline Parente Melo | José Ricardo de Figueiredo
O objetivo deste estudo foi avaliar folículos pré-antrais (FOPA) ovinos isolados após sua exposição e criopreservação utilizando glicerol (GLI), etilenoglicol (EG), propanodiol (PROH) ou dimetilsulfóxido (DMSO) a 1,5 e 3,0 M. Cada par ovariano de 5 ovelhas sem raça definida foi coletado em abatedouro local e submetido ao isolamento folicular. Da suspensão obtida, uma alíquota foi imediatamente destinada à análise da viabilidade folicular com o auxílio do corante vital azul de trypan. O restante da suspensão foi dividida em 16 alíquotas de 0,9 mL, suspensas (v/v) em MEM+ com EG, DMSO, GLI ou PROH a 1,5 ou 3,0 M, para teste de toxicidade e criopreservação. Após o término de cada tratamento, a viabilidade folicular foi analisada e os FOPA considerados viáveis se não corados ou não viáveis, quando corados. A análise dos dados mostrou que após o teste de toxicidade e criopreservação, em todos os crioprotetores e em ambas as concentrações, a percentagem de FOPA viáveis foi significativamente reduzida quando comparada ao controle. No teste de toxicidade, quando os crioprotetores foram comparados entre si nas mesmas concentrações, foram observadas percentagens significativamente menores de FOPA viáveis no PROH 3,0 M (38,9%), apresentando-se, portanto, mais tóxico quando comparado aos demais crioprotetores. Após criopreservação, obteve-se percentagens significativamente maiores de folículos pré-antrais viáveis quando o EG e o DMSO foram utilizados. Em conclusão, FOPA ovinos isolados podem ser criopreservados com sucesso utilizando-se DMSO e EG a 1,5 e 3,0 M.
Mostrar más [+] Menos [-]Estudo retrospectivo de osteossarcoma primário dos ossos da pelve em cães em um período de 14 meses Texto completo
2006
Carlos Roberto Daleck | Julio Carlos Canola | Sandro Alex Stefanes | Pablo Felipe Leoz Schocken | Andrigo Barboza De Nardi
O osteossarcoma (OSA) é um dos tumores malignos mais comum em cães. Geralmente acomete cães de raça grande e gigante, com idade média de sete anos. Esta neoplasia envolve, freqüentemente, a metáfise de ossos longos, sendo indicado à amputação radical do membro, acrescido de quimioterapia com cisplatina. A terapêutica desta neoplasia com localização na pelve torna-se difícil e normalmente não aceita pelos proprietários. O presente trabalho relata a incidência de osteossarcoma primário em ossos da pelve em cães, durante um período de 14 meses. Dos oito animais atendidos com esta neoplasia, observou-se maior freqüência nos cães da raça Rottweiler e Pastor Alemão. Dentre os ossos que compõem a pelve do animal se observou maior incidência de OSA acometendo o ílio (6 casos). Claudicação, impotência funcional de membro pélvico e dor foram os principais sinais clínicos observados. Em sete casos encontrou-se estágio avançado de comprometimento ósseo na imagem radiográfica, evidenciado, principalmente, pela lise da cortical óssea. Todos os animais foram submetidos à eutanásia por não apresentarem possibilidade de tratamento cirúrgico (hemipelvectomia) com margem de segurança. Também se levou em consideração para esta decisão à condição clínica dos pacientes, as chances de conferir melhora na qualidade de vida dos cães e a opção dos proprietários frente ao prognóstico.
Mostrar más [+] Menos [-]Estudo da correlação das características citológicas vaginais e os níveis séricos de estradiol e progesterona em leão africano (Panthera leo) mantidos em cativeiro Texto completo
2006
Guilherme Costa de Oliveira e Silva | Patrícia Espíndola Bretas Berbare | Rogério Loesch Zaccariotti | Sandra Helena Ramiro Corrêa | Cláudio Alvarenga de Oliveira | Marcelo Alcindo de Barros Vaz Guimarães
Foram estudados 11 exemplares de fêmeas adultas de leões africanos (Panthera leo) mantidas na Fundação Parque Zoológico de São Paulo (FPZSP) quanto às características da citologia vaginal, níveis hormonais (estradiol e progesterona) e suas correlações. As características celulares vaginais encontradas nas leoas foram semelhantes às descritas para os felinos domésticos. Adotando-se os padrões hormonais de estradiol (E2) e progesterona (P4) que definem as fases do ciclo estral de felinos domésticos, foi possível caracterizar três fases do ciclo ovariano nas leoas: Diestro, Estro e Interestro. O nível médio de E2 sérico encontrado na fase caracterizada como Estro (23,33 +/- 2,92 pg/ml), apresentou-se mais alto do que nas outras fases estudadas e o nível médio de P4 sérico encontrado na fase de Diestro (20,12 +/- 17,55 ng/ml) apresentou diferença estatística significativa em comparação às outras fases estudadas. Demonstrou-se também, a existência de correlação de intensidade média entre os níveis séricos de P4 e o número de células superficiais corneificadas (r = - 0,603 e p = 0,0496) e entre P4 e células intermediárias (r = 0,637 e p = 0,0350). Também foi demonstrada a existência de correlação negativa de forte intensidade entre os números de células superficiais corneificadas e o de células intermediárias. (r = -0,979 e p < 0,0001). Concluimos que a correlação entre as características celulares vaginais e os níveis séricos de progesterona e estradiol permitiram-nos determinar três diferentes fases do ciclo ovariano da fêmea de leão africano.
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