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Cultivo primário de células hepáticas de Metynnis roosevelti (Pisces, Teleostei, Characidae)
2000
Ligia Maria Salvo | Maria Ivette Carboni Malucelli | Rosária Regina Tesoni B. Richartz | Metry Bacila
A fim de obter culturas celulares e monocamada de células hepáticas do peixe subtropical Metynnis roosevelti, foram comparadas três metodologias: dissociação celular enzimática com tripsina versene 0,25%; utilização do soro fetal bovino; e soro homólogo, obtido por meio da punção da veia caudal, de exemplares adultos da mesma espécie de peixe. O meio de cultura utilizado foi F10-199 acrescido de L-glutamina 2 mM, insulina 10 µg/mL, fibronectina 50 µg/mL; e antibióticos. A dissociação celular enzimática apresentou maior eficiência na adesão e confluência da monocamada celular em comparação a outras metodologias utilizadas.
Mostrar más [+] Menos [-]Efeito dos timócitos sobre a reprodução de fêmeas de camundongos "nude"
2000
Vera Lúcia Petricevich | Vera Regina Farago Ferreira
A colônia de camundongos da linhagem BALB/c, heterozigotos e homozigotos, foi mantida em condições convencionais no Biotério Experimental do Instituto Butantan. Os camundongos "nude" apresentam severa deficiência no sistema reprodutor. As fêmeas de camundongos "nude" são geralmente estéreis; apenas 8,8% apresentam fertilidade espontânea. Para estudar o envolvimento do timo sobre os defeitos na reprodução em diferentes estágios de desenvolvimento, as fêmeas de camundongos "nude" foram tratadas com suspensões de timócitos, e, em seguida, acasaladas com machos heterozigotos. Os resultados obtidos para fêmeas "nude" com 10 e 30 dias de idade foram respectivamente: a) número de fêmeas prenhes = 48% e 12%; b) número de filhotes por fêmea = 5,0 e 4,0; c) as taxas de natalidade foram 2,40 e 0,48; e d) nas condições utilizadas neste trabalho, a vida média dos camundongos "nude" foi prolongada até 7 meses. Este método descreve o aumento do número de animais "nude", importantes em estudos biológicos. Considerando a dificuldade de obtenção de camundongos "nude" em grande número, o uso deste método poderia contribuir para o melhoramento das condições de vida dos animais utilizados nos acasalamentos.
Mostrar más [+] Menos [-]Vascularização arterial da bolsa cloacal em Gallus gallus domesticus (Matrizes de corte Avian Farms)
2000
Marcelo Ismar Silva Santana | Frederico Ozanam Carneiro e Silva | Renato Souto Severino | André Luís Quagliatto Santos | Sérgio Salazar Drummond | Pedro Primo Bombonato
Estudou-se em trinta exemplares de Gallus gallus domesticus da linhagem Avian Farms, fêmeas, com idades entre 10 e 12 semanas, a origem, o número e a ordenação dos vasos arteriais da bolsa cloacal, mediante injeção dos sistemas vasculares arteriais das aves com solução aquosa de Neoprene Látex 450 a 50% e posterior dissecação. Os resultados mostraram a participação das artérias bursocloacais direita e esquerda em todos os casos, às quais se associavam as artérias mesentérica caudal e caudal mediana em 13,33% e 3,33% dos casos, respectivamente. O número total de vasos, independentemente da origem, variou de 2 a 5 com maior freqüência de 2 a 3 vasos.
Mostrar más [+] Menos [-]Perfis hematológico e bioquímico de ratos (Rattus norvegicus) mantidos sob sistema de ventilação microambiental
2000
Maria Araújo Teixeira | Luziane do Carmo Andrade Guinski Chaguri | André Silva Carissimi | Nívea Lopes de Souza | Claudia Madalena Cabrera Mori | Valéria Maria Wanderley Gomes | Adelino Poli Neto | Kimiyo Nonoyama | José Luiz Bernardino Merusse
Em estudos anteriores, demonstrou-se que ratos mantidos em sistema de Ventilação Microambiental (VMA) apresentaram parâmetros de produtividade e padrão sanitário melhores do que aqueles mantidos em sistema de Ventilação Geral Diluidora (VGD). Outra etapa dos experimentos foi determinar os parâmetros fisiológicos destes animais. O presente estudo foi realizado para avaliar os perfis hematológico e bioquímico de ratos mantidos sob o sistema de VMA. Para tanto, foram realizados dois experimentos diferentes, com ratos mantidos em VMA, quais sejam: Experimento 1 (E1), no qual foi avaliado o desempenho reprodutivo de machos e fêmeas, sob duas faixas de velocidade de ar (FV1 - de 0,03 a 0,26 m/s, e FV2 - de 0,27 a 0,80 m/s); Experimento 2 (E2), no qual foram avaliados diferentes intervalos de troca de cama (3, 5, 7 e 9 dias), para ratos machos mantidos a uma velocidade de ar constante de 0,5 m/s. Os valores do hemograma e de parâmetros bioquímicos destes animais foram comparados com os valores encontrados em ratos mantidos sob VGD. Os resultados obtidos demonstraram diferenças estatísticas em alguns dos parâmetros observados, tanto entre os sistemas VGD e VMA, como entre os diferentes grupos de VMA. Contudo, os valores encontrados em todos os parâmetros avaliados encontram-se dentro de faixas de variação normal para a espécie estudada, como é descrito na literatura. Isto indica que o emprego do sistema de VMA não induz alterações relevantes nos parâmetros fisiológicos estudados.
