Method for maintenance of coffee leaves in vitro for mass rearing of Leucoptera coffeellum (Guérin-Méneville) (Lepidoptera: Lyonetiidae)

anglais. To accomplish systematic studies with coffee leafminer, it is necessary to establish a mass rearing system under artificial conditions. It is possible to rear this species, from egg to adult, under laboratory conditions, without using coffee seedlings but detached leaves maintained in vitro. Synthetic cytokinins are routinely used for maintenance of plant cell and plant tissues in vitro. Two plant growth regulators, benzyladenin and kinetin, in concentrations 10-6 and 10-7 M were used to mantain the leaves. Green leaves collected in the field were maintained in the solution to be tested. Distilled water served as control. The experiment lasted 30 days, a period longer than the necessary for the complete development of the insect. Both artificial cytokinines indeed increased the lifetime of the coffee leaves, maintaining them green and healthy. Leaves placed in the cages for oviposition were attractive to the insect, with significant number of eggs per leaf. In most cases, eggs resulted in individuals that completed the whole developmental cycle. Tests with regulator in different concentrations with healthy leaves showed efficiency. However, we believe that hormone concentrations to be used with mined leaves should be larger, because these when maintained at 10-7 M leaves did not present a satisfactory lifetime. Therefore, tests with mined leaves with different hormone concentrations should be made to find out the ideal concentration for leaf survival. In our laboratory we are successfully using 10-6 M benzyladenin for the maintenance of mined leaves.

portugais. Para realizar estudos sistemáticos com o bicho-mineiro-do-cafeeiro, é necessário estabelecer uma criação massal em condições artificiais. É possível criar esta espécie, de ovo até adulto, em condições de laboratório, sem usar mudas de café, utilizando-se folhas destacadas mantidas in vitro. Citocininas sintéticas são habitualmente usadas para manutenção de células e tecidos vegetais in vitro. Devido a essa propriedade, foram escolhidos dois reguladores de crescimento de planta, benziladenina e cinetina, em concentrações 10-6 e 10-7 M, para a manutenção das folhas. Folhas coletadas em campo foram mantidas nas diferentes soluções a serem testadas. Utilizou-se água destilada como controle. O experimento durou 30 dias, período suficiente para o desenvolvimento completo do inseto. Observou-se que ambas as citocininas artificiais em ambas as concentrações aumentaram o tempo de vida das folhas de café mantendo-as verdes e em condições de criar o inseto. Folhas colocadas nas gaiolas atraíram os adultos, verificando-se oviposições nas mesmas. Estes ovos resultaram em indivíduos que completaram todo o ciclo de desenvolvimento. Os testes com os reguladores em diferentes concentrações com folhas saudáveis mostraram eficiência, porém, há evidências de que as concentrações do hormônio a ser usado com folhas minadas devem ser maiores, porque quando estas foram submetidas à concentração escolhida de 10-7 M, o tempo de vida não foi satisfatório. Portanto, devem ser executados testes com concentrações de hormônio diferentes, utilizando-se folhas minadas, para se descobrir a concentração ideal à sobrevivência destas folhas. Em nosso laboratório estamos usando benziladenina na concentração de 10-6 M com sucesso para a manutenção de folhas minadas.