Optimization of electroporation conditions for maize microspores [Zea mays L.]
2004
Obert, B. (Slovak Academy of Sciences, Nitra. Inst. of Plant Genetics and Biotechnology) | Prêt´ová, A. (Slovak Academy of Sciences, Nitra. Inst. of Plant Genetics and Biotechnology) | Pónya, Z. (Hungarian Academy of Sciences, Martonvasar. Agricultural Research Inst.) | Barnabás, B. (Hungarian Academy of Sciences, Martonvasar. Agricultural Research Inst.)
anglais. Microspore culture can be used for homozygous dihaploid plant production and the uninuclear origin of microspore-derived dihaploid plants is an excellent basis for plant transformation, as a plant with integrated foreign gene in a homozygous set can be obtained in a considerably short time. An electroporation method for delivery of foreign DNA into mechanically isolated microspores of maize (Zea mays L.) was developed. Different media for electroporation and different concentrations of plasmid DNA were tested. Physical factors affecting efficiency of electroporation (number of pulses, duration of the pulse, voltage, frequency) and plasmid DNA concentration were optimised and discussed, relating to microspore viability, induction of gametic embryogenesis after electroporation and the number of GUS expressing microspores
Afficher plus [+] Moins [-]italien. [La coltura di microspore può essere utilizzata per la produzione di piante diaploidi omozigoti e l´origine uninucleare di piante diploidi derivate da microspore è una base eccellente per la trasformazione delle piante, in quanto una pianta con un gene estraneo integrato in un complesso omozigote può essere ottenuta in un tempo considerevolmente breve. E´ stato sviluppato un metodo di elettroporazione per l´inserimento di DNA estraneo in microspore di mais (Zea mays L.) isolate meccanicamente. Sono stati sperimentati differenti substrati per l´elettroporazione e concentrazioni differenti di DNA plasmidiale. Sono stati ottimizzati e discussi i fattori fisici che influenzano l´efficienza dell´elettroporazione (numero di impulsi, durata dell´impulso, voltaggio, frequenza), in relazione alla vitalità delle microspore, all´induzione dell´embriogenesi gamica dopo l´elettroporazione e al numero di microspore che esprimono il gene GUS.]
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Informations bibliographiques
Cette notice bibliographique a été fournie par Istituto di Servizi per il Mercato Agricolo Alimentare
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