Mostrar más [+] Menos [-]Acidez total titulável, pH e tempo de redução do azul de metileno no fluido ruminal de caprinos mantidos em pastagens artificiais, exclusiva de gramíneas, ou em caatinga
2000
Mauro Pereira de Figueiredo | Danilo Gusmão de Quadros | Jurandir Ferreira da Cruz
O objetivo deste trabalho foi o de determinar a concentração hidrogeniônica (pH), acidez total titulável e tempo de redução do azul de metileno no fluido ruminal de caprinos com ou sem raça definida, mantidos em pastagens artificiais, exclusivas de gramíneas, ou em caatinga, durante as épocas chuvosa e seca do ano. O delineamento experimental foi inteiramente casualizado, sendo analisado em esquema fatorial 2³ (animais com e sem raça definida, pastagens artificiais e em caatinga, épocas chuvosa e seca do ano). O tipo de pastagem influenciou significativamente (p < 0,05) os valores encontrados para acidez total titulável. Em relação ao pH, o tipo de pastagem e época do ano foram significativamente (p < 0,05) os fatores mais incisivos. A atividade microbiana, avaliada através dos parâmetros estudados, foi mais intensa na época das águas e na caatinga em relação à da seca e pastagens artificiais, respectivamente. Na avaliação dos resultados desses testes, deve-se sempre levar em consideração principalmente a época do ano e o tipo de pastagem, sem, no entanto, desprezar o fator raça.
Mostrar más [+] Menos [-]Sexagem de embriões bovinos fecundados in vitro pela técnica de PCR multiplex
2000
Marcelo Rezende Luz | Yeda Fumie Watanabe | Jesus Aparecido Ferro | Maria Inês T. Ferro | Sônia Marli Singaretti de Mauro | Vera Fernanda Martins Hossepian de Lima | Paulo Henrique Franceschini
Neste trabalho, a técnica de PCR ("polymerase chain reaction") foi utilizada para a sexagem de 92 embriões bovinos fertilizados in vitro. Os embriões originaram-se de fertilização in vitro de oócitos aspirados de ovários de fêmeas bovinas, provenientes de abatedouros comerciais. Os oócitos foram maturados, fertilizados e cultivados até o estádio de blastocisto. Os embriões foram lavados em solução de PBS, transferidos para tubos de polipropileno contendo água ultrapura, e imediatamente congelados a -196ºC. Os embriões foram descongelados sobre isopor contendo gelo picado e tratados com proteinase K. Para a reação de PCR, utilizaram-se alíquotas de 34 µl de cada tudo, onde foram acrescidos dois pares de primers, seqüência BC1.2 e seqüência satélite 1.715, desoxinucleotídeos, MgCl2, tampão PCR 10X, TaqDNA polimerase e água, em um volume final de 50 µl. As amostras foram amplificadas e a eletroforese realizada em gel de poliacrilamida a 8%. Os géis foram corados com solução de brometo de etídio e analisados em transiluminador de luz ultravioleta. Um índice de 93,47% de amplificação foi atingido, com 41 embriões (47,67%) machos e 45 (52,32%) embriões fêmeas. O uso de gel de poliacrilamida a 8% foi eficaz na separação de fragmentos de DNA muito próximos.
Mostrar más [+] Menos [-]Características ultra-estruturais e diferenciativas das espermátides de piracanjuba (Brycon orbignyanus) durante a espermiogênese
2000
Eduardo Duarte Aires | Maíra Aparecida Stefanini | Antonio Marcos Orsi
A espermiogênese que ocorre em piracanjuba Brycon orbignyanus pode ser dividida em quatro etapas morfológicas, cujas características principais consistem em reduções dos volumes citoplasmático, nuclear e celular, e compactação da cromatina nuclear das espermátides, sendo que as etapas espermiogenéticas ocorrem simultaneamente. Ao final da espermiogênese, quando as espermátides atingem nível elevado de diferenciação, os núcleos se tornam mais compactos e os citoplasmas se tornam reduzidos. Estas modificações resultam na formação de células altamente diferenciadas, os espermatozóides com cabeça, peça intermediária e flagelo bem definidos. As espermátides e os espermatozóides foram observados em cistos germinativos, mas também podem ser encontrados na luz dos túbulos seminíferos.
Mostrar más [+] Menos [-]Efeito de dois meios de capacitação dos espermatozóides de carneiros na reação acrossômica e no teste de penetração em oócitos de hamster
2000
Silvia Ferrari | Valquíria Hyppolito Barnabe | Roberta Mara Züge | Maria Amélia Zogno
Foram realizados 24 experimentos de penetração de espermatozóides de carneiros em oócitos zona-free de hamster com a finalidade de avaliar dois diferentes meios de capacitação espermática. Foi feito um "pool" do sêmen fresco de três carneiros mestiços, submetido à lavagem por centrifugação para retirada do plasma seminal e incubação em meio altamente iônico (HIS) ou em meio quimicamente definido acrescido de HEPES, soro de ovelha no cio e heparina, a fim de promover a capacitação dos espermatozóides. Foram utilizadas 96 hamsters fêmeas, superovuladas com os hormônios PMSG e hCG, que forneceram 3.069 oócitos, (média de 31,97 oócitos por fêmea). Os oócitos foram tratados em meio TL-HEPES-PVA com hialuronidase, a fim de retirar as células do cumulus. A zona pelúcida foi retirada através de lavagem dos oócitos em meio TL-HEPES-PVA com tripsina. Em seguida, os oócitos foram colocados em placas de fertilização, às quais se adicionaram os espermatozóides capacitados, permanecendo em estufa de CO2 por 3 horas a 38,5ºC, para promover a penetração. A seguir, procedeu-se à fixação e coloração dos oócitos. Foram realizados experimentos de coloração dos espermatozóides capacitados pela técnica de tripla coloração simplificada. Não houve diferença estatisticamente significativa (p >; 0,05) entre os meios utilizados, no que diz respeito à taxa de penetração dos espermatozóides capacitados, assim como entre o número de espermatozóides viáveis com reação acrossômica após a capacitação em dois diferentes meios. Assim, ambos os meios utilizados, conjugados com o período de incubação, foram eficientes na capacitação dos espermatozóides de ovinos.
Mostrar más [+] Menos [-]Análise cromossômica em bovinos e eqüinos
2000
Mônica Regina Vendrame Amarante | Patrícia Miyuki Tsuribe | Wilham Jorge | Gilberto Pedroso da Rocha
Foram analisados os cromossomos de 117 bovinos de diferentes raças para identificação de fusão cêntrica e os cromossomos de 100 éguas jovens da raça Brasileiro de Hipismo para identificação de linhagens 63,X, utilizando a técnica de identificação do X baseada na heterocromatina intersticial do braço longo.
Mostrar más [+] Menos [-]Atividade antimicrobiana de Tagetes minuta L. - Compositae (Chinchilho) frente a bactérias Gram-positivas e Gram-negativas
2000
Claudia Ache Saldanha de Souza | César Augusto Marchionatti Avancini | José Maria Wiest
O decocto de Tagetes minuta L. - Compositae - (Chinchilho) foi submetido a testes de diluição serial com técnica de tubos múltiplos para determinação de atividade antimicrobiana - expressa em Concentração Inibidora Mínima (CIM) e Concentração Bactericida Mínima (CBM) -, frente a diferentes diluições de inóculos de bactérias Gram-positivas (Staphylococcus aureus, Enterococcus faecium) e Gram-negativas (Salmonella Gallinarum e Escherichia coli). A análise estatística dos resultados mostrou, para parte das combinações concentrações do decocto/diluições do inóculo, que Staphylococcus, Enterococcus e Salmonella têm maior sensibilidade ao decocto como antimicrobiano, demonstrando ação de seletividade. E. coli demonstrou-se praticamente resistente à atividade antimicrobiana do decocto, mesmo reduzindo-se a concentração de seu inóculo abaixo de 10(4) ufc/ml. Confirma-se assim o atributo anti-séptico, conferido popularmente ao decocto de Tagetes minuta (Chinchilho), sugerindo-se a possibilidade da sua utilização como anti-séptico/desinfetante em situações-problemas específicas em saúde e em produção animal, relacionadas aos agentes testados, adequando-se inclusive a situações de carência de recursos econômicos ou de exclusão econômico-social.
